【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新型抗ccr8抗体或其抗原结合片段、编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸、包括所述核酸的载体和宿主细胞、用于产生所述抗体或其抗原结合片段的方法、含有所述抗体或其抗原结合片段作为活性成分的药物组合物以及所述抗体在治疗由ccr8介导的疾病中的用途。
技术介绍
1、趋化因子是参与炎症中细胞募集和激活的低分子量趋化细胞因子家族。趋化因子通过与作为g蛋白偶联受体的趋化因子受体结合来调节广泛的细胞功能并发挥其作用，从而引起免疫系统中各种细胞亚群的趋化性和激活。根据蛋白质内n末端半胱氨酸残基的位置，趋化因子被分为不同类别，包括cc、cxc、cx3c和xc。cc类趋化因子含有前两个半胱氨酸不被任何氨基酸隔开的cc基序，而cxc类趋化因子含有前两个半胱氨酸被随机氨基酸隔开的cxc基序。趋化因子的活性主要通过与其在白细胞表面上的受体紧密结合来介导。
2、在正常生理条件下，趋化因子和趋化因子受体的表达受到精细且严格的调节，趋化因子和趋化因子受体的表达和激活失调通常引起诸如自身免疫性疾病或癌症等疾病。
3、身体有许多旨在防止癌症发生的内在机制。在这方面，免疫系统被认为在消灭携带基因突变的细胞中发挥着关键作用。因此，推断癌细胞通常通过不断进化的方式持续存在，以避免被免疫系统的细胞识别。特别地，已经表明，外周循环内和肿瘤微环境内调节性t淋巴细胞(其可以在本文中称为“treg细胞”)的水平升高都是在癌症患者中观察到的免疫抑制的基础。存在treg细胞的数量增加也已经被确定为成功实施癌症免疫疗法的障碍。
4、ccr
5、ccr8在脊髓神经元中表达，脊髓神经元也是脊髓ccl1的主要来源。ccl1是一种来自cc亚家族的充分表征的趋化因子。它通过与细胞表面趋化因子受体ccr8相互作用来吸引免疫细胞。ccl1和ccr8神经元信号传导还在糖尿病、脊髓损伤等诱发的神经性疼痛中发挥重要作用。因此，ccl1/ccr8轴可能是治疗糖尿病性神经病的药物开发的有希望的新型靶标。
6、据报道，ccl1-ccr8相互作用还在诸如igg4相关硬化性胆管炎(isc)等igg4相关疾病(igg4-rd)中发挥关键作用。
7、最近鉴定出的另一种ccr8配体是ccl18，它是一种来自β-趋化因子亚家族的趋化因子。与原发性舍格伦综合征和对照受试者相比，igg4-rd患者的唇唾液腺(lsg)和泪腺中的ccl18-ccr8轴特异性上调。基于其重要的致病作用，诸如各种细胞的趋化性、纤维化的诱导和igg4产生的增强，该轴可能是igg4-rd中潜在的新型治疗靶标。
8、鉴于ccr8在多种疾病的发病机制中的作用，希望制备抑制ccr8活性的抗体，所述抗体可用于治疗由ccr8介导的疾病，诸如癌症、神经性疼痛、igg4相关疾病(igg4-rd)，包括但不限于自身免疫性胰腺炎、嗜酸性血管中心纤维化、纤维化纵隔炎、肥厚性硬脑膜炎、伴有广泛肾小管间质沉积的特发性低补体血症性肾小管间质性肾炎、炎性主动脉瘤、炎性假瘤、küttner肿瘤(慢性硬化性涎腺炎)、纵隔纤维化、米库利兹综合征、多灶性纤维硬化、主动脉周炎和动脉周炎、腹膜后纤维化(奥蒙德病(ormond's disease))、里德尔氏甲状腺炎(riedel's thyroiditis)、硬化性肠系膜炎、硬化性胰腺炎和硬化性胆管炎等。
9、总结起来，本领域需要包含抗ccr8抗体的更有效的治疗剂，所述治疗剂有效地抑制ccr8信号传导，同时在人中引起最小的不良副作用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供特异性结合ccr8的抗ccr8抗体或其抗原结合片段，它们通过抑制由特异性表达ccr8的treg细胞等介导的免疫抑制来激活免疫。另外，本文公开的抗ccr8抗体或其抗原结合片段可以通过调节ccl1/ccr8轴来减轻神经性疼痛。此类抗体或抗原结合片段可以用于靶向表达ccr8的细胞以用于治疗和诊断目的。
2、本专利技术的诸位专利技术人还发现，本文公开的人源化抗体不仅与ccr8特异性结合，而且还显示出强烈的ccl1-ccr8信号传导阻断和改善的物种交叉反应性。因此，本专利技术的主要优点包括：
3、(a)根据本专利技术的抗体具有出色的生物活性和特异性，它对细胞表面ccr8具有良好的结合亲和力，并且可以用作靶向ccr8的抗体；
4、(b)根据本专利技术的全人抗体不仅具有与免疫抗体相当的活性，而且还具有较低的免疫原性；
5、(c)根据本专利技术的抗体不仅在抑制ccll诱导的趋化性中具有显著效果，而且还适用于其他异常ccl1/ccr8轴相关疾病。
6、在第一方面，提供了一种抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含至少一个重链可变区，所述重链可变区包含选自以下的hcdr1、hcdr2和hcdr3：
7、a)seq id no:2、3和4；或
8、b)seq id no:2、3和10；或
9、c)seq id no:2、16和17；或
10、d)seq id no:22、23和24；或
11、e)seq id no:32、33和34；或
12、f)seq id no:40、41和42；或
13、g)seq id no:47、48和49；或
14、h)seq id no:40、3和55；或
15、i)seq id no:58、59和60；或
16、j)seq id no:58、3和63；或
17、k)seq id no:2、3和67；或
18、l)seq id no:72、73和74；或
19、m)seq id no:58、79和80；或
20、n)seq id no:58、83和84；或
21、o)seq id no:58、83和88；或
22、并且包含至少一个轻链可变区，所述轻本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含至少一个重链可变区，所述重链可变区包含选自以下的HCDR1、HCDR2和HCDR3：
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含选自以下的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3：
3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述重链进一步包括重链恒定区和/或所述轻链进一步包括轻链恒定区。
4.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述抗体的重链可变区进一步包含人或人源化框架区，和/或所述抗体的轻链可变区进一步包含人或人源化框架区。
5.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述多肽序列选自：
6.根据权利要求1-5中任一项所述的抗体，其中所述抗体或其抗原结合片段包含具有与SEQ ID NO:1、9、15、21、28、31、39、46、54、57、62、66、71、78、82、87、90、92、94、96、100、102、104、106、108或110至少(≥)85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97
7.根据权利要求1-6中任一项所述的抗体，其中所述抗体是单克隆抗体、重组抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、双特异性抗体、多特异性抗体或其抗体片段。
8.根据权利要求7中任一项所述的抗体，其中所述抗体选自：(i)单链抗体、单链可变片段(scFv)、缺乏铰链区的单价抗体或微抗体；(ii)Fab、Fab'或F(ab')2片段；(iii)全抗体；和(iv)包含人IgG Fc结构域的抗体。
9.根据权利要求7所述的抗体，其中所述抗体是人的或人源化的。
10.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是能够结合人CCR8的CCR8特异性抗体。
11.根据权利要求10所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是能够结合人CCR8并阻断CCL1-CCR8信号传导的CCR8特异性抗体。
12.一种抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段在包含选自人CCR8的Y94至K107的一个或多个氨基酸残基的表位处与CCR8特异性结合。
13.根据权利要求12所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段在包含选自人CCR8的Y94、L95、L96、D97、Q98、V100、T103、V104、M105和K107的一个或多个氨基酸残基的表位处与人CCR8特异性结合。
14.根据权利要求13所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段在包含选自人CCR8的Y94、L95、L96、Q98、V100、T103、V104、M105和K107的一个氨基酸残基的表位处与人CCR8特异性结合。
15.一种重组蛋白，所述重组蛋白包含：
16.一种分离的核酸分子，所述分离的核酸分子编码根据权利要求1-14中任一项所述的抗体或抗原结合片段或根据权利要求15所述的重组蛋白。
17.一种载体，所述载体包含根据权利要求16所述的分离的核酸分子。
18.根据权利要求17所述的载体，所述载体包括细菌质粒，噬菌体，酵母质粒，植物细胞病毒，哺乳动物细胞病毒诸如腺病毒、慢病毒或逆转录病毒。
19.一种工程化宿主细胞，所述工程化宿主细胞在其基因组中包含根据权利要求16所述的核酸，或包含根据权利要求17所述的载体。
20.一种足以用作杂交探针、PCR引物或测序引物的分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸是根据权利要求16所述的核酸分子或其互补序列的片段。
21.一种抗体缀合物，所述抗体缀合物包含：
22.一种药物组合物，所述药物组合物包含(i)根据权利要求1-14中任一项所述的抗体或其抗原结合片段、根据权利要求15所述的重组蛋白、根据权利要求16所述的分离的核酸分子、根据权利要求17所述的载体、根据权利要求21所述的抗体缀合物或它们的组合，和(ii)药学上可接受的载剂。
23.根据权利要求22所述的药物组合物，其中所述抗CCR8的抗体具有去除肿瘤浸润性Treg细胞的作用。
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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含至少一个重链可变区，所述重链可变区包含选自以下的hcdr1、hcdr2和hcdr3：
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含选自以下的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2和lcdr3：
3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述重链进一步包括重链恒定区和/或所述轻链进一步包括轻链恒定区。
4.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述抗体的重链可变区进一步包含人或人源化框架区，和/或所述抗体的轻链可变区进一步包含人或人源化框架区。
5.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述多肽序列选自：
6.根据权利要求1-5中任一项所述的抗体，其中所述抗体或其抗原结合片段包含具有与seq id no:1、9、15、21、28、31、39、46、54、57、62、66、71、78、82、87、90、92、94、96、100、102、104、106、108或110至少(≥)85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％相同的多肽序列的重链可变区，或具有与seq id no:5、11、18、25、29、35、43、50、56、61、64、68、75、81、85、89、91、93、95、97、98、99、101、103、105、107、109或111至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％相同的多肽序列的轻链可变区。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的抗体，其中所述抗体是单克隆抗体、重组抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、双特异性抗体、多特异性抗体或其抗体片段。
8.根据权利要求7中任一项所述的抗体，其中所述抗体选自：(i)单链抗体、单链可变片段(scfv)、缺乏铰链区的单价抗体或微抗体；(ii)fab、fab'或f(ab')2片段；(iii)全抗体；和(iv)包含人igg fc结构域的抗体。
9.根据权利要求7所述的抗体，其中所述抗体是人的或人源化的。
10.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是能够结合人ccr8的ccr8特异性抗体。
11.根据权利要求10所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是能够结合人ccr8并阻断ccl1-ccr8信号传导的ccr8特异性抗体。
12.一种抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段在包含选自人ccr8的y94至k107的一个或多个氨基酸残基的表位处与ccr8特异性结合。
13.根据权利要求12所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段在包含选自人ccr8的y94、l95、l96、d97、q98、v100、t103、v104、m105和k107的一个或多个氨基酸残基的表位处与人ccr8特异性结合。
14.根据权利要求13所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段在包含选自人ccr8的y94、l95、l96、q98、v100、t103、v104、m105和k107的一个氨基酸残基的表位处与人ccr8特异性结合。
15.一种重组蛋白，所述重组蛋白包含：
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【专利技术属性】
技术研发人员：范国煌，王建飞，杜娟，王娜，
申请(专利权)人：南京艾美斐生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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