利用家蚕生物反应器生产猪圆环病毒２型重组衣壳蛋白亚单位疫苗的方法及其产品技术

本发明专利技术提供一种家蚕生物反应器生产猪圆环病毒２型衣壳蛋白的方法，属于生物技术领域。该方法以家蚕核型多角体病毒为载体，通过转移载体中的核型多角体病毒同源臂与家蚕核型多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）基因同源重组的方式将猪圆环病毒２型衣壳蛋白基因整合至家蚕核型多角体病毒多角体启动子下进行目的蛋白表达。通过噬斑筛选的方法获得含目的蛋白基因的重组家蚕核型多角体病毒，以家蚕生物反应器进行目的蛋白的大规模表达，制备成含有重组猪圆环病毒２型衣壳蛋白的亚单位疫苗。通过仔猪攻毒试验，验证该亚单位疫苗具有良好的免疫保护作用。该方法具有表达效率高、目的蛋白活性好、生产成本低等特点，适于规模化生产。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用家蚕生物反应器生产猪圆环病毒２型重组衣壳蛋白亚单位疫苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：Ａ克隆猪圆环病毒２型衣壳蛋白的ＯＲＦ２基因，与杆状病毒转移载体连接，获得重组转移载体；Ｂ重组转移载体与杆状病毒共同转染昆虫细胞，培养物上清经噬斑筛选，获得重组杆状病毒；Ｃ重组杆状病毒感染家蚕幼虫或蚕蛹，在家蚕幼虫或蚕蛹中表达重组猪圆环病毒２型衣壳蛋白；Ｄ回收重组病毒感染的家蚕幼虫或蚕蛹的血淋巴；Ｅ分离纯化血淋巴中的重组猪圆环病毒２型衣壳蛋白；Ｆ利用纯化的重组猪圆环病毒２型衣壳蛋白，辅以佐剂，制备猪圆环病毒２型亚单位疫苗。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张许科，孙进忠，乔荣岑，
申请(专利权)人：洛阳普莱柯生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]