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用于MALDI-TOF质谱仪的核酸质控品、质控品保存液及质控方法技术

技术编号:40678196 阅读:14 留言:0更新日期:2024-03-18 19:17
本发明专利技术公开了一种用于MALDI‑TOF质谱仪的核酸质控品、质控品保存液及质控方法。该核酸质控品包括四组校准品:低分子量段校准品、中分子量段校准品、高分子量段校准品、8点校准品:每组校准品中均由若干核酸片段组成,且低分子量段校准品中的核酸片段的分子量<中分子量段校准品中的核酸片段的分子量<高分子量段校准品中的核酸片段的分子量<8点校准品中的核酸片段的分子量。本发明专利技术提供的核酸质控品能够用于MALDI‑TOF质谱仪的校准,本发明专利技术提供的质控品保存液,能够防止核酸序列降解;本发明专利技术还提供了一种质控方法,通过拟合所得的公式,依据质控品中的核酸片段的分子量来配制对应核酸片段的浓度,能够获得更好的质谱峰图。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及领域,特别涉及一种用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品、质控品保存液及质控方法。


技术介绍

1、分子量是有机化合物最基本的理化性质参数。分子量正确与否往往代表着所测定的有机化合物及生物大分子的结构正确与否。maldi-tof是一种软电离技术,不产生或产生较少的碎片离子。它可直接应用于混合物的分析,也可用来检测样品中是否含有杂质及杂质的分子量。分子量是生物大分子如多肽、蛋白质等鉴定中首要的参数,也是基因工程产品报批的重要数据之一。maldi-tof的准确度高达0.1%~0.01%,远远高于目前常规应用的sds电泳与高效凝胶色谱技术,目前可测定生物大分子的分子量高达600kda。

2、maldi-tof作为分子量检测的先进手段,能够分辨小到9道尔顿的分子量差,这使得基于maldi-tof质谱仪分辨单碱基质量差成为可能,可以在分辨单核苷酸多态性领域发挥作用。基于分子量的检测对于检测的准确性要求较高,所以针对基于maldi-tof的核酸检测仪器,需要采用质控品进行精确校准。


技术实现思路

1、本专利技术所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足,提供一种用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品、质控品保存液及质控方法。

2、为解决上述技术问题,本专利技术采用的技术方案是:一种用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品,包括四组校准品:低分子量段校准品、中分子量段校准品、高分子量段校准品、8点校准品:

3、每组校准品中均由若干核酸片段组成,且低分子量段校准品中的核酸片段的分子量<中分子量段校准品中的核酸片段的分子量<高分子量段校准品中的核酸片段的分子量<8点校准品中的核酸片段的分子量。

4、优选的是,,低分子量段校准品、中分子量段校准品和高分子量段校准品中的每个校准品均由四个核酸片段组成。

5、优选的是,低分子量段校准品、中分子量段校准品和高分子量段校准品中的核酸片段之间的最小分子量差为9da。

6、优选的是,其中,8点校准品由分子量覆盖2500-11000da的8个不同核酸序列组成。

7、优选的是,低分子量段校准品中的四个核酸片段的基因序列如seq id no.1、seqid no.2、seq id no.3、seq id no.4所示。

8、优选的是,中分子量段校准品中的四个核酸片段的基因序列如seq id no.5、seqid no.6、seq id no.7、seq id no.8所示。

9、优选的是,高分子量段校准品中的四个核酸片段的基因序列如seq id no.9、seqid no.10、seq id no.11、seq id no.12所示。

10、优选的是,8点校准品中的八个核酸片段的基因序列如seq id no.13、seq idno.14、seq id no.15、seq id no.16、seq id no.17、seq id no.18、seq id no.19、seq idno.20所示。

11、本专利技术还提供一种质控品保存液,其用于保存如上所述的核酸质控品,该质控品保存液包括如下组分:

12、0.05-0.3m的tris-hcl;

13、0.001-0.5m的edta-2na;

14、0.05-1m的二硫苏糖醇;

15、0.01-0.5wt%的peg1000;

16、depc水;

17、0.1-1wt%的tween20;

18、0.01-0.5%的叠氮化钠。

19、本专利技术还提供一种maldi-tof质谱仪的质控方法,其采用如上所述的核酸质控品进行质控,该方法进行质控时,根据如下公式,依据质控品中的核酸片段的分子量来配制对应核酸片段的浓度:

20、y=0.1807x-224;

21、其中,y表示核酸片段的浓度,单位为nmol/l;x表示核酸片段的分子量。

22、本专利技术的有益效果是:

23、本专利技术提供了一种能够用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品,包括四组校准品:低分子量段校准品、中分子量段校准品、高分子量段校准品、8点校准品,低分子量段校准品、中分子量段校准品和高分子量段校准品能够针对低、中、高分子量段进行分辨率的校准和质控,8点校准品能够针对整个检测质量段进行校准和质控;

24、本专利技术还提供了一种质控品保存液,能够防止核酸序列降解,实现质控品的有效保存;

25、本专利技术还提供了一种质控方法,通过拟合所得的公式,依据质控品中的核酸片段的分子量来配制对应核酸片段的浓度,能够获得更好的质谱峰图。

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【技术保护点】

1.一种用于MALDI-TOF质谱仪的核酸质控品,其特征在于,包括四组校准品:低分子量段校准品、中分子量段校准品、高分子量段校准品、8点校准品:

2.根据权利要求1所述的用于MALDI-TOF质谱仪的核酸质控品,其特征在于,低分子量段校准品、中分子量段校准品和高分子量段校准品中的每个校准品均由四个核酸片段组成。

3.根据权利要求2所述的用于MALDI-TOF质谱仪的核酸质控品,其特征在于,低分子量段校准品、中分子量段校准品和高分子量段校准品中的核酸片段之间的最小分子量差为9Da。

4.根据权利要求1所述的用于MALDI-TOF质谱仪的核酸质控品,其特征在于,其中,8点校准品由分子量覆盖2500-11000Da的8个不同核酸序列组成。

5.根据权利要求3所述的用于MALDI-TOF质谱仪的核酸质控品,其特征在于,低分子量段校准品中的四个核酸片段的基因序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQID NO.4所示。

6.根据权利要求3所述的用于MALDI-TOF质谱仪的核酸质控品,其特征在于,中分子量段校准品中的四个核酸片段的基因序列如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQID NO.8所示。

7.根据权利要求3所述的用于MALDI-TOF质谱仪的核酸质控品,其特征在于,高分子量段校准品中的四个核酸片段的基因序列如SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11、SEQID NO.12所示。

8.根据权利要求4所述的用于MALDI-TOF质谱仪的核酸质控品,其特征在于,8点校准品中的八个核酸片段的基因序列如SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15、SEQ IDNO.16、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.20所示。

9.一种质控品保存液,其特征在于,其用于保存如权利要求1-8中任意一项所述的核酸质控品,该质控品保存液包括如下组分:

10.一种MALDI-TOF质谱仪的质控方法,其特征在于,其采用如权利要求1-8中任意一项所述的核酸质控品进行质控,该方法进行质控时,根据如下公式,依据质控品中的核酸片段的分子量来配制对应核酸片段的浓度:

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【技术特征摘要】

1.一种用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品,其特征在于,包括四组校准品:低分子量段校准品、中分子量段校准品、高分子量段校准品、8点校准品:

2.根据权利要求1所述的用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品,其特征在于,低分子量段校准品、中分子量段校准品和高分子量段校准品中的每个校准品均由四个核酸片段组成。

3.根据权利要求2所述的用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品,其特征在于,低分子量段校准品、中分子量段校准品和高分子量段校准品中的核酸片段之间的最小分子量差为9da。

4.根据权利要求1所述的用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品,其特征在于,其中,8点校准品由分子量覆盖2500-11000da的8个不同核酸序列组成。

5.根据权利要求3所述的用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品,其特征在于,低分子量段校准品中的四个核酸片段的基因序列如seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3、seqid no.4所示。

6.根据权利要求3所述的用于maldi-tof质谱仪的核酸质控品,其特征在于,中分子量段校准品中的四个核酸片段的...

【专利技术属性】
技术研发人员:王彤朱思宇白鹏利昝明辉徐振胡玮程文播
申请(专利权)人:郑州中科生物医学工程技术研究院
类型:发明
国别省市:

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