一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂及转染方法技术

本发明专利技术公开了一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂及转染方法，涉及生物医药技术领域，所述转染试剂包括Vi rusHancer组合物，所述Vi rusHancer组合物包括鱼精蛋白和聚醚型非离子表面活性剂，所述鱼精蛋白和聚醚型非离子表面活性剂的质量比为1:10～50，所述聚醚型非离子表面活性剂为泊洛沙姆；所述转染方法包括将目标细胞、慢病毒与转染试剂共同培养，得转染后的目标细胞。本发明专利技术通过在CAR‑T或NK细胞培养活化时添加转染试剂，提高病毒感染的阳性率，增加免疫细胞的CAR感染效率，在不提升慢病毒的绝对或相对数量时，能显著提升目标细胞转染率，有利于细胞增殖并且适用于临床研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，具体是一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂及转染方法。

技术介绍

1、car全称是嵌合抗原受体，car-t或nk是嵌合抗原受体t或nk细胞即表达嵌合抗原受体(car)的nk淋巴细胞，目前car-t或nk治疗在血液系统肿瘤中取得了突破性进展，在car-t或nk制备过程中很重要的一个步骤中会使用到转染试剂。

2、慢病毒载体具有能感染非分裂期细胞、容纳外源性目的基因片段大、稳定性强、免疫原性小等特点。大量研究表明，相对其他病毒载体，慢病毒感染效率高，更容易感染一些较难感染的组织和细胞，其效率一般可以达到20％-80％之间。

3、现有市场常用的转染试剂是polybrene、human fibronectin及一些阳离子多肽，目前大部分的转染试剂存在成分复杂、保存条件严苛、使用操作步骤繁琐等缺陷，而且这些转染试剂的成份对细胞大多有害，即便提高转染效率，细胞的状态也会受损，此外，由于病毒质量的问题，需要求应用更高的病毒滴度，然而，增加病毒数量以促进表达可能会导致许多细胞类型的毒性副作用，并带来不必要的昂贵成本。在ca本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂，其特征在于：所述转染试剂包括VirusHancer组合物，所述VirusHancer组合物包括鱼精蛋白和聚醚型非离子表面活性剂，所述鱼精蛋白和聚醚型非离子表面活性剂的质量比为1:10～50。

2.根据权利要求1所述的一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂，其特征在于：所述聚醚型非离子表面活性剂为泊洛沙姆。

3.根据权利要求1～2中任一项所述的一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂的应用，其特征在于：所述转染试剂在制备慢病毒载体或其他病毒载体转染免疫细胞或肿瘤细胞系的转染中作为提升剂的应用。>

4.一种提高...

【技术特征摘要】

1.一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂，其特征在于：所述转染试剂包括virushancer组合物，所述virushancer组合物包括鱼精蛋白和聚醚型非离子表面活性剂，所述鱼精蛋白和聚醚型非离子表面活性剂的质量比为1:10～50。

2.根据权利要求1所述的一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂，其特征在于：所述聚醚型非离子表面活性剂为泊洛沙姆。

3.根据权利要求1～2中任一项所述的一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂的应用，其特征在于：所述转染试剂在制备慢病毒载体或其他病毒载体转染免疫细胞或肿瘤细胞系的转染中作为提升剂的应用。

4.一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染方法，基于权利要求1～2中任意一项所述的提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂，其特征在于：所述方法包括将目标细胞、慢病毒与转染试剂共同培养，得转染后的目标细胞。

5.根据权利要求4所述的一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染方法，其特征在于：先对目标细胞进行活化，在目标细胞活化后，感染慢病毒时加入转染试...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈正亮，张照，黄庭晖，
申请(专利权)人：南京康和细胞基因工程研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：