【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因检测，具体涉及用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1-01:01分型检测扩增引物组、试剂、试剂盒。
技术介绍
1、奈韦拉平是一类治疗hiv-1感染的非核苷逆转录酶抑制剂，与hiv-1的逆转录酶直接连接，使此酶的催化端破裂来阻断rna依赖/dna依赖的dna聚合酶活性。使用此药物后，最严重的药物不良反应是stevens-johnson综合征，毒性表皮坏死溶离，重症肝炎/肝衰竭和过敏反应，其特征为皮疹，伴全身症状，如发热、关节痛、肌痛和淋巴结病，以及内脏损害，如肝炎、嗜酸细胞增多、粒细胞缺乏症和肾功能损害。临床研究表明：患者使用奈韦拉平片后，约48％的患者会出现全身反应或皮肤反应，4.9％的患者会引发肝毒，0.3％的患者则会出现sjs/ten等严重皮肤反应。不同个体对药物的耐受力不同，临床医师不能预先判定疾病的复发频度以及侵袭性，以及对奈韦拉平药物不良反应的顾虑，很难决定针对某个患者是否采用奈韦拉平药物进行辅助治疗，而研究表明，奈韦拉平所致的药物不良反应与人hla基因的hla-drb1*01:01亚型密切相关，通过对人hla-drb1*01:01亚型携带者进行检测，将有效避免在临床上出现的肝脏毒性等不良反应，提高患者疗效。
2、人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,hla)是目前所知人体最复杂的多态系统，hla复合体位于人类第6号染色体短臂6p21.31上，占人类整个基因组的1/3000。自jean dausset于1958年发现第1个hla抗原以来，hla已成为免疫遗传学、免
3、目前，常用的hla基因分型方法有直接测序法、pcr-rflp(限制性片段长度多态性分析)、pcr-sso(序列特异性寡核苷酸探针)、pcr-ssp(序列特异性引物pcr技术)和pcr-sscp(单链构象多态性分析)等。其中直接测序法在所有snp的检测方法中，是最为准确的方法，但是，存在操作繁琐、耗时长、成本高昂的缺点；pcr-rflp是通过电泳观察结果，尚不能检出所有的hla等位基因；pcr-sso是以同位素或非放射性标记的探针与pcr扩增的目标片断产物杂交，根据阳性斑点判断个体基因型，但是需要不同探针的杂交条件严格统一，易出现误差，不能检测新等位基因，分辨率低；pcr-ssp借助pcr技术获得hla型特异的扩增产物，通过电泳直接分析带型，但是不易自动化，且无法检测新的等位基因；pcr-sscp是一种简单、高效地检测dna或rna序列中点突变的技术，需要进一步测序去确定突变的位置和类型，容易出现重叠峰。这些方法均是针对全部或特定hla基因所有可能的型或亚型的全面性检测方法，对于奈韦拉平的精准快速用药指导没有指导意义，难以满足临床的需求，因此亟需一种精准快速的hla-drb1*01:01基因型检测方法。
技术实现思路
1、有鉴于此，一方面，一些实施例公开了用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测扩增引物组，包括：
2、hla-drb1*01:01-f，其序列为：
3、5’-cytgtggcagcttaagtttgaa-3’；其中，y为简并碱基，代表c/t；
4、hla-drb1*01:01-r，其序列为：
5、5’-cactgtgaagctctcacaaac-3’；
6、hla-drb1*01:01-p，其序列为：
7、5’-fam-catctataaccaagaggagtccgtgcg-3’-bhq1。
8、进一步，一些实施例公开的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测扩增引物组，还包括内标基因特异性扩增引物组，内标基因特异性扩增引物组包括：
9、cftr-f，其序列为：
10、5’-gtaggaagtcaccaaagcagtaca-3’；
11、cftr-r，其序列为：
12、5’-agctattctcatctgcattcca-3’；
13、cftr-p，其序列为：
14、5’-cy5-ctatgacccggataacaaggaggaacgc-3’-bhq2。
15、再一方面，一些实施例公开了用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂，包括用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测扩增引物组。
16、一些实施例公开的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂，分型检测试剂用于对人体dna样本进行检测。
17、一些实施例公开的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂，其进行检测的人体dna样本为血清样本。
18、一些实施例公开的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂，利用分型检测试剂对人体dna样本的检测过程包括：
19、处理人体dna样本；
20、利用分型检测试剂、人体dna样本配置扩增反应体系；
21、扩增反应体系进行扩增反应；
22、根据扩增反应结果判定人体dna样本是否携带有hla-drb1*01:01等位基因。
23、另一方面，一些实施例公开了用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂盒，包括用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂。
24、一些实施例公开的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂盒，分型检测试剂盒用于对人体dna样本进行检测。
25、一些实施例公开的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂盒，其进行检测的人体dna样本为血清样本。
26、一些实施例公开的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂盒，利用分型检测试剂盒对人体dna样本的检测过程包括：
27、处理人体dna样本；
28、利用分型检测试剂、人体dna样本配置扩增反应体系；
29、扩增反应体系进行扩增反应；
30、根据扩增反应结果判定人体dna样本是否携带有hla-drb1*01:01等位基因。
31、本专利技术实施例公开的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测扩增引物组、试剂和试剂盒，包括针对hla-drb1*01:01进行pcr扩增的上下游特异性引物组和一种特异性探针，采用荧光定量arms-pcr的方法，能够准确、快速、简便地检测待测样本是否具有hla-drb1*01:01的基因，具有高通量、特异性高的优点，可用于指导奈韦拉平的合理化用药。
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1.用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测扩增引物组，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测扩增引物组，其特征在于，还包括内标基因特异性扩增引物组，所述内标基因特异性扩增引物组包括：
3.用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测试剂，其特征在于，包括权利要求1或2所述的扩增引物组。
4.根据权利要求3所述的用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测试剂，其特征在于，所述分型检测试剂用于对人体DNA样本进行检测。
5.根据权利要求4所述的用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测试剂，其特征在于，所述人体DNA样本为血清样本。
6.根据权利要求4所述的用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测试剂，其特征在于，利用分型检测试剂对人体DNA样本的检测过程包括：
7.用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求3所述的分型
8.根据权利要求7所述的用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测试剂盒，其特征在于，所述分型检测试剂盒用于对人体DNA样本进行检测。
9.根据权利要求7所述的用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测试剂盒，其特征在于，所述人体DNA样本为血清样本。
10.根据权利要求7所述的用于指导奈韦拉平用药的HLA-DRB1*01:01分型检测试剂盒，其特征在于，利用分型检测试剂盒对人体DNA样本的检测过程包括：
...【技术特征摘要】
1.用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测扩增引物组，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测扩增引物组，其特征在于，还包括内标基因特异性扩增引物组，所述内标基因特异性扩增引物组包括：
3.用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂，其特征在于，包括权利要求1或2所述的扩增引物组。
4.根据权利要求3所述的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂，其特征在于，所述分型检测试剂用于对人体dna样本进行检测。
5.根据权利要求4所述的用于指导奈韦拉平用药的hla-drb1*01:01分型检测试剂，其特征在于，所述人体dna样本为血清样本。
6.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭建成，占闽宁，史健翔，尚文俊，冯帅升，朱丹丹，柳丹华，王丙顺，张静，李英英，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：
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