具有更强液-液相分离能力及活性的p53变体及其用途制造技术

本发明专利技术公开了具有更强液‑液相分离能力及活性的p53变体及其用途。与野生型p53相比，此新型p53变体具有以下优点：1）更强的液‑液相分离能力；2）在肿瘤细胞中对p53靶基因CDKN1A等具有更强的转录激活能力；3）对多种肿瘤细胞有更为显著的杀伤效果。并且此新型p53变体可通过调控FGFR3实现肿瘤杀伤功能，本发明专利技术证明了提高液‑液相分离能力能够增强p53转录激活活性以及诱导肿瘤细胞凋亡的功能，对于改进基于p53的基因/蛋白疗法具有重要意义，而且此发明专利技术公开的新型p53变体基因及蛋白是具有临床应用前景的肿瘤杀伤药物，同时LLPSE‑p53重组蛋白与FGFR抑制剂TAS‑120以及Wnt信号通路抑制剂IWR‑1联合使用能够增强其肿瘤杀伤效果，对于癌症治疗具有重要价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种液-液相分离能力增强的p53变体及其杀伤肿瘤细胞的应用。

技术介绍

1、转录因子p53是细胞内最为重要的肿瘤抑制因子，它在50%以上的癌细胞中发生突变失去活性，在其余的癌细胞中p53的活性或下游信号通路被抑制。p53作为“基因组保镖”通过响应细胞内外应激条件，进而转录激活其下游靶基因 cdkn1a、 puma、bax等诱导dna损伤修复、细胞周期停滞或细胞凋亡，从而抑制肿瘤细胞增殖。所以在癌细胞中恢复/提高p53活性是目前抑制癌细胞增殖的一种策略。

2、在癌细胞中恢复/提高p53活性的方法包括：1）抑制野生型p53降解；2）抑制突变型p53蛋白活性；3）转入p53 cdna 的基因疗法。其中唯一一种已经获得临床批准的疗法是基因疗法。一项利用重组缺陷型腺病毒递送野生型p53用于治疗头颈癌的基因疗法（gendicine）已经在中国得到临床批准。其它递送野生型p53的基因疗法如onyx-015仍在临床实验中。p53基因疗法联合免疫检查本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.具有更强液-液相分离能力的p53变体，其特征在于，在p53序列的一端添加富含正电荷和组氨酸的氨基酸序列，在细胞水平和体外比野生型p53具有更强的液-液相分离能力，具有更强的转录激活活性；

2.根据权利要求1所述的p53变体，其特征在于，能够激活CDKN1A靶基因的转录，提高CDKN1A、MDM2、PUMA、NOXA以及RRM2B中的一个或者多个的下游靶基因的转录水平。

3.一种根据权利要求1所述p53变体在制备肿瘤治疗药物中的用途，其特征在于，适用的肿瘤种类包括非小细胞肺癌、乳腺癌、神经母细胞瘤、骨肉瘤以及人脑瘤；

4.根据权利要求3所述的用途，其...

【技术特征摘要】

1.具有更强液-液相分离能力的p53变体，其特征在于，在p53序列的一端添加富含正电荷和组氨酸的氨基酸序列，在细胞水平和体外比野生型p53具有更强的液-液相分离能力，具有更强的转录激活活性；

2.根据权利要求1所述的p53变体，其特征在于，能够激活cdkn1a靶基因的转录，提高cdkn1a、mdm2、puma、noxa以及rrm2b中的一个或者多个的下游靶基因的转录水平。

3.一种根据权利要求1所述p53变体在制备肿瘤治疗药物中的用途，其特征在于，适用的肿瘤种类包括非小细胞肺癌、乳腺癌、神经母细胞瘤、骨肉瘤以及人脑瘤；

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述的p53变体的重组蛋白表达体系包括大肠杆菌表达宿主、动物细胞以及酵母蛋白表达系统；原核表达载体包括pet24a，pet28a(+)；真核生物表达载体包括：1）...

【专利技术属性】
技术研发人员：王国珍，刘妍，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：