【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗菌肽制备，尤其涉及一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法及应用。
技术介绍
1、金鲳鱼作为海南省独特的海水养殖名贵的经济鱼类之一，其肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富，深受消费者欢迎；鲜样中蛋白和脂肪含量较高，围绕这两种功能成分的相关研究相对较多；其鱼皮较硬，加工过程中通常剥除丢弃或用作动物饲料；随着金鲳鱼养殖量的不断增大，大量副产物鱼皮未能得到高值化利用。然而，据研究表明，鱼皮中富含蛋白质具有潜在的降压、抗氧化、抗菌和免疫细胞增殖促进等活性，回收利用价值高。抗菌肽来源十分广泛，可以分为昆虫抗菌肽、植物抗菌肽、哺乳动物抗菌肽、两栖动物抗菌肽、鱼类、微生物源抗菌肽等，其中鱼类抗菌肽容易获得，且被开发研究技术较成熟，抗菌活性也较强。
2、滥用抗生素导致的多重耐药菌问题已经成为威胁人类健康的全球性公共卫生问题，研发一种天然无污染、高效且安全的抗菌药物是一项重要的发展方向，对缓解多重耐药菌蔓延以及降低耐药菌感染导致的死亡具有重要意义。
3、目前，对于抗菌肽的抗菌机制原理尚不明朗，但由于抗菌肽种类繁多，结构不同，即使是同类抗菌肽对于不同亚群的细菌抑菌机理也有可能不同。因此，若要将抗菌肽应用到实际生产，使其真正成为有效的抗生素替代品并充分发挥抑菌效果，发挥应有的作用价值，就必须明确抗菌肽的制备工艺。
技术实现思路
1、1.要解决的技术问题
2、本专利技术的目的是为了解决现有技术中如何将抗菌肽应用到实际生产，替代抗生素的问题，而提出的一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方
3、2.技术方案
4、为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
5、一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，包括以下步骤：
6、步骤1：挑选新鲜金鲳鱼，将鱼皮剥下，再将其洗净置于-18--20℃冰箱内冷冻，采用切片机将冷冻后的鱼皮切成薄片；
7、步骤2：采用10％正丁醇对鱼皮进行去油脂，固液比1:5-15g/ml，搅拌浸泡24-36h，蒸馏水清洗三次，置于60-80℃烘箱中烘干，将烘干后的鱼皮用粉碎机粉碎成粉末，贮存在-18--20℃冰箱中备用；
8、步骤3：分别利用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶这7种蛋白酶酶解得到金鲳鱼皮酶解液；
9、步骤4：将步骤3处理后的酶解液灭酶，离心得到上清酶解液，将其放入-18--20℃冰箱预冻，最后进行真空冷冻干燥；
10、步骤5：将干燥后的酶解液进行粉碎，用60-80目的筛子进行过筛，用双层pe包装加入干燥剂置于-20℃冰箱保存；
11、步骤6：将制备得到的金鲳鱼皮抗菌肽进行抗菌率和抗菌活性测定。
12、优选地，所述步骤1中挑选鲜重在500-700g的新鲜金鲳鱼。
13、优选地，所述步骤2中将烘干后的鱼皮用粉碎机粉碎成40-60目粉末。
14、优选地，所述步骤3中的加酶量分别为木瓜蛋白酶0.00375g、菠萝蛋白酶0.005g、酸性蛋白酶0.06g、中性蛋白酶0.05g、碱性蛋白酶0.015g、胃蛋白酶0.012g和胰蛋白酶0.012g。
15、优选地，所述步骤4中酶解液灭酶在4-6℃、3000-6000r/min条件下离心10-30min。
16、本专利技术中还提出了金鲳鱼皮抗菌肽在抑制金黄色葡萄球菌生长中的应用。
17、本专利技术中还提出了金鲳鱼皮抗菌肽在抑制大肠杆菌生长中的应用。
18、3.有益效果
19、相比于现有技术，本专利技术的优点在于：
20、本专利技术中，通过本制备方法，可以将抗菌肽应用到实际生产，使其真正成为有效的抗生素替代品并充分发挥抑菌效果，发挥应有的作用价值，同时制备得到的金鲳鱼皮抗菌肽，可以很好的抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长。
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1.一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，其特征在于，所述步骤1中挑选鲜重在500-700g的新鲜金鲳鱼。
3.根据权利要求1所述的一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，其特征在于，所述步骤2中将烘干后的鱼皮用粉碎机粉碎成40-60目粉末。
4.根据权利要求1所述的一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，其特征在于，所述步骤3中的加酶量分别为木瓜蛋白酶0.00375g、菠萝蛋白酶0.005g、酸性蛋白酶0.06g、中性蛋白酶0.05g、碱性蛋白酶0.015g、胃蛋白酶0.012g和胰蛋白酶0.012g。
5.根据权利要求1所述的一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，其特征在于，所述步骤4中酶解液灭酶在4-6℃、3000-6000r/min条件下离心10-30min。
6.根据权利要求1-5任一所述的一种金鲳鱼皮抗菌肽的应用，其特征在于，所述金鲳鱼皮抗菌肽在抑制金黄色葡萄球菌生长中的应用。
7.根据权利要求1-5任一所述的一种金鲳鱼皮抗菌肽的应用，其特征在于，所述
...【技术特征摘要】
1.一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，其特征在于，所述步骤1中挑选鲜重在500-700g的新鲜金鲳鱼。
3.根据权利要求1所述的一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，其特征在于，所述步骤2中将烘干后的鱼皮用粉碎机粉碎成40-60目粉末。
4.根据权利要求1所述的一种金鲳鱼皮抗菌肽的制备方法，其特征在于，所述步骤3中的加酶量分别为木瓜蛋白酶0.00375g、菠萝蛋白酶0.005g、酸性蛋白酶0.06g、中性蛋白...
【专利技术属性】
技术研发人员：代亚萍，曹玉坡，陆旭丽，李如一，周伟，李积华，董浩澜，涂浩，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：
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