一种基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法技术

本发明专利技术涉及一种基于单细胞拉曼‑同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，包括如下步骤：S1：湖泊底部取样，运输中保持厌氧环境以及与湖底相同的温度。S2：对沉积物样品进行前处理，得到含有微生物的待测物。S3：将待测物加入含有D<subgt;2</subgt;O、碳源、难溶性磷源的培养基中培养。S4：检测待测物的拉曼光谱数据，绘制得到拉曼光谱图。S5：根据拉曼光谱图，计算碳‑氘拉曼条带对应的积分面积占碳‑氘拉曼条带和碳‑氢拉曼条带对应的总积分面积的比率，作为解磷菌活性的半定量评价指标。本发明专利技术将单细胞拉曼光谱与同位素标记进行结合，根据碳‑氘拉曼条带所占比率较为反映解磷菌的活性，并且实现了湖泊底部的原位检测效果，检测更加准确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及湖泊沉积物中解磷菌的活性研究，具体涉及一种基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法。

技术介绍

1、磷是维持生命活动的重要营养元素之一，另一方面，磷还是大多数水体富营养化和有害藻类暴发的重要诱因。此外，当湖泊等水体外部污染得到有效控制时，水中沉积物内部释放的磷可以长期成为水中磷的主要来源。磷以多种形式存在于水体中，例如可溶性磷、不可溶性磷、有机磷或无机磷。解磷菌能够将沉积物中的难溶性磷化合物溶解释放至水体，其介导的磷转化释放过程与藻类爆发、水华等水环境灾害直接相关，因此解磷菌在水体磷循环过程中的作用机制越来越受到关注。

2、湖泊沉积物中难溶性磷能够在适宜条件下释放到间隙水和上覆水体中，在此过程中，解磷菌起着关键作用。研究表明，将解磷菌接种至湖泊沉积物，可明显增加水体中可溶性磷的含量，促进微囊藻等水华藻的生长。解磷菌包括解磷细菌、真菌和放线菌等，其中解磷细菌的种类和数量较多，研究也较深入。解磷细菌(psb)分为无机解磷菌(ipsb)和有机解磷菌(opsb)，也存在同时可以分解难溶性无机磷、难溶性有机磷的解磷菌。解本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，其特征在于，步骤S1中，获得沉积物样品后，运输过程中，将沉积物样品置于氮气环境中。

3.根据权利要求1所述的基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，其特征在于，步骤S2中，通过密度梯度离心法对沉积物样品进行离心处理，然后通过滤膜对离心后的液体进行过滤，提取其中的微生物，得到含有微生物的液相待测物。

4.根据权利要求1所述的基于单细胞拉曼-同位素标记的...

【技术特征摘要】

1.一种基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，其特征在于，步骤s1中，获得沉积物样品后，运输过程中，将沉积物样品置于氮气环境中。

3.根据权利要求1所述的基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，其特征在于，步骤s2中，通过密度梯度离心法对沉积物样品进行离心处理，然后通过滤膜对离心后的液体进行过滤，提取其中的微生物，得到含有微生物的液相待测物。

4.根据权利要求1所述的基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，其特征在于，步骤s3中，培养基中d2o的体积比为30-50％。

5.根据权利要求4所述的基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，其特征在于，步骤s3中，培养温度为37℃，培养时长为24-48h。

6.根据权利要求1所述的基于单细胞拉曼-同位素标记的湖泊沉积物中解磷菌的活性检测方法，其特征在于，步骤s3中...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔令超，王艺，郑春苗，裘文慧，
申请(专利权)人：南方科技大学，
类型：发明
国别省市：