【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药检测领域，具体涉及一种葛花及其制剂特征图谱的构建方法与应用。
技术介绍
1、葛花为豆科植物野葛或甘葛藤的干燥花，主要含有异黄酮及其苷元等多种成分，主要用于治伤酒发热烦渴，不思饮食，呕逆吐酸，吐血，肠风下血。
2、然而，现有的理化鉴别主要是对葛花的单一成分的含量测定或鉴别，一方面，通过上述单一成分的含量测定或鉴别，不能从整体上检测和控制其质量；另一方面，通过单一成分的含量测定联合其他成分的鉴别葛花或其配方颗粒，费时、费力，难以广泛地应用于生产实践。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的问题是，现有技术中没有公开有效检测葛花或其制剂的方法；因此，本专利技术提供了一种葛花配方颗粒特征图谱及其构建方法与应用。
2、为此，本专利技术提供了一种葛花及其制剂特征图谱的构建方法，包括如下步骤：
3、制备供试品溶液；
4、采用高效液相色谱法对供试品溶液进行检测，色谱条件包括，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a、以水为流动相b，按下表中的规定进行梯度洗脱：
5、
6、在一些可选的实施方式中，采用规格为250mm×4.6mm，粒径为5μm的色谱柱；
7、和/或，所述供试品溶液的进样量为5-20μl；
8、和/或，检测波长为220-280nm，柱温为20-35℃，流速为0.5-1.0ml/min。
9、在一些可选的实施方式中，供试品溶液的制备方法为：称取供试品，加溶剂
10、优选地，所述供试品溶液的制备方法还满足如下a-e中的任意一项或者多项：
11、a、供试品的质量与溶剂的体积之比为0.2-0.7：25-100；质量与体积的关系为g/ml；
12、b、提取方式为回流提取或者超声提取；
13、c、提取时间为≥10min，优选为15-60min；
14、d、所述固液分离选自离心或者滤膜过滤；
15、e、溶剂选自水、甲醇和乙醇中的至少一种，优选为甲醇水溶液。
16、在一些可选的实施方式中，所述的构建方法还包括采用6”-o-木糖黄豆黄苷、黄豆黄苷、鸢尾黄素-7-o-木糖葡萄糖苷、染料木苷、射干苷和黄豆黄素中的至少一种为对照品加溶剂制备对照品溶液的步骤，以及按照任一所述的构建方法中的高效液相色谱法检测对照品溶液得到对照品图谱的步骤；
17、优选的，所述溶剂选自甲醇、乙醇和水中的至少一种；
18、更优选的，1ml所述对照品溶液中含各对照品0.005～70μg。
19、在一些可选的实施方式中，所述葛花及其制剂特征图谱具有8个共有特征峰，包括峰1为6"-o-木糖黄豆黄苷，峰2为黄豆黄苷，峰3为鸢尾黄素-7-o-木糖葡萄糖苷，峰4为染料木苷，峰5为射干苷，峰7为黄豆黄素所对应的特征峰；
20、优选地，以峰5为s峰，其他特征峰相对峰5的相对保留时间在规定值的±10％之内，各特征峰的规定值为：
21、峰1：0.39、峰2：0.46、峰3：0.79、峰4：0.87、峰5：1.00、峰6：1.38、峰7：1.48、峰8：1.72。
22、本专利技术还提供了一种葛花及其制剂的含量测试方法，包括如下步骤：
23、制备供试品溶液；
24、采用6”-o-木糖黄豆黄苷、黄豆黄苷、鸢尾黄素-7-o-木糖葡萄糖苷、染料木苷、射干苷和黄豆黄素中的至少一种加溶剂制备对照品溶液；
25、采用高效液相色谱法对供试品溶液以及对照品溶液进行检测，色谱条件包括，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a、以水为流动相b，按下表中的规定进行梯度洗脱：
26、
27、在一些可选的实施方式中，采用规格为250mm×4.6mm，5μm的色谱柱；和/或，所述供试品溶液的进样量为5-20μl；和/或，检测波长为220-280nm，柱温为20-35℃，流速为0.5-1.0ml/min。
28、在一些可选的实施方式中，所述供试品溶液的制备方法为：称取供试品，加溶剂提取，得到提取液，固液分离，取液体，即为供试品溶液，优选地，所述供试品溶液的制备方法还满足如下a-e中的任意一项或者多项：
29、a、供试品的质量与溶剂的体积之比为0.2-0.7：25-100；质量与体积的关系为g/ml；
30、b、提取方式为回流提取或者超声提取；
31、c、提取时间为≥10min，优选为15-60min；
32、d、所述固液分离选自离心或者滤膜过滤；
33、e、溶剂选自水、甲醇和乙醇中的至少一种，优选为甲醇水溶液。
34、在一些可选的实施方式中，对照品溶液制备过程中所采用的溶剂分别选自甲醇、乙醇和水中的至少一种；
35、优选地，射干苷对照品溶液的浓度为0.03～70μg/ml；和/或，鸢尾黄素-7-o-木糖葡萄糖苷对照品溶液的浓度为0.005～45μg/ml。
36、本专利技术还提供了一种葛花及其制剂的质量检测方法，包括将待测葛花产品的特征图谱与葛花或其制剂的特征图谱进行比较的步骤，
37、和/或，采用任一所述的葛花及其制剂的含量测试方法测定待测葛花产品的含量的步骤；所述待测葛花产品的特征图谱为使用待测葛花产品按照任一所述的构建方法构建得到，所述葛花及其制剂的对照特征图谱选自如下(1)-(3)中的任意一项：
38、(1)其具有8个共有特征峰，峰1、峰2、峰3、峰4、峰5和峰7分别与6"-o-木糖黄豆黄苷、黄豆黄苷、鸢尾黄素-7-o-木糖葡萄糖苷、染料木苷、射干苷、黄豆黄素对照品参照物峰保留时间相对应，以射干苷对照品参照物峰相对应的峰为s1峰，其他特征峰与s1峰的相对保留时间在规定值的±10％范围之内，各特征峰的规定值分别为：峰1：0.39、峰2：0.46、峰3：0.79、峰4：0.87、峰5：1.00、峰6：1.38、峰7：1.48、峰8：1.72；
39、(2)使用单批次或者多批次葛花及其制剂按照任一所述的构建方法得到的葛花及其制剂的特征图谱；
40、(3)使用多批次葛花或其制剂按照任一所述的构建方法得到的特征图谱通过平均值或者中位数法制成对照特征图谱。
41、其中，待测葛花产品为葛花配方颗粒。
42、所述葛花配方颗粒对照特征图谱的相似度大于0.80。
43、本专利技术技术方案，具有如下优点：
44、1.本专利技术提供的葛花及其药物制剂的特征图谱的构建方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a、以水为流动相b，并采用特定的洗脱程序，在缩短检测时间的同时还明显提高了多种有效成分的分离效果，使得特征图谱中包含了更多的特征峰，极大丰富了图谱信息，实现了6"-o-木糖黄豆黄苷、黄豆黄苷、鸢尾黄素-7-o-木糖葡萄糖苷、染料木苷、射干苷、黄豆本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种葛花及其制剂特征图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，采用规格为250mm×4.6mm，粒径为5μm的色谱柱；
3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，供试品溶液的制备方法为：称取供试品，加溶剂提取，得到提取液，固液分离，取液体，即为供试品溶液；
4.根据权利要求1-3中任一所述的构建方法，其特征在于，所述的构建方法还包括采用6”-O-木糖黄豆黄苷、黄豆黄苷、鸢尾黄素-7-O-木糖葡萄糖苷、染料木苷、射干苷和黄豆黄素中的至少一种为对照品加溶剂制备对照品溶液的步骤，以及按照权利要求1-3中任一所述的构建方法中的高效液相色谱法检测对照品溶液得到对照品图谱的步骤；
5.根据权利要求1-4中任一所述的构建方法，其特征在于，所述葛花及其制剂特征图谱具有8个共有特征峰，包括峰1为6"-O-木糖黄豆黄苷，峰2为黄豆黄苷，峰3为鸢尾黄素-7-O-木糖葡萄糖苷，峰4为染料木苷，峰5为射干苷，峰7为黄豆黄素所对应的特征峰；
6.一种葛花及其制剂的含量测试方法，其特征在于，
7.根据权利要求6所述的葛花及其制剂的含量测试方法，其特征在于，采用规格为250mm×4.6mm，5μm的色谱柱；和/或，所述供试品溶液的进样量为5-20μL；和/或，检测波长为220-280nm，柱温为20-35℃，流速为0.5-1.0mL/min。
8.根据权利要求6或7所述的葛花及其制剂的含量测试方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为：称取供试品，加溶剂提取，得到提取液，固液分离，取液体，即为供试品溶液，优选地，所述供试品溶液的制备方法还满足如下A-E中的任意一项或者多项：
9.根据权利要求6-8中任一所述的葛花及其制剂的含量测试方法，其特征在于，对照品溶液制备过程中所采用的溶剂分别选自甲醇、乙醇和水中的至少一种；
10.一种葛花及其制剂的质量检测方法，其特征在于，包括将待测葛花产品的特征图谱与葛花及其制剂的特征图谱进行比较的步骤，
...【技术特征摘要】
1.一种葛花及其制剂特征图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，采用规格为250mm×4.6mm，粒径为5μm的色谱柱；
3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，供试品溶液的制备方法为：称取供试品，加溶剂提取，得到提取液，固液分离，取液体，即为供试品溶液；
4.根据权利要求1-3中任一所述的构建方法，其特征在于，所述的构建方法还包括采用6”-o-木糖黄豆黄苷、黄豆黄苷、鸢尾黄素-7-o-木糖葡萄糖苷、染料木苷、射干苷和黄豆黄素中的至少一种为对照品加溶剂制备对照品溶液的步骤，以及按照权利要求1-3中任一所述的构建方法中的高效液相色谱法检测对照品溶液得到对照品图谱的步骤；
5.根据权利要求1-4中任一所述的构建方法，其特征在于，所述葛花及其制剂特征图谱具有8个共有特征峰，包括峰1为6"-o-木糖黄豆黄苷，峰2为黄豆黄苷，峰3为鸢尾黄素-7-o-木糖葡萄糖苷，峰4为染料木苷，峰5为射干苷，峰7...
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡小兵，江斌，李璐，梁素仪，张辉，
申请(专利权)人：华润三九现代中药制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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