与NKP46、细胞因子受体、肿瘤抗原和CD16A结合的多特异性蛋白质制造技术

提供了经由多种受体而结合NKp46并特异性地重定向效应细胞以裂解感兴趣的靶细胞的多特异性蛋白质。这些蛋白质可用于治疗疾病，特别是癌症或感染性疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

提供了经由多种受体而结合并特异性地重定向效应细胞以裂解感兴趣的靶细胞的多特异性蛋白质。这些蛋白质可用于治疗疾病，特别是癌症或感染性疾病。

技术介绍

1、白介素2(il2或il-2)是作用于由nk细胞表达的细胞因子受体的多能细胞因子的一个示例。il-2主要由活化的t细胞，尤其是cd4+ t辅助性细胞产生，并且在辅助b细胞、t细胞和nk细胞的增殖和分化中起作用。il-2还是treg功能和存活所必需的。在真核细胞中，人il-2(uniprot：p60568)被合成为具有20个残基信号序列的153个氨基酸的前体肽，从而产生具有seq id no:352的氨基酸序列的成熟分泌的il-2。白介素2具有四个反向平行的两亲性α螺旋。这四个α螺旋是形成其功能所必需的四级结构。在大多数情况下，il-2通过三种不同受体起作用：白介素2受体α(il-2rα；cd25)、白介素2受体β(il-2r；cd122)和白介素2受体γ(il-2rγ；cd132)。il-2rβ和il-2rγ是il-2信号传导所必需的，虽然il-2rα(cd25)不是信号传导所必需的，但可赋予il-2与受体的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多特异性蛋白质，所述多特异性蛋白质包含：与感兴趣的抗原结合的抗原结合结构域(ABD)；与人NKp46多肽结合的ABD；能够结合FcRn的Fc结构域二聚体，任选地其中所述Fc结构域二聚体还能够与CD16A结合；以及结合NK细胞上存在的人细胞因子受体的ABD；其中所述蛋白质包含多肽链1、2和3：

2.一种多特异性蛋白质，所述多特异性蛋白质包含：与感兴趣的抗原结合的抗原结合结构域(ABD)；与人NKp46多肽结合的ABD；能够结合FcRn的Fc结构域二聚体，任选地其中所述Fc结构域二聚体还能够与CD16A结合；以及结合NK细胞上存在的人细胞因子受体的ABD；其中所述蛋白质包...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种多特异性蛋白质，所述多特异性蛋白质包含：与感兴趣的抗原结合的抗原结合结构域(abd)；与人nkp46多肽结合的abd；能够结合fcrn的fc结构域二聚体，任选地其中所述fc结构域二聚体还能够与cd16a结合；以及结合nk细胞上存在的人细胞因子受体的abd；其中所述蛋白质包含多肽链1、2和3：

2.一种多特异性蛋白质，所述多特异性蛋白质包含：与感兴趣的抗原结合的抗原结合结构域(abd)；与人nkp46多肽结合的abd；能够结合fcrn的fc结构域二聚体，任选地其中所述fc结构域二聚体还能够与cd16a结合；以及结合nk细胞上存在的人细胞因子受体的abd；其中所述蛋白质包含多肽链1、2和3：

3.一种多特异性蛋白质，所述多特异性蛋白质包含：与感兴趣的抗原结合的抗原结合结构域(abd)；与人nkp46多肽结合的abd；能够结合fcrn的fc结构域二聚体，任选地其中所述fc结构域二聚体还能够与cd16a结合；以及结合nk细胞上存在的人细胞因子受体的abd，其中所述蛋白质包含多肽链1、2、3和4：

4.一种多特异性蛋白质，所述多特异性蛋白质包含：与感兴趣的抗原结合的抗原结合结构域(abd)；与人nkp46多肽结合的abd；能够结合fcrn的fc结构域二聚体，任选地其中所述fc结构域二聚体还能够与cd16a结合；以及结合nk细胞上存在的人细胞因子受体的abd，其中所述蛋白质包含多肽链1和2：

5.一种能够增强针对表达感兴趣的抗原的靶细胞的nk细胞细胞毒性的多特异性蛋白质，所述多特异性蛋白质包含：

6.根据上述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中包含多肽链1和2的所述蛋白质是异源二聚体蛋白质，其中包含多肽链1、2和3的所述蛋白质是异源三聚体蛋白质，或者包含多肽链1、2、3和4的所述蛋白质是异源四聚体蛋白质。

7.根据上述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中所述蛋白质是异源三聚体，并且其中与人nkp46多肽结合的所述abd是scfv，并且与感兴趣的抗原结合的所述abd是fab。

8.根据上述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中所述蛋白质能够共接合nk细胞表面上的nkp46和所述细胞因子受体，以及任选地另外的cd16a。

9.根据上述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中与人nkp46多肽结合的所述abd和所述细胞因子多肽被构造为能够采取膜平面结合构象。

10.根据上述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中结合人细胞因子受体的所述abd包含未修饰以降低对nk细胞上的受体的结合亲和力的细胞因子或其片段或变体。

11.根据上述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中所述fc结构域是与人cd16a结合的fc结构域二聚体。

12.根据上述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中所述多特异性蛋白质能够指导表达nkp46的nk细胞裂解表达所述感兴趣的抗原的靶细胞，其中所述靶细胞的所述裂解由nkp46信号传导介导。

13.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中与人nkp46多肽结合的所述abd包含与所述人nkp46多肽的d1/d2结合部结合的vh和/或vl结构域，并且其中所述细胞因子是经修饰的il-2多肽。

14.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中所述蛋白质与(i)除了结合人细胞因子受体的所述abd被不与测定中存在的任何抗原结合的对照abd置换之外与其相同的多特异性蛋白质，和/或(ii)除了结合nkp46的所述abd被不与所述测定中存在的任何抗原结合的对照abd置换之外与其相同的多特异性蛋白质相比，引起针对表达感兴趣的抗原的靶细胞的nk细胞细胞毒性的增加。

15.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中结合细胞因子受体的所述细胞因子或所述abd包含与野生型人il-2多肽相比显示出降低的对cd25的结合的il-2多肽。

16.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中所述蛋白质具有仅一个与人nkp46多肽结合的abd，仅一个结合细胞因子受体的abd，仅一个与感兴趣的抗原结合的abd和仅一个fc结构域二聚体。

17.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中与人nkp46多肽结合的所述蛋白质或所述abd以介于1nm与100nm之间的kd结合人nkp46多肽，如通过spr所测定的。

18.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中所述蛋白质或所述细胞因子以介于10nm与1μm之间的kd结合所述人细胞因子受体，如通过spr所测定的。

19.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中结合细胞因子受体的所述abd是i型细胞因子和常见细胞因子受体γ链(cg链)家族的成员，任选地其中所述细胞因子是野生型或变体il-2、il-15、il-7或ll-21。

20.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中结合人细胞因子受体的所述abd是变体细胞因子，与所述未修饰的或野生型细胞因子多肽相比，所述变体细胞因子对t细胞上存在的第二细胞因子受体显示出降低的结合亲和力。

21.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质，其中所述细胞因子受体是cd122，并且结合细胞因子受体的所述abd是(a)包含与野生型il-2多肽相比导致与cd25的结合降低的修饰的il-2多肽，或(b)包含与野生型il-15多肽相比导致与cd215的结合降低的修饰的i...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·高蒂尔，Y·摩尔，O·德马里亚，
申请(专利权)人：先天制药公司，
类型：发明
国别省市：