一种制备人源化TTR小鼠的方法及其应用技术

本发明专利技术属于动物基因工程和基因遗传修饰领域，具体涉及基于同源重组技术的Ttr基因修饰人源化动物模型的构建方法及其在生物医药的应用，所述方法包括用人TTR核酸替换内源小鼠Ttr核酸序列，所述方法中TTR基因外显子、内含子及UTR序列均为人源基因，且由人7.2kb的启动子序列驱动表达，以形成编码人或人源化TTR蛋白质的经修饰的Ttr基因；所述人TTR包括从基因上游7.2kb至基因3’UTR；所述内源小鼠Ttr包括从基因上游7.2kb至3’UTR；本发明专利技术采用同源重组技术将小鼠Ttr基因全长替换为人TTR基因全长，在ES细胞中一步打靶实现，不存在脱靶的现象，获得的小鼠具备生殖传递能力，周期短且安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于动物基因工程和基因遗传修饰领域，具体涉及基于同源重组技术的ttr基因修饰人源化动物模型的构建方法及其在生物医药的应用。

技术介绍

1、遗传性转甲状腺素蛋白(hattr)淀粉样变性是一种由转甲状腺素蛋白(ttr)基因突变引起的遗传性、致命性疾病。转甲状腺素蛋白(transthyretin，ttr)也被称为维生素a结合蛋白，是一种重要血浆蛋白组成成分，广泛分布在多种细胞、血浆和组织液中。ttr作为一种载体蛋白，主要在肝脏和脑内脉络丛中合成，分泌到血液和脑脊液中，起着运载甲状腺素(主要是t4)和视黄醇(即维生素a)分布到全身各个组织和细胞中的作用。

2、ttr是一种具有高度稳定性的四聚体结构蛋白，但ttr四聚体在病理情况或非正常生理状态下(如应激、炎症反应时)可发生分解，降解为单体。ttr的单体会生成种类复杂多样的淀粉样纤维，从而导致细胞内淀粉样纤维非正常生理性集聚。而细胞内的淀粉样异常沉积会造成细胞本身新陈代谢异常以至整个组织功能上的改变和紊乱，从而引发相关的疾病，比如报道较多的，遗传性转甲状腺素淀粉样变性病。p>

3、hat本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备人源化TTR小鼠的方法，其特征在于，用人TTR核酸替换内源小鼠Ttr核酸序列，所述方法中TTR基因外显子、内含子及UTR序列均为人源基因，且由人7.2kb的启动子序列驱动表达，以形成编码人或人源化TTR蛋白质的经修饰的Ttr基因；

2.一种制备人源化TTR小鼠的方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的一种制备人源化TTR小鼠的方法，其特征在于，所述步骤（1）具体包括以下步骤：

4.根据权利要求1所述的一种制备人源化TTR小鼠的方法，其特征在于，步骤（2）包括以下具体步骤：

5.根据权利要求1所述的一种制备人源化...

【技术特征摘要】

1.一种制备人源化ttr小鼠的方法，其特征在于，用人ttr核酸替换内源小鼠ttr核酸序列，所述方法中ttr基因外显子、内含子及utr序列均为人源基因，且由人7.2kb的启动子序列驱动表达，以形成编码人或人源化ttr蛋白质的经修饰的ttr基因；

2.一种制备人源化ttr小鼠的方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的一种制备人源化ttr小鼠的方法，其特征在于，所述步骤（1）具体包括以下步骤：

4.根据权利要求1所述的一种制备人源化ttr小鼠的方法，其特征在于，步骤（2）包括以下具体步骤：

5.根据权利要求1所述的一种制备人源化ttr小鼠的方法，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：牟星，徐婧语，潘书敏，
申请(专利权)人：赛业苏州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：