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传染性脾肾坏死病毒的超分支滚环扩增检测方法技术

技术编号:4071000 阅读:317 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了传染性脾肾坏死病毒的超分支滚环扩增检测方法,特点是包括以下步骤:(1)设计1条锁式探针和1对针对锁式探针连接序列的通用引物;(2)配制锁式探针连接反应体系,进行连接反应;(3)配制HRCA反应体系,进行HRCA扩增反应,最后对HRCA反应产物进行检测,优点是具有比现有技术的PCR检测传染性脾肾坏死病毒的方法具有更高的灵敏度、特异性和便捷性,并且可以在实际生产中现场应用,有利于检测和控制水产动物养殖中传染性脾肾坏死病毒的传染和交叉。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
传染性脾肾坏死病毒的超分支滚环扩增检测方法,其特征在于包括以下步骤:  (1)锁式探针的合成:从ISKNV DPOL基因序列中分别选取20个碱基作为锁式探针5′端和3′端的特异识别区,5′末端碱基和3′末端碱基在ISKNV DPOL基因序列上连续,从质粒载体pNAK1中选取3779-3692nt段的基因序列,将该基因序列中与5′末端碱基和3′末端碱基互补的碱基替换后形成的核苷酸序列作为锁式探针的连接段部分,然后进行锁式探针的合成,再对合成的锁式探针进行5’端磷酸化,所述的锁式探针的核苷酸序列如下:  5’-GAGTCGAGCT TGTGATCCAT tggactgctg aatccgttag ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈炯史雨红孔诚将陆新江李登峰李明云
申请(专利权)人:宁波大学
类型:发明
国别省市:97[中国|宁波]

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