【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及高表达nik的细胞作为控制肿瘤恶化的治疗靶点的应用。
技术介绍
1、nf-κb(核因子激活的b细胞的κ-轻链增强)是一种蛋白质复合物，其控制dna转录、细胞因子产生和细胞存活。nf-κb几乎存在于所有动物细胞类型中，并参与细胞对例如应激、细胞因子、自由基、重金属、紫外线照射、氧化低密度脂蛋白和细菌或病毒抗原等外部刺激的反应。nf-κb在调节对感染的免疫应答中起关键作用。nf-κb的不正确调节与癌症，炎症和自身免疫疾病，感染性休克，病毒感染和免疫发育不当有关。
2、在经典(典型)信号通路中，nf-κb/rel蛋白与iκb蛋白结合并受到其抑制。在备选(或称为非经典)nf-κb通路中，nf-κb2p100/relb复合体在细胞浆中失活。信号转导通过受体的一个子集，包括ltβr、cd40和br3，激活激酶nik，而nik反过来激活ikkα复合体，后者将nf-κb2p100的c端残基磷酸化。nf-κb2p100的磷酸化导致其自身泛素化，并且蛋白酶体加工为nf-κb2p52。这样可产生具备转录能力的nf-κbp52/relb复合体，并转运入胞核，再诱导目的基因表达。
3、b淋巴细胞亦可简称b细胞。来源于骨髓的多能干细胞。与t淋巴细胞相比，它的体积略大。这种淋巴细胞受抗原刺激后，会增殖分化出大量浆细胞。浆细胞可合成和分泌抗体并在血液中循环。成熟的b细胞经外周血迁出，进入脾脏、淋巴结，主要分布于脾小结、脾索及淋巴小结、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小结中，受抗原刺激后，分化增殖为浆细胞，合
技术实现思路
1、为精准靶向恶性细胞，更有效的控制肿瘤恶化，本专利技术筛选了一组标志物，并证明了靶向该表达标志物的细胞进行治疗可获得良好的治疗效果。
2、具体地，本专利技术提供了以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供了一组恶性细胞的筛选标志物，其中包括nik(nik，nf-κb诱导激酶)、cd19、cxcl13、cxcr5、cd34中至少一种。
4、优选地，所述标志物是nik和cd19、cxcl13、cxcr5、cd34中至少一种的组合。
5、另一方面，本专利技术提供了一种筛选恶性b细胞或恶性内皮细胞的标志物，所述标志物包括nik、cxcl13、cxcr5中至少一种。
6、另一方面，本专利技术提供了以上筛选标志物、标志物在制备恶性细胞筛选产品、癌症诊断产品中的应用。
7、优选地，所述恶性细胞包括恶性b细胞或恶性内皮细胞。
8、优选地，筛选恶性b细胞时可以结合b细胞标志物使用，优选地，细胞表面标志物。示例性的b细胞标志物包括：cd1、cd21、cd27、cd138、cd19、cd25、cd30、cxcr3、cxcr4、cxcr5、cxcr6、iga、igg、ige、cd20、cd27、cd40、cd80、pdl-2、igd、cd1、cd5、cd21、cd24、tlr4、igd、cd21、cd22、cd23、igg、cd27、cd38、cd78、cd138、cd319、igm、cd19、il-10、tgfβ、il-6、notch2。
9、优选地，所述b细胞细胞表面标志物包括cd19。
10、优选地，筛选恶性内皮细胞时可以结合内皮细胞标志物使用，优选地，细胞表面标志物。示例性的内皮细胞标志物包括cd31、cd 45、cd34、icam-1/cd54、lyve-1、tie-2/tek、vcam-1/cd 106、ve钙粘蛋白、vegf-r2、血管性血友病因子(vwf)
11、优选地，所述内皮细胞细胞表面标志物包括cd34。
12、筛选得到的内皮细胞和cd19阳性b淋巴细胞可以促进肿瘤发生，因此称为恶性细胞。
13、更具体地，通过检测待测样本中恶性细胞的筛选标志物是否为阳性/强阳性，检测结果为阳性则代表受试者患有癌症。
14、优选地，所述检测可以是细胞活性检测、基于免疫的检测、流式细胞仪检测、比色检测、基于金纳米颗粒的检测、荧光检测、紫外检测中的一种或多种；
15、优选地，所述检测可以针对以上筛选标志物、标志物的蛋白进行检测，也可以是针对核酸进行检测。
16、优选地，所述蛋白检索所使用的方法包括苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining，简称he染色法)、番红o-固绿染色、蛋白质印迹(western blot法)、酶联免疫吸附测定(elisa)、放射性免疫测定(ria)、夹心测定、免疫组织化学(immunohistochemistry)染色方法、质谱法、免疫沉淀分析法、补体结合分析法、流式细胞荧光分边技术和蛋白质芯片法。
17、优选地，所述针对核酸进行检测所使用的方法包括：基于pcr的检测方法、southern杂交方法、northern杂交方法、点杂交方法、荧光原位杂交方法、dna微阵列方法、aso法、高通量测序平台方法。
18、优选地，所述待测样本包括外周血、组织、血液、血清、血浆、尿液、唾液、精液、乳汁、脑脊髓液、泪液、痰、粘液、淋巴、胞液、腹水、胸膜积液、羊水、膀胱冲洗液和支气管肺泡灌洗液。
19、优选地，所述待测样本是组织。更优选地，癌组织。
20、优选地，所述待测样本也可以是疑似含有恶性细胞的细胞群。
21、更具体地，本专利技术提供了针对受试者癌组织中nik进行检测从而诊断皮肤鳞状细胞癌(scc)的方法。同时也提供了检测cd19和nik，从而诊断癌症的方法，所述方法适用于所有类型的癌症。
22、另一方面，本专利技术提供了靶向以上筛选标志物、标志物、恶性细胞的产品在制备癌症药物中的应用。
23、优选地，所述产品包括与筛选标志物、标志物具有特异性结合能力的化合物、抗体。
24、优选地，所述抗体包括单克隆抗体、单链抗体、嵌合抗体、多特异性抗体、人源化抗体。
25、具体地，所述靶向以上筛选标志物、标志物的产品也可以称为所述筛选标志物、标志物的抑制剂。
26、优选地，所述抑制剂包括通过以下技术降低nik表达的试剂：rna干扰技术、反义寡核苷酸技术、crispr技术、talen技术、zfn技术、cre-loxp基因重组技术。
27、优选地，所述产品中含有cd20抗体。
28、优选地，所述抗体包括单克隆抗体、单链抗体、嵌合抗体、多特异性抗体、人源化抗体。
29、另一方面，本专利技术提供了cd20抗体在制备降低nik导致的cd19表达量升高的产品中的应用。
30、优选地，所述抑制剂包括通过以下技术降低nik表达的试剂：rna干扰技术、反义寡核苷酸技术、crispr技术、talen技术、zfn技术、cre-loxp基因重组技术。
31、优选地，所述抑制剂包括与cd20具有特异性结合能力的化合物、抗体；
32、本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一组恶性细胞的筛选标志物，其中包括Nik、CD19、cxcl13、cxcr5、CD34中至少一种；
2.一种筛选恶性B细胞或恶性内皮细胞的标志物，所述标志物包括Nik、cxcl13、cxcr5中至少一种。
3.权利要求1或2所述标志物的检测试剂在制备恶性细胞筛选产品、癌症诊断产品中的应用；
4.如权利要求3所述应用，所述检测的方法包括细胞活性检测、基于免疫的检测、流式细胞仪检测、比色检测、基于金纳米颗粒的检测、荧光检测、紫外检测中的一种或多种；
5.如权利要求3所述应用，所述待测样本包括外周血、组织、血液、血清、血浆、尿液、唾液、精液、乳汁、脑脊髓液、泪液、痰、粘液、淋巴、胞液、腹水、胸膜积液、羊水、膀胱冲洗液和支气管肺泡灌洗液；
6.如权利要求3所述应用，所述癌症包括腺癌、鳞癌、大细胞癌、小细胞癌、淋巴瘤；
7.靶向权利要求1或2所述标志物、表达权利要求1或2所述标志物的细胞的产品在制备癌症药物中的应用；
8.如权利要求7所述应用，所述产品还包括所述靶向权利要求1或2所述标志物的抑制剂；p>
9.如权利要求7所述应用，所述癌症包括腺癌、鳞癌、大细胞癌、小细胞癌、淋巴瘤；
10.CD20抑制剂在制备降低Nik导致的CD19表达量升高的产品中的应用；
...【技术特征摘要】
1.一组恶性细胞的筛选标志物，其中包括nik、cd19、cxcl13、cxcr5、cd34中至少一种；
2.一种筛选恶性b细胞或恶性内皮细胞的标志物，所述标志物包括nik、cxcl13、cxcr5中至少一种。
3.权利要求1或2所述标志物的检测试剂在制备恶性细胞筛选产品、癌症诊断产品中的应用；
4.如权利要求3所述应用，所述检测的方法包括细胞活性检测、基于免疫的检测、流式细胞仪检测、比色检测、基于金纳米颗粒的检测、荧光检测、紫外检测中的一种或多种；
5.如权利要求3所述应用，所述待测样本包括外周血、组织、血液、血清、血浆、尿液、唾液...
【专利技术属性】
技术研发人员：段伟松，王贵英，
申请(专利权)人：河北医科大学第二医院，
类型：发明
国别省市：
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