【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于人类辅助生殖技术用医疗器械领域，特别涉及一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法。
技术介绍
1、胚胎冷冻是目前唯一能保存细胞生殖功能的成熟方法，随着生殖医学技术的发展，胚胎冷冻技术已经成为辅助生殖的核心步骤。玻璃化冷冻技术是一种高效快速的胚胎冷冻方法，在玻璃化冷冻过程中，高浓度的冷冻保护剂会将细胞内大部分水份置换出去，在极快速降温过程中冷冻保护液由液体转变为高黏度的玻璃样固体，玻璃状态下不形成冰晶，仍保持溶液状态的分子和离子分布，避免了由于冰晶存在而导致的细胞损伤，保证细胞功能完整。玻璃化冷冻与复苏过程包括：高浓度冷却保护剂平衡、冷冻载杆承载、液氮瞬时玻璃化冷冻、解冻液处理。在整体过程中，冷冻载体始终起到承载胚胎和卵母细胞的作用，其表面性质与承载能力、冷冻液体积、组织油附着情况有密切关系。因此对于冷冻载体表面性质的设计优化具有重要意义，目前对于冷冻载体的研究主要包括载体材质选择、开放式/封闭式设计、冷冻界面尺寸调节、表面结构设计和表面张力、附着力研究等。而在实际玻璃化冷冻的复苏过程中，承载了胚胎的冷冻载体要经过组织油再浸入解冻液，在此过程中载体表面和胚胎均易附着大量组织油液滴，表面粘附组织油的囊胚极易漂浮至液面表层，使其难以吸取转移，影响细胞复苏率和造成细胞丢失，因此设计具有强冷冻液承载能力，同时防组织油附着的载体表面有重要意义。
2、目前，在人类辅助生殖技术用医疗器械领域，实现玻璃化冷冻载杆高囊胚承载力、防组织油粘附的涂层方法尚无报道。
技术实现思路
1、针对
2、为达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案如下：
3、一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其包括如下步骤：
4、步骤1，将冷冻载杆置于无水乙醇中清洗，后吹干。对载杆两面进行等离子体处理，使其表面获得大量活性含氧基团。
5、优选的，冷冻载杆置于无水乙醇中清洗5分钟。
6、优选的，对载杆两面进行等离子体处理，等离子体功率为200～300w，处理30～120秒。
7、步骤2，将等离子体处理活化后的载杆置于盐酸多巴胺溶液中进行氨基修饰，得到具有高氨基密度表面的冷冻载杆。
8、优选的，配制0.2wt％盐酸多巴胺溶液(ph＝8.0)。
9、优选的，冷冻载杆在盐酸多巴胺溶液中静置5～20小时。
10、更优选的，冷冻载杆在盐酸多巴胺溶液中静置10小时。
11、步骤3，将氨基丰富的冷冻载杆置于异佛尔酮二异氰酸酯的甲苯中，后用甲苯冲洗；经异佛尔酮二异氰酸酯处理后的冷冻载杆置于聚二甲基硅氧烷的四氢呋喃中，后用四氢呋喃冲洗。步骤3进行1～2次循环。
12、优选的，配制0.1wt％异佛尔酮二异氰酸酯的甲苯溶液，将步骤2中的冷冻载杆浸泡于0.1wt％异佛尔酮二异氰酸酯的甲苯溶液30分钟，后用甲苯冲洗载杆1分钟。配制0.2wt％聚二甲基硅氧烷的四氢呋喃溶液，将浸泡异佛尔酮二异氰酸酯后的冷冻载杆浸泡于0.2wt％聚二甲基硅氧烷的四氢呋喃溶液30分钟，后用四氢呋喃冲洗载杆1分钟。此为一次循环。
13、更优选的，步骤3进行2次循环。
14、所述玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其光学性质未发生显著变化，透过率达97％；具有强冷冻液附着能力，及防组织油粘附能力。
15、与现有技术相比，本专利技术的一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，具有下列有益效果：
16、本专利技术提供一种玻璃化冷冻载杆强冷冻液附着，及防组织油粘附的修饰方法。采用多巴胺浸泡方法提高载杆表面氨基修饰密度；通过层层自组装策略，在载杆表面修饰异佛尔酮二异氰酸酯和聚二甲基硅氧烷，此方法不仅保证冷冻液在载杆表面稳定承载，还赋予载杆出色的拒组织油、滑组织油能力。其中，多巴胺、异佛尔酮二异氰酸酯和聚二甲基硅氧烷的浓度及载杆在其中的浸泡时间，可以在较大比例范围内进行调节，获得高透过率、强冷冻液附着、防组织油粘附的良好匹配，以优化胚胎玻璃化冷冻复苏的效果，为人类辅助生殖技术用医疗器械表面修饰提供思路。
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1.一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤1中，冷冻载杆置于无水乙醇中清洗5分钟。
3.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤1中，对载杆两面进行等离子体处理，等离子体功率为200～300W，处理30～120秒。
4.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤2中，配制0.2wt％盐酸多巴胺溶液，pH＝8.0。
5.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤2中，冷冻载杆在盐酸多巴胺溶液中静置5～20小时。
6.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤3中，配制0.1wt％异佛尔酮二异氰酸酯的甲苯溶液，将步骤2中的冷冻载杆浸泡于0.1wt％异佛尔酮二异氰酸酯的甲苯溶液30分钟，后用甲苯冲洗载杆1分钟。
7.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤3中，配制0.2wt％聚二甲基硅氧
8.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤3中，进行2次循环。
...【技术特征摘要】
1.一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤1中，冷冻载杆置于无水乙醇中清洗5分钟。
3.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤1中，对载杆两面进行等离子体处理，等离子体功率为200～300w，处理30～120秒。
4.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤2中，配制0.2wt％盐酸多巴胺溶液，ph＝8.0。
5.根据权利要求1所述一种玻璃化冷冻载杆的表面修饰方法，其特征在于所述步骤2中，冷冻载杆在盐酸多巴胺溶液中静置5～20小...
【专利技术属性】
技术研发人员：李达，李祥宇，徐大可，于智群，高英卓，杨大磊，王福会，
申请(专利权)人：中国医科大学附属盛京医院，
类型：发明
国别省市：
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