一种人血清天然BICC1蛋白的提取方法技术

技术编号:40564376 阅读:24 留言:0更新日期:2024-03-05 19:28
本发明专利技术属于蛋白提取技术领域,具体涉及一种人血清天然BICC1蛋白的提取方法。本发明专利技术所述提取方法是将BICC1蛋白的结构域作为免疫片段制备抗原,再利用所述的抗原制备多克隆抗体,通过抗原和抗体之间的亲和作用,从血清中纯化获取了全长天然的BICC1蛋白。本发明专利技术解决了现有技术中无法获取全长BICC1的技术难题,助力了BICC1测定方法学的标准化研究以及生物学功能研究,同时也为其他类似无法获取的天然蛋白的提取提供了一种借鉴方案。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白提取,具体涉及一种人血清天然bicc1蛋白的提取方法。


技术介绍

1、1995年,研究人员在果蝇中发现了一种基因(称为双尾-c基因),其功能丧失会导致果蝇头部缺失和双尾结构的形成(michele m,emma es,paul fl.localized bic audal–c rnaencodes a protein containing a kh domain,the rnabinding motif offmr1.embo,1995,14(9):2043-2055)。根据序列分析,该基因翻译后的蛋白(bi cc1)结构中含有n端若干kh结构域和c端sam结构域(leettola c n,knight mj,cascio d,etal.characterization of the sam domain of the pkd-related protein anks6 andits interaction with anks3.bmc structural biology,2014,14(1):1-15;rothéb,leettola c本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种人血清天然BICC1蛋白的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的BICC1蛋白的结构域包括BICC1 N端KH结构域或BICC1 C端SAM结构域。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的抗原含有助溶标签;其中,所述的助溶标签包括:GST、MBP、SUMO中的任意一种。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述的免疫动物包括兔子、绵羊中的任意一种;所述的BICC1多克隆抗体包括N端KH结构域多克隆抗体、BICC1 C端SAM结构域多克隆抗体...

【技术特征摘要】

1.一种人血清天然bicc1蛋白的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的bicc1蛋白的结构域包括bicc1 n端kh结构域或bicc1 c端sam结构域。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的抗原含有助溶标签;其中,所述的助溶标签包括:gst、mbp、sumo中的任意一种。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述的免疫动物包括兔子、绵羊中的任意一种;所述的bicc1多克隆抗体包括n端kh结构域多克隆抗体、bicc1 c端sam结构域多克隆抗体中的任意一种。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的亲和纯化,其亲和填料包括protein a、protein g、protein a/g和protein l中的任意一种,其洗脱缓冲液为:0.1-0.3m glycine,ph 2.5-3.5。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的预活化填料包括:环氧预活化填料、nhs预活化填料、cnbr预活化填料中的任意一种。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中...

【专利技术属性】
技术研发人员:屠小明张玉基黄善青洪霞王鹏王倩严涛
申请(专利权)人:江苏集萃医工交叉技术研究所有限公司
类型:发明
国别省市:

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