一种基于悬浮芯片的多重固相扩增检测方法技术

本发明专利技术涉及分子检测领域，具体地，本发明专利技术涉及一种基于悬浮芯片的多重固相扩增检测方法。根据本发明专利技术的方法包括以下步骤：１）制备带有不同编码的芯片；２）修饰芯片表面，将每对特异性引物分别固定在特定编码的芯片连接上；３）分别制备多种待检测样品的ＤＮＡ或ＲＮＡ；４）进行多重固相扩增；５）荧光检测扩增产物。本发明专利技术能同时高效检测多个目的片段，且有效避免引物之间的干扰；重复性、特异性、灵敏度都较好；整个方法操作简单，不需要专业人员，在实际使用中有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子检测领域，具体地，本专利技术涉及一种基于悬浮芯片的多重固相扩增检测方法。
技术介绍
近10余年来，随着现代分子生物学的迅猛发展，为临床实验室诊断提供了较为可靠的核酸检测方法，其中主要用到核酸分子杂交与核酸扩增两种技术。核酸扩增技术的典型代表是聚合酶链式反应(polymerase chainreaction，PCR)，该技术作为分子鉴别诊断(molecular differential diagnoses，MDD)的基础以其高效、快速的特点在病原体早期鉴定中发挥重要的作用。并且该技术也在不断的改良和创新以求更好的满足准确和高效地进行分子鉴别诊断和个体化医疗的需要。常规PCR技术在一次反应中仅能对一个基因片段进行扩增和分析，因此对于多基因调控或由多病原体感染的疾病，如果采用常规方法，则要进行大量的反应，不仅工作量大，耗时长，且可能耽误控制疾病蔓延的时机。液相多重PCR是在常规PCR基础上改进并发展起来的一项PCR技术。其基本原理与常规PCR相同，区别在于液相多重PCR在同一个反应体系中，使用多对引物，对多个基因同时进行扩增。由于该项技术具有能快速同时检测多个基因以及节本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于悬浮芯片的多重固相扩增检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：　　１）制备带有不同编码的芯片，所述芯片在核酸扩增反应体系中呈悬浮或近悬浮状态；　　２）芯片表面修饰氨基，将每对特异性引物通过戊二醛的方式固定在各自被编码的芯片连接上；　　３）分别制备多种待检测样品的ＤＮＡ或ＲＮＡ，其中，各ＤＮＡ或ＲＮＡ样品包含每对特异性引物特异性地扩增的片段；　　４）以待检测样品的ＤＮＡ或ＲＮＡ、和上述固定有特异性引物的编码芯片进行多重固相扩增，并标记扩增产物；　　５）荧光检测所得的扩增产物，通过在暗场下观察荧光的有无，判断是否扩增得到特异性产物，然后通过在明场下观察荧光的图形，判断各扩增产物所对应的...

【技术特征摘要】
1.一种基于悬浮芯片的多重固相扩增检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1)制备带有不同编码的芯片，所述芯片在核酸扩增反应体系中呈悬浮或近悬浮状态；2)芯片表面修饰氨基，将每对特异性引物通过戊二醛的方式固定在各自被编码的芯片连接上；3)分别制备多种待检测样品的DNA或RNA，其中，各DNA或RNA样品包含每对特异性引物特异性地扩增的片段；4)以待检测样品的DNA或RNA、和上述固定有特异性引物的编码芯片进行多重固相扩增，并标记扩增产物；5)荧光检测所得的扩增产物，通过在暗场下观察荧光的有无，判断是否扩增得到特异性产物，然后通过在明场下观察荧光的图形，判断各扩增产物所对应的待测样品，其中，每种编码芯片在明场在...

【专利技术属性】
技术研发人员：李炯，曹榕，吕卓璇，段德民，鲍芳，姜丽，
申请(专利权)人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]