一种具有L-色氨酸生产能力的基因工程菌株及使用此基因工程菌株产L-色氨酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种具有L‑色氨酸生产能力的基因工程菌株及使用此基因工程菌株产L‑色氨酸的方法，属于生物技术领域。本发明专利技术解决了流加葡萄糖过多，易导致生产菌株代谢异常，产酸受到影响的问题。所述基因工程菌株通过敲除原始菌株内SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列获得。所述基因工程菌株产L‑色氨酸的方法为：配制种子罐培养基、发酵培养基以及微量元素混合液；制备ycjO基因缺失菌株种子液；将种子罐培养基进行灭菌并冷却，调节pH，将ycjO基因缺失菌株种子液接种至种子培养基中，培养至对数生长中后期；将发酵罐培养基灭菌并冷却，调节pH，将对数生长中后期菌种接入发酵培养基中发酵培养制取L色氨酸发酵液。本发明专利技术所述的基因工程菌株适用于生产L‑色氨酸。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种基因工程菌株及使用此基因工程菌株产l-色氨酸的方法。

技术介绍

1、l色氨酸属于八种必需氨基酸之一，因其营养价值，已被广泛用于饲料、食品和药品等领域。l-色氨酸的生产方法包括化学合成法、酶反应法、发酵法等，但随着基因工程手段的逐渐完善，利用微生物直接发酵法来生产l-色氨酸得到迅速发展，该方法以葡萄糖等低价原料为碳源经微生物发酵生产得到目的产物，生产成本较低，生产工艺相对简单可控。

2、色氨酸生产菌种以葡萄糖为碳源时存在葡萄糖阻遏效应，即一旦菌种摄入过多葡萄糖则容易衰老死亡，因此生产上一般以流加的方式给菌种提供葡萄糖，避免菌体摄入过多葡萄糖而导致发酵异常。

3、在色氨酸生产过程中，如果由于操作失误或其他原因导致流加葡萄糖过多，则容易导致生产菌株代谢异常，发酵液变黑，经检测证实发酵液变黑是由于乙酸含量积累较多，一般情况下乙酸含量低于5g/l，菌体代谢不会异常，当乙酸含量超过5g/l则极容易发生代谢异常。一旦发生代谢异常，菌种的生物量和产酸会受到极大影响，给生产造成严重损失。因此，获得对葡萄糖耐受性高的生产本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种具有L-色氨酸生产能力的基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株是敲除原始菌株内SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列获得。

2.根据权利要求1所述的具有L-色氨酸生产能力的基因工程菌株，其特征在于，所述原始菌株为大肠杆菌。

3.根据权利要求1所述的具有L-色氨酸生产能力的基因工程菌株，其特征在于，所述SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

4.根据权利要求1所述的具有L-色氨酸生产能力的基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株的构建方法包括如下步骤：

5.权利要求1-4所述的具有L...

【技术特征摘要】

1.一种具有l-色氨酸生产能力的基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株是敲除原始菌株内seq id no:1所示的核苷酸序列获得。

2.根据权利要求1所述的具有l-色氨酸生产能力的基因工程菌株，其特征在于，所述原始菌株为大肠杆菌。

3.根据权利要求1所述的具有l-色氨酸生产能力的基因工程菌株，其特征在于，所述seq id no:1所示的核苷酸序列编码的氨基酸序列如seq id no:2所示。

4.根据权利要求1所述的具有l-色氨酸生产能力的基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株的构建方法包括如下步骤：

5.权利要求1-4所述的具有l-色氨酸生产能力的基因工程菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢煜，曹国强，周国旺，郭昊，张宇擎，李雪姚，杨娜，
申请(专利权)人：哈尔滨象柏生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：