【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及重组蛋白和疫苗，具体涉及一种重组副溶血性弧菌mam7蛋白及其制备方法和应用。
技术介绍
1、副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性菌，弧菌属。副溶血性弧菌通过摄取或伤口暴露方式感染宿主，能导致多种水产动物感染，进而导致死亡，造成巨大财产损失。目前针对副溶血性弧菌感染的治疗措施通常为抗生素疗法，但是随着抗菌药物的反复使用，细菌产生耐药性，抗菌疗效不明显，仍然会导致患病动物大批死亡，因此针对副溶血性弧菌感染需要寻找新的疗法。
2、接种疫苗是预防动物传染病的重要方法之一，且疫苗接种与抗生素疗法相比较更加安全环保。目前在研究的水产动物类疫苗有灭活疫苗、减毒疫苗和蛋白质疫苗等。蛋白质疫苗因其接种剂量小、免疫原性强、抗体出现早、滴度高、持续时间长和毒副作用小等优点而得到关注。外膜蛋白在细菌感染并获取营养的过程中具有重要作用，因此被广泛应用在各个领域疫苗研究中，副溶血性弧菌外膜蛋白mam7是一种可以在缺乏其他粘附蛋白的情况下介导副溶血性弧菌附着在动物细胞上的外膜蛋白，并对宿主细胞的产生有效杀伤力，目前利用副溶血性弧菌外膜蛋白mam7作为免疫原，生产蛋白质疫苗并用于增强水产动物对副溶血性弧菌的免疫的报道极少。
技术实现思路
1、鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于提出一种重组副溶血性弧菌mam7蛋白，能够增强水产动物对副溶血性弧菌的免疫，可以作为副溶血性弧菌免疫的潜在抗原，在预防控制水产动物传染病的方面具有重要的意义。
2、本专利技术的目的之二在于提出一种核
3、本专利技术的目的之三在于提出一种载体，包含上述的核酸分子。
4、本专利技术的目的之四在于提出一种新的、可操作性强重组副溶血性弧菌mam7蛋白的制备方法，制备得到的重组副溶血性弧菌mam7蛋白可用于水产动物免疫。
5、本专利技术的目的之五在于提出重组副溶血性弧菌mam7蛋白在制备预防或治疗副溶血性弧菌感染的产品中的应用。
6、本专利技术的目的之六在于一种重组副溶血性弧菌mam7蛋白疫苗，能够提高疫苗免疫的水产动物对副溶血性弧菌的抵抗能力，有效增强水产动物对副溶血性弧菌的免疫。
7、为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：
8、一种重组副溶血性弧菌mam7蛋白，所述重组副溶血性弧菌mam7蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。
9、一种核酸分子，所述核酸分子编码上述的重组副溶血性弧菌mam7蛋白。
10、优选地，所述核酸分子的核苷酸序列如seq id no.2所示。
11、一种载体，所述载体包含上述的核酸分子。
12、一种重组副溶血性弧菌mam7蛋白的制备方法，用于制备上述的重组副溶血性弧菌mam7蛋白，包括以下步骤：
13、(1)将权利要求2或3所述的核酸分子插入至pet32a载体中，构建表达载体pet32a-mam7；
14、(2)将表达载体pet32a-mam7转入表达菌株bl21，进行诱导表达，将获得的表达产物进行分离纯化，得到重组副溶血性弧菌mam7蛋白。
15、一种重组副溶血性弧菌mam7蛋白在制备预防或治疗副溶血性弧菌感染的产品中的应用，所述重组副溶血性弧菌mam7蛋白为上述的重组副溶血性弧菌mam7蛋白。
16、优选地，所述重组副溶血性弧菌mam7蛋白在制备抗副溶血性弧菌感染的疫苗中应用。
17、一种重组副溶血性弧菌mam7蛋白疫苗，包含上述的重组副溶血性弧菌mam7蛋白。
18、优选地，所述疫苗还包含佐剂。
19、本申请实施例提供的技术方案可以包括以下有益效果：
20、1、本技术方案氨基酸序列如seq id no.1所示的重组副溶血性弧菌mam7蛋白(下文简称：重组mam7蛋白)能刺激水产动物机体产生抗副溶血性弧菌的抗体，同时能够促进水产动物体内酸性磷酸酶的增加，从而刺激水产动物产生先天免疫反应，抵御外来有害细菌感染，而且通过实验证明，本技术方案的重组mam7蛋白能够增强水产动物对副溶血性弧菌的免疫，免疫原性强，因此，本技术方案的重组mam7蛋白对水产动物具有一定的免疫保护作用，具有潜在的抗原价值，可以作为副溶血性弧菌免疫的潜在抗原。
21、2、本技术方案的重组副溶血性弧菌mam7蛋白疫苗包含氨基酸序列如seq id no.1所示的重组副溶血性弧菌mam7蛋白，经实验证明，本技术方案的重组副溶血性弧菌mam7蛋白疫苗对副溶血性弧菌具有很高的免疫原性，经本方案的疫苗免疫的水产动物，体内能产生大量的特异性抗体，并能刺激先天免疫反应，对水产动物具有免疫保护作用，本技术方案的重组副溶血性弧菌mam7蛋白疫苗能够提高接受该疫苗免疫的水产动物对副溶血性弧菌的抵抗能力，具有良好的免疫保护效应，从而能有效提高水产动物在副溶血性弧菌感染后的存活率，在预防控制水产动物传染病的方面具有重要的意义。
22、3、本技术方案的重组副溶血性弧菌mam7蛋白，能够对罗非鱼提供一定的免疫保护，具有潜在的抗原价值，具有潜在开发价值。
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1.一种重组副溶血性弧菌MAM7蛋白，其特征在于，所述重组副溶血性弧菌MAM7蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1所述的重组副溶血性弧菌MAM7蛋白。
3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ IDNo.2所示。
4.一种载体，其特征在于，所述载体包含如权利要求3所述的核酸分子。
5.一种重组副溶血性弧菌MAM7蛋白的制备方法，其特征在于，用于制备权利要求1所述的重组副溶血性弧菌MAM7蛋白，包括以下步骤：
6.一种重组副溶血性弧菌MAM7蛋白在制备预防或治疗副溶血性弧菌感染的产品中的应用，其特征在于，所述重组副溶血性弧菌MAM7蛋白为权利要求1所述的重组副溶血性弧菌MAM7蛋白。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述重组副溶血性弧菌MAM7蛋白在制备抗副溶血性弧菌感染的疫苗中应用。
8.一种重组副溶血性弧菌MAM7蛋白疫苗，其特征在于，包含如权利要求1所述的重组副溶血性弧菌MAM
9.根据权利要求8所述的重组副溶血性弧菌MAM7蛋白疫苗，其特征在于，所述疫苗还包含佐剂。
...【技术特征摘要】
1.一种重组副溶血性弧菌mam7蛋白，其特征在于，所述重组副溶血性弧菌mam7蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。
2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1所述的重组副溶血性弧菌mam7蛋白。
3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列如seq idno.2所示。
4.一种载体，其特征在于，所述载体包含如权利要求3所述的核酸分子。
5.一种重组副溶血性弧菌mam7蛋白的制备方法，其特征在于，用于制备权利要求1所述的重组副溶血性弧菌mam7蛋白，包...
【专利技术属性】
技术研发人员：王华倩，赖佩芳，曾庆松，黄浚杰，彭锡明，张小容，官明燈，林锦翔，郑奕兰，向溢涛，
申请(专利权)人：广东工业大学，
类型：发明
国别省市：
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