【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般地涉及异二聚体fc结构域抗体以及与能够与包含根据eu编号的氨基酸突变p329g的此类抗体特异性结合的抗原结合受体的组合。本专利技术还涉及用此种抗原结合受体转导的t细胞以及试剂盒，所述试剂盒包括转导的t细胞和包含此类异二聚体fc结构域的肿瘤靶向抗体。
技术介绍
1、过继性t细胞疗法(act)是一种使用癌症特异性t细胞的强大治疗方法(rosenberg和restifo,science 348(6230)(2015),62-68)。act可以使用天然存在的肿瘤特异性细胞或通过使用t细胞或嵌合抗原受体的基因工程使其具有特异性的t细胞(rosenberg和restifo,science 348(6230)(2015),62-68)。act可以成功治疗和诱导缓解甚至患有晚期和其他治疗难治性疾病的患者，诸如急性淋巴白血病、非霍奇金淋巴瘤或黑色素瘤(dudley等人，j clin oncol 26(32)(2008),5233-5239；grupp等人，n engl j med 368(16)(2013),1509-1518；kochenderfer等人，j clin oncol.(2015)33(6):540-549,doi:10.1200/jco.2014.56.2025.epub 2014年8月25日)。
2、然而，尽管临床疗效令人印象深刻，但act受到治疗相关毒性的限制。act中使用的工程化t细胞的特异性以及由此产生的靶向和脱靶效应主要由抗原结合受体中实施的肿瘤靶向抗原结合部分驱动。由于不可耐受的治疗毒性，肿瘤
3、此外，用于有效裂解肿瘤细胞的肿瘤特异性t细胞的可用性取决于工程化t细胞在体内的长期存活和增殖能力。另一方面，由于不受控制的t细胞应答的持续存在会导致健康组织受损，所以t细胞的体内存活和增殖也可能导致不必要的长期影响(grupp等人，2013nengl j med 368(16):1509-18，maude等人2014 2014n engl j med 371(16):1507-17)。
4、限制严重的治疗相关毒性和提高act安全性的一种方法是通过在免疫突触中引入衔接子分子来限制t细胞的活化和增殖。此类衔接子分子包含小分子双模块开关，例如最近描述的叶酸-fitc开关(kim等人，j am chem soc 2015；137:2832-2835)。另一种方法包括人工修饰的抗体，所述抗体包含一个标签，用于指导和引导t细胞特异性靶向肿瘤细胞(ma等人，pnas 2016；113(4):e450-458，cao等人angew chem 2016；128:1-6，rogers等人pnas2016；113(4):e459-468，tamada等人clin cancer res 2012；18(23):6436-6445)。
5、然而，现有的方法有几个局限性。依赖于分子开关的免疫突触需要引入额外的元件，这些元件可能会引发免疫应答或导致非特异性脱靶效应。此外，这种多组分系统的复杂性可能会限制治疗效果和耐受性。另一方面，在现有治疗性单克隆抗体中引入标签结构可能会影响这些构建体的功效和安全性。此外，添加标签需要额外的修饰和纯化步骤，使此类抗体的生产更加复杂，并进一步需要额外的安全测试。
6、此外，本专利技术人早先已经描述了能够以减少的fc受体结合与突变的结构域特异性结合的抗原结合受体(wo2018/177966)。
7、仍然需要改进的过继性t细胞疗法，该疗法具有提高癌症患者治疗的安全性和/或功效的潜力。
技术实现思路
1、本专利技术提供了抗体，其包含由第一亚基和第二亚基构成的异二聚体fc结构域，其中所述第一亚基包含根据eu编号的氨基酸突变p329g，并且其中所述第二亚基包含根据eu编号的329位的脯氨酸(p)。根据本专利技术的抗体能够高效地募集抗p329g car-t细胞用于杀伤。此外，根据本专利技术的抗体能够高效地募集先天免疫细胞(诸如nk细胞或单核细胞)用于fcgr依赖性adcc，而不需要非特异性交叉活化。
2、同时募集先天免疫细胞与car-t细胞可能尤其有助于通过首先给予抗体并且仅在抗体已经诱导了adcc介导的抗肿瘤功效和减瘤作用的稍后时间点输注car-t细胞来减少不良事件(例如细胞因子释放综合征)。此外，同时募集先天免疫细胞与car-t细胞可能尤其帮助通过活化肿瘤微环境中的抗原呈递细胞(诸如表达fcgr的单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞)来产生二次免疫应答。
3、因此，提供了一种抗体，其包含由第一亚基和第二亚基构成的异二聚体fc结构域，其中所述第一亚基包含根据eu编号的氨基酸突变p329g，并且其中所述第二亚基包含根据eu编号的329位的脯氨酸(p)。
4、在一个方面，fc结构域是igg，特别是igg1 fc结构域。
5、在一个方面，fc结构域是人fc结构域。
6、在一个方面，所述fc结构域包含促进所述fc结构域的第一亚基和第二亚基缔合的修饰。
7、在一个方面，抗体是去岩藻糖基化的。
8、在一个方面，与天然igg1 fc结构域相比，所述异二聚体fc结构域表现出增加的与fc受体的结合亲和力和/或增加的效应子功能，特别地，其中所述效应子功能为adcc。
9、在一个方面，所述异二聚体fc结构域包含一个或多个氨基酸突变，所述一个或多个氨基酸突变增加与fc受体的结合和/或效应子功能，特别地，其中所述效应子功能为adcc。
10、在一个方面，所述抗体包含至少一个能够与靶细胞上的抗原特异性结合的抗原结合部分。
11、在一个方面，靶细胞为癌细胞。
12、在一个方面，所述抗原选自由以下项组成的组：fap、cea、p95her2、bcma、epcam、msln、mcsp、her-1、her-2、her-3、cd19、cd20、cd22、cd33、cd38、cd52flt3、epcam、igf-1r、folr1、trop-2、ca-12-5、hla-dr、muc-1(粘蛋白)、gd2、a33-抗原、psma、psca、转铁蛋白-受体、tnc(腱生蛋白)和ca-ix。
13、在一个方面，抗原结合部分为scfv、fab、crossfab或scfab。
14、在一个方面，抗体为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。
15、在一个方面，抗体为多特异性抗体。
16、进一步提供了编码本文所述的抗体的分离的多核苷酸。
17、进一步提供了包含本文所述的分离的多核苷酸的宿主细胞。
18、进一步提供了一种生产抗体的方法，所述方法包括以下步骤：(a)在适合表达所述抗体的条件下培养本文所述的宿主细胞，以及任选地(b)回收所述抗体。
19、进一步提供了通过本文所述的方法生产的抗体。
20、进一步提供了一种药物组合本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗体，其包含由第一亚基和第二亚基构成的异二聚体Fc结构域，其中所述第一亚基包含根据EU编号的氨基酸突变P329G，并且其中所述第二亚基包含根据EU编号的329位的脯氨酸(P)。
2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述Fc结构域为IgG Fc结构域，特别是IgG1 Fc结构域。
3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述Fc结构域为人Fc结构域。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的抗体，其中所述Fc结构域包含促进所述Fc结构域的所述第一亚基和所述第二亚基进行缔合的修饰。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗体，其中所述抗体是去岩藻糖基化的。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体，其中与天然IgG1 Fc结构域相比，所述异二聚体Fc结构域表现出增加的与Fc受体的结合亲和力和/或增加的效应子功能，特别地，其中所述效应子功能为ADCC。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗体，其中所述异二聚体Fc结构域包含一个或多个氨基酸突变，所述一个或多个氨基酸突变增加与Fc受体的结合和/或效应子功能，特别地，其
8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含至少一个能够与靶细胞上的抗原特异性结合的抗原结合部分。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的抗体，其中所述靶细胞为癌细胞。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的抗体，其中所述抗原选自由以下项组成的组：FAP、CEA、p95 HER2、BCMA、EpCAM、MSLN、MCSP、HER-1、HER-2、HER-3、CD19、CD20、CD22、CD33、CD38、CD52Flt3、EpCAM、IGF-1R、FOLR1、Trop-2、CA-12-5、HLA-DR、MUC-1(粘蛋白)、GD2、A33-抗原、PSMA、PSCA、转铁蛋白-受体、TNC(腱生蛋白)和CA-IX。
11.根据权利要求8至10中任一项所述的抗体，其中所述抗原结合部分为scFv、Fab、crossFab或scFab。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的抗体，其为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的抗体，其中所述抗体为多特异性抗体。
14.一种分离的多核苷酸，其编码根据权利要求1至13中任一项所述的抗体。
15.一种宿主细胞，其包含根据权利要求14所述的分离的多核苷酸。
16.一种生产抗体的方法，所述方法包括以下步骤：(a)在适合表达所述抗体的条件下培养根据权利要求15所述的宿主细胞，以及任选地(b)回收所述抗体。
17.一种抗体，其通过根据权利要求16所述的方法生产。
18.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至13或17中任一项所述的抗体以及药用载体。
19.根据权利要求1至13中任一项所述的抗体和转导的T细胞，其用于组合治疗癌症，其中所述转导的T细胞表达能够与所述第一亚基特异性结合的抗原结合受体。
20.根据权利要求19所述使用的抗体和转导的T细胞，其中所述抗原结合受体能够与Fc结构域亚基特异性结合，所述Fc结构域亚基包含根据EU编号的氨基酸突变P329G。
21.根据权利要求20所述使用的抗体和转导的T细胞，其中所述抗原结合受体包含：重链可变结构域(VH)，其包含：
22.根据权利要求19至21中任一项所述使用的抗体和转导的T细胞，其中所述抗原结合受体包含
23.根据权利要求19至22所述使用的抗体和转导的T细胞，其中在施用所述抗体之前、同时或之后施用所述转导的T细胞。
24.一种治疗个体的癌症或延迟其进展的方法，所述方法包括向所述个体施用有效量的抗体和转导的T细胞，其中所述抗体包含由第一亚基和第二亚基构成的异二聚体Fc结构域，其中所述第一亚基包含根据EU编号的氨基酸突变P329G，其中所述第二亚基包含根据EU编号的329位的脯氨酸(P)，并且其中所述转导的T细胞表达能够与所述第一亚基特异性结合的抗原结合受体。
25.根据权利要求24所述的方法，其中所述抗原结合受体能够与包含根据EU编号的氨基酸突变P329G的Fc结构域亚基特异性结合。
26.根据权利要求24或25所述的方法，其中所述抗原结合受体包含：重链可变结构域(VH)，其包含：
27.根据权利要求24至26中任一项所述的方法，其中所述抗原结合受体包含：
28.根据权利要求24至27中任一项所述的方法，其中在施用所述抗体之前、同时或之后施用所...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种抗体，其包含由第一亚基和第二亚基构成的异二聚体fc结构域，其中所述第一亚基包含根据eu编号的氨基酸突变p329g，并且其中所述第二亚基包含根据eu编号的329位的脯氨酸(p)。
2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述fc结构域为igg fc结构域，特别是igg1 fc结构域。
3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述fc结构域为人fc结构域。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的抗体，其中所述fc结构域包含促进所述fc结构域的所述第一亚基和所述第二亚基进行缔合的修饰。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗体，其中所述抗体是去岩藻糖基化的。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体，其中与天然igg1 fc结构域相比，所述异二聚体fc结构域表现出增加的与fc受体的结合亲和力和/或增加的效应子功能，特别地，其中所述效应子功能为adcc。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗体，其中所述异二聚体fc结构域包含一个或多个氨基酸突变，所述一个或多个氨基酸突变增加与fc受体的结合和/或效应子功能，特别地，其中所述效应子功能为adcc。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含至少一个能够与靶细胞上的抗原特异性结合的抗原结合部分。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的抗体，其中所述靶细胞为癌细胞。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的抗体，其中所述抗原选自由以下项组成的组：fap、cea、p95 her2、bcma、epcam、msln、mcsp、her-1、her-2、her-3、cd19、cd20、cd22、cd33、cd38、cd52flt3、epcam、igf-1r、folr1、trop-2、ca-12-5、hla-dr、muc-1(粘蛋白)、gd2、a33-抗原、psma、psca、转铁蛋白-受体、tnc(腱生蛋白)和ca-ix。
11.根据权利要求8至10中任一项所述的抗体，其中所述抗原结合部分为scfv、fab、crossfab或scfab。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的抗体，其为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的抗体，其中所述抗体为多特异性抗体。
14.一种分离的多核苷酸，其编码根据权利要求1至13中任一项所述的抗体。
15.一种宿主细胞，其包含根据权利要求14所述的分离的多核苷酸。
16.一种生产抗体的方法，所述方法包括以下步骤：(a)在适合表达所述抗体的条件下培养根据权利要求15所述的宿主细胞，以及任选地(b)回收所述抗体。
17.一种抗体，其通过根据权利要求16所述的方法生产。
18.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至13或17中任一项所述的抗体以及药用载体。...
【专利技术属性】
技术研发人员：D·达罗斯基，A·弗里莫瑟格伦德舍伯，C·克雷恩，E·莫斯纳，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：
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