【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于核酸检测及生物医药，具体涉及一种通用数字pcr检测体系及其应用。
技术介绍
1、核酸扩增是临床诊断领域不可缺少的检测工具，包括对基因型的区分和患者标本中病原体的准确定量。基于聚合酶链反应(pcr)的技术为微量初始目标序列的扩增提供了强有力的工具。该方法已经从基于凝胶分析的低通量的普通pcr，发展到基于荧光技术的实时定量pcr，以及使用数千个微反应器的数字pcr(ddpcr)，且数字pcr具有绝对定量的优势，是第三代pcr检测技术。
2、现有的扩增技术通常采用非选择性的dna染料或目标特异性荧光探针。dna染料适合于低成本的核酸检测和定量，但在多重性和非特异性扩增方面受到限制。相比之下，荧光标记的靶向特异性寡核苷酸(如水解探针或分子信标)基于荧光基团和猝灭基团之间的荧光共振能量转移(fret)，并与目标序列直接相互作用。将目标特异性探针序列标记上不同的荧光基团，就能够在反应中高特异性地检测多个目标。但是荧光基团标记会增加分析成本，而且成本的增加与检测目标数量的增加成正比。可见，现有的扩增技术多存在效率低或成本高的
【技术保护点】
1.一种通用数字PCR检测体系，包括特异性介导探针、辅助靶标序列、通用探针、靶标引物和PCR扩增试剂；
2.根据权利要求1所述的通用数字PCR检测体系，其特征在于，所述互补序列的长度为15～35个碱基；所述突出序列的长度为5～25个碱基；所述阻止序列延伸的基团包括磷酸修饰基团、MGB修饰基团或与靶标模板不互补的短序列；所述与靶标模板不互补的短序列的长度为2个以上碱基。
3.根据权利要求1所述的通用数字PCR检测体系，其特征在于，所述辅助靶标序列5’端序列的长度为15～30个碱基；所述3’端序列的长度为5～25个碱基；所述间隔序列的长度为1个以上
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【技术特征摘要】
1.一种通用数字pcr检测体系，包括特异性介导探针、辅助靶标序列、通用探针、靶标引物和pcr扩增试剂；
2.根据权利要求1所述的通用数字pcr检测体系，其特征在于，所述互补序列的长度为15～35个碱基；所述突出序列的长度为5～25个碱基；所述阻止序列延伸的基团包括磷酸修饰基团、mgb修饰基团或与靶标模板不互补的短序列；所述与靶标模板不互补的短序列的长度为2个以上碱基。
3.根据权利要求1所述的通用数字pcr检测体系，其特征在于，所述辅助靶标序列5’端序列的长度为15～30个碱基；所述3’端序列的长度为5～25个碱基；所述间隔序列的长度为1个以上碱基。
4.根据权利要求1或3所述的通用数字pcr检测体系，其特征在于，所述介导引物中的1～2个靶标特异性碱基位于所述介导引物的3’端；所述介导引物不与任何已知物种的核苷酸序列互补。
5.根据权利要求1所述的通用数字pcr检测体系，其特征在于，所述通用探针的长度为15～30个碱基，所述通用探针的5’端修饰有发光基团，所述...
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