【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及蛋白酶检测,具体是涉及一种多肽底物探针及其应用。
技术介绍
1、aerolysin纳米孔是从嗜水气单胞菌中提取的β成孔蛋白,是一种与人体腹泻病症以及深度伤口相关的革兰氏阴性杆菌属,成熟的aerolysin纳米孔可与真核细胞膜表面的糖蛋白受体相结合,并插入细胞膜形成一个孔道,改变细胞膜的通透性并最终导致细胞死亡。在水溶液中aerolysin单体会自发地形成一个具有蘑菇状外形的七聚体结构,宽度为~15nm,高度为~7.0nm,形成的孔道直径为1.0~1.7nm,其形状与目前在纳米孔技术中广泛应用的α-hl类似,但在cis端没有前庭结构。aerolysin纳米孔最早于2006年首次应用于纳米孔生物传感器,进行α-螺旋胶原蛋白结构的研究,随后被用于分析蛋白的折叠和去折叠动力学过程、多肽、蛋白结构、低聚糖的聚集程度和酶降解的动力学等。
2、在过去十年中,使用纳米孔作为在单分子水平上探索各种应用的多功能工具受到了越来越多的关注。纳米孔应用的几个例子包括dna测序、环境监测、疾病检测和细胞代谢研究。在纳米孔传感中,分析物分子
...【技术保护点】
1.一种多肽底物探针,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种如权利要求1所述的多肽底物探针在同时检测主蛋白酶、木瓜蛋白酶样蛋白酶中的应用。
3.一种同时检测主蛋白酶、木瓜蛋白酶样蛋白酶的方法,基于权利要求1所述的一种多肽底物探针,其特征在于,通过所述多肽底物探针对人类呼出气冷凝液进行同时检测分析。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述多肽底物探针基于aerolysin纳米孔对主蛋白酶和木瓜蛋白酶样蛋白酶进行同时检测分析。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,通过Delrin双层杯
...【技术特征摘要】
1.一种多肽底物探针,其特征在于:其氨基酸序列如seq id no:1所示。
2.一种如权利要求1所述的多肽底物探针在同时检测主蛋白酶、木瓜蛋白酶样蛋白酶中的应用。
3.一种同时检测主蛋白酶、木瓜蛋白酶样蛋白酶的方法,基于权利要求1所述的一种多肽底物探针,其特征在于,通过所述多肽底物探针对人类呼出气冷凝液进行同时检测分析。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述多肽底物探针基于aerolysin纳米孔对主蛋白酶和木瓜蛋白酶样蛋白酶进行同时检测分析。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,通过delrin双层杯形成脂质双层膜,并通过aerolysin溶液将aerolysin纳米孔蛋白自发插入脂质双分子层中,形成aerolysin纳米孔。
6.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,在同时检测分析前,配置aerolysin溶液、储备液、工作溶液,并将所述储备液、工作溶液与人类呼出气冷凝液混合进行酶促反应。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述aerolysin溶液的配置方法为:将浓度为2.0mg/ml...
【专利技术属性】
技术研发人员:郗冬梅,周鑫,姜耀,褚白雪,张书圣,
申请(专利权)人:临沂大学,
类型:发明
国别省市:
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