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一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的PCR引物及其方法技术

技术编号:40594094 阅读:21 留言:0更新日期:2024-03-12 21:56
本发明专利技术公开了一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的PCR引物及其方法,属于PCR检测技术领域。本发明专利技术公开的一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的PCR引物及其方法,根据沙门菌靶标序列筛选设计了一对特异性引物SEQ‑F/SEQ‑R,用该引物对待测样本进行PCR扩增,对扩增产物进行3.5%琼脂糖凝胶电泳;扩增产物大小为103bp和124bp两条带,则样本中含有或候选含有阿贡纳沙门菌;扩增产物大小仅为103bp,则样本中含有或候选含有其它沙门菌。本发明专利技术能快速检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌,与传统的沙门菌培养、生化鉴定及阿贡纳沙门菌鉴定方法相比更快速、简便,成本更低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及pcr检测,更具体的说是涉及一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的pcr引物及其方法。


技术介绍

1、沙门菌病是公共卫生学上有重要意义的传染病之一,其病原沙门菌属于肠杆菌科,蛋、家畜和肉制品是主要传播媒介,可引起多种畜禽疾病,造成全身性败血症和肠炎。阿贡纳沙门菌(salmonella agona)是一种重要的肠道致病菌,在我国曾多次引起群体性食物中毒。目前,根据kauffman-white(k-w)血清型分型方法,依据沙门菌菌体抗原及鞭毛抗原的不同,沙门菌目前的血清型有2600种以上,我国已报道了292种不同的血清型,分属于35个o群。

2、传统分离培养法是检测沙门菌的金标准,包括非选择性和选择性增菌、生化特性及血清学鉴定等步骤,结果准确,但步骤较为繁琐、费时费力,需要5天左右才能完成。其它检测法如抗体检测法,虽然快速,但其存在假阳性率高、易受操作不规范等导致污染等问题;除此之外,肠杆菌科的生化反应特异性较差,检测灵敏度和特异性有限。

3、因此,提供一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的pcr引物及其方法是本领域技术人员亟本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的PCR引物,其特征在于,所述引物序列如下:

2.一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的PCR方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的PCR方法,其特征在于,所述PCR扩增反应体系为20μL:10μL 2×Taq PCRMaster Mix,7μL ddH2O,1μL DNA,引物SEQ-F和引物SEQ-R各1μL。

4.根据权利要求2所述的一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的PCR方法,其特征在于,所述PCR扩增反应条件为:94℃预变性3min;94℃20s,5...

【技术特征摘要】

1.一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的pcr引物,其特征在于,所述引物序列如下:

2.一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的pcr方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的一种能检测沙门菌并鉴别阿贡纳沙门菌的pcr方法,其特征在于,所述pcr扩增反应体系为20μl:10μl 2×taq pcrmaster mix,7μl ddh2o,1μl dna,引物seq-f和引物seq-r各1μl。...

【专利技术属性】
技术研发人员:殷俊磊程瞾申荣华职丽娟王新科潘鹏涛刘国燕原新忠高姿
申请(专利权)人:新乡学院
类型:发明
国别省市:

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