【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学，具体地说是涉及一种纤维蛋白-人脐带间充质干细胞条件培养液凝胶及其制备方法和应用。
技术介绍
1、宫腔粘连(intrauterine adhesions，iua)是严重危害女性生育功能并且治疗效果较差的妇科常见疾病。其发生的主要原因是子宫内膜基底层受损，引起内膜纤维化、子宫壁或宫颈管粘连，主要临床表现为月经量减少、复发性流产以及不孕。iua在我国的发病率高，并且随着宫腔手术的增加呈增长趋势，已经成为女性子宫因素不孕的首要病因。
2、iua的治疗主要是宫腔镜宫腔粘连分离术(transcervical resection ofadhesion，tcra)，术后放置物理屏障预防再次粘连，口服雌激素促进子宫内膜修复，轻、中度iua患者可得到一定疗效，但是重度iua患者治疗效果欠佳，术后再粘连率高达62.5％。
3、目前常用于治疗宫腔粘连的制剂主要为透明质酸钠、壳聚糖以及胶原蛋白等生物制剂，虽然大多已经应用于临床，但是该制剂主要通过物理屏障以及生物作用发挥作用，修复效果有限，仅为手术后的辅助治疗措施。有应用脐带间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cells，ucmscs)结合胶原膜治疗宫腔粘连的i期临床研究，但是由于应用干细胞制剂的诸多限制使其未能大规模应用于临床。
4、另一类研究为干细胞及其相关制剂(外泌体与全细胞培养液)在iua子宫内膜修复重建的应用。研究证实ucmscs治疗宫腔粘连效果显著，医用ucmscs的制备已有生物公
5、纤维蛋白原(fibrinogen)，也称凝血因子i，是一种血浆蛋白。在生理状态下，纤维蛋白原与凝血酶参与机体的止血、凝血、创伤愈合和组织修复等过程。目前纤维蛋白胶(fibrin glue)、纤维蛋白止血剂等纤维蛋白相关制品已经广泛应用于临床中，但未见有应用于宫腔粘连的治疗。因此，开发一种新的用于治疗宫腔粘连的制剂，降低干细胞疗法存在的免疫、感染风险，进而为中、重度宫腔粘连患者提供一种效果好的治疗方案具有重要的意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种纤维蛋白-人脐带间充质干细胞条件培养液凝胶及其制备方法和应用，以解决现有技术治疗效果不理想、应用受限以及免疫、感染风险较高等问题。
2、本专利技术的目的是这样实现的：一种纤维蛋白-人脐带间充质干细胞条件培养液凝胶，其包括以下组分：
3、纤维蛋白原8-12mg/ml、凝血酶1-5u/ml、抑肽酶50-250μg/ml、cacl230-50mmol/l、人脐带间充质干细胞条件培养液0.30-0.40ml/ml。
4、所述的凝胶优选包括以下组分：纤维蛋白原10mg/ml、凝血酶1-5u/ml、抑肽酶50-250μg/ml、cacl240mmol/l、人脐带间充质干细胞条件培养液0.30-0.40ml/ml。
5、所述人脐带间充质干细胞条件培养液为人脐带间充质干细胞以2×105～8×105个/ml的数目培养46-50小时获得的条件培养液。
6、所用培养基为：s&xfm间充质干细胞无血清培养基。
7、一种纤维蛋白-人脐带间充质干细胞条件培养液凝胶的制备方法，其在室温下，将人脐带间充质干细胞条件培养液、凝血酶、抑肽酶和cacl2混合均匀制成a液，以纤维蛋白原溶液为b液，a液和b液单独包装，且a液和b液混合后各组分终浓度分别为：纤维蛋白原8-12mg/ml、凝血酶1-5u/ml、抑肽酶50-250μg/ml、cacl230-50mmol/l、人脐带间充质干细胞条件培养液0.30-0.40ml/ml。
8、所述人脐带间充质干细胞条件培养液为人脐带间充质干细胞以2×105～8×105个/ml的数目培养46-50小时获得的条件培养液。
9、上述的凝胶在制备治疗宫腔粘连的制剂中的应用。。
10、本专利技术制备简单，治疗效果好，为宫腔粘连，特别是中、重度宫腔粘连患者提供了新的治疗方案。本专利技术人脐带间充质干细胞条件培养液保留了干细胞疗法的疗效，同时大大降低了免疫和感染风险。纤维蛋白原与凝血酶在cacl2的交联下室温情况下会形成凝胶，人脐带间充质干细胞能够在此凝胶中生长，从而获得干细胞分泌物，显著提升了治疗效果。
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1.一种纤维蛋白-人脐带间充质干细胞条件培养液凝胶，其特征在于，包括以下组分：
2.根据权利要求1所述的凝胶，其特征在于，包括以下组分：纤维蛋白原10mg/mL、凝血酶1-5U/mL、抑肽酶50-250μg/mL、CaCl240mmol/L、人脐带间充质干细胞条件培养液0.30-0.40 mL /mL。
3.根据权利要求1或2所述的凝胶，其特征在于，所述人脐带间充质干细胞条件培养液为人脐带间充质干细胞以2×105~8×105个/mL的数目培养46-50小时获得的条件培养液。
4.根据权利要求3所述的凝胶，其特征在于，所用培养基为：S&XFM间充质干细胞无血清培养基。
5.一种纤维蛋白-人脐带间充质干细胞条件培养液凝胶的制备方法，其特征在于，室温下，将人脐带间充质干细胞条件培养液、凝血酶、抑肽酶和CaCl2混合均匀制成A液，以纤维蛋白原溶液为B液，A液和B液单独包装，且A液和B液混合后各组分终浓度分别为：纤维蛋白原8-12mg/mL、凝血酶1-5U/mL、抑肽酶50-250μg/mL、CaCl230-50mmol/L、人脐带间
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述人脐带间充质干细胞条件培养液为人脐带间充质干细胞以2×105~8×105个/mL的数目培养46-50小时获得的条件培养液。
7.权利要求1-4任一所述的凝胶在制备治疗宫腔粘连的制剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种纤维蛋白-人脐带间充质干细胞条件培养液凝胶，其特征在于，包括以下组分：
2.根据权利要求1所述的凝胶，其特征在于，包括以下组分：纤维蛋白原10mg/ml、凝血酶1-5u/ml、抑肽酶50-250μg/ml、cacl240mmol/l、人脐带间充质干细胞条件培养液0.30-0.40 ml /ml。
3.根据权利要求1或2所述的凝胶，其特征在于，所述人脐带间充质干细胞条件培养液为人脐带间充质干细胞以2×105~8×105个/ml的数目培养46-50小时获得的条件培养液。
4.根据权利要求3所述的凝胶，其特征在于，所用培养基为：s&xfm间充质干细胞无血清培养基。
5.一种纤维蛋白-人脐带间充...
【专利技术属性】
技术研发人员：张明乐，杜彦芳，刘义彬，黄向华，李仲康，张琳，李亚楠，高贺，
申请(专利权)人：河北医科大学第二医院，
类型：发明
国别省市：
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