一种基于全人源抗体鼠的人PD-L1抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种基于全人源抗体鼠的抗人PD‑L1抗体或其抗原结合片段、编码它们的核酸分子及其制备方法和应用。所述抗人PD‑L1抗体或其抗原结合片段为全人源化序列，对PD‑L1具有良好的特异性和亲和力，能有效促进T细胞IL2、IFNγ的分泌。其具有更低的免疫原性。进一步涉及包含所述抗体或其抗原结合片段的药物组合物以及其在制备用于预防和/或治疗与PD‑L1相关疾病的药物中的用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于全人源抗体开发领域，具体涉及一种抗人pd-l1单克隆抗体及其应用，特别是涉及一种针对人pd-l1具有高亲和力、与猴pd-l1具有交叉、不结合鼠pd-l1的全人源化单克隆抗体及应用。

技术介绍

0、技术背景

1、肿瘤免疫治疗是肿瘤治疗领域一个长期的热点，其中t细胞的肿瘤免疫治疗又处于其核心位置。肿瘤免疫治疗是充分利用、调动肿瘤患者体内的杀伤性t细胞，对肿瘤进行杀伤作用，它可能是最有效的也是最安全的治疗肿瘤的途径。同时，肿瘤逃逸是肿瘤免疫治疗面临的巨大障碍，肿瘤细胞利用其自身对免疫系统的抑制作用促进了肿瘤的快速生长。

2、pd-l1也称b7-h1或者cd274，是共抑制性程序性死亡受体1(coinhibitoryprogrammed death receptor 1，pd-1)的第一个表征的功能性配体。pd-l1及其同源配体pd-l2与pd-1受体结合，在维持外周和中枢免疫细胞耐受性方面起着关键作用。研究发现pd-l1，在不同类型的肿瘤(包括黑色素瘤和卵巢癌，肺癌和肾癌)中高表达。在致癌过程中，pd-l1可能由于驱动基因导本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种特异性结合人PD-L1的全人源抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(VH)氨基酸序列和轻链可变区(VL)氨基酸序列；

2.如权利要求1所述的特异性结合人PD-L1的全人源抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述VH包含如SEQ ID NO：1具有至少75％同一性氨基酸序列，且所述VL包括与SEQ IDNO：2具有至少75％同一性氨基酸序列，

3.如权利要求1或2所述的特异性结合人PD-L1的全人源抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述VH包含与SEQ ID NO：1、3和5所示的序列相比，具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或...

【技术特征摘要】

1.一种特异性结合人pd-l1的全人源抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(vh)氨基酸序列和轻链可变区(vl)氨基酸序列；

2.如权利要求1所述的特异性结合人pd-l1的全人源抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述vh包含如seq id no：1具有至少75％同一性氨基酸序列，且所述vl包括与seq idno：2具有至少75％同一性氨基酸序列，

3.如权利要求1或2所述的特异性结合人pd-l1的全人源抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述vh包含与seq id no：1、3和5所示的序列相比，具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加，且所述vl包含与seq id no：2、4和6所示的序列相比，具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加。

4.如权利要求1～3中任一项所述的特异性结合人pd-l1的全人源抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段是基于全人源抗体鼠的全人源抗体。

5.如权利要求1～4中任一项所述的特异性结合人pd-l1的全人源抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段进一步包含重链及轻链恒定区或其变体，所述重链恒定区选自igg、igm、ige、igd或iga，优选地，所述重链恒定区选自igg1、igg2、igg3或igg4，优选地，所述重链恒定区是人igg1重链恒定区，更优选地，所述人igg1重链恒定区包含seq id no:25所示的序列；且所述轻链恒定区选自kappa和lambda，优选地，所述轻链恒定区是人kappa轻链恒定区，更优选地，所述人kappa轻链恒定区包含seq id no:26所示的序列。

6.如权利要求1所述的特异性结合人pd-l1的全人源抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人pd-l1的全人源抗体或其抗原结合片段能够特异性结合人pd-l1的胞外区，且与人pd-l1胞外区的亲和力常数(kd)小于1e-10。

7.一种分离的核酸分子，其特征在于，编码权利要求1～6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。

8.一种载体，其特征在于，包含权利要求7所述的核酸分子。

9.如权利要求8所述的载体，其特征在于，所述载体为克隆载体或表达载体。

10.一种宿主细胞，其包含权利要求7所述的核酸分子或权利要求8或9所述的载体。

11.一种用于制备抗体或其抗原结合片段或多特异性抗体的方法，其特征在于，在允许蛋白表达的条件下，培养权利要求10所述的宿主细胞，和从培养的宿主细胞培养物中收集所述抗体或其抗原结合片段或所述多特异性抗体。

12.一种缀合物，其特征在于，包含权利要求1～6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。

13.如权利要求12所述的缀合物，其特征在于，所述偶联部分选自以下任一种：可检测的标记、放射性同位素、荧光物质、发光物质、有色物质、酶、聚乙二醇(peg)、核素、核酸、免疫激动剂、细胞因子、小分子毒素、具有结合活性多肽、蛋白、受体、配体、以及其他抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡或坏死的活性物质。

14.一种药物组合物，其特征在于，其含有权利要求1～6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段、或权利要求7所述的分离的核酸、或权利要求8或9所述的载体、或权利要求10所述的宿主细胞或者权利要求12或13所述的缀合物，以及药学上可接受的载体和/或赋形剂。

15.如权利要求14所述的药物组合物，其特征在于，还包括另外的药学活性剂；优选地，所述另外的药学活性剂为具有抗肿瘤活性的药物、免疫治疗相关药物、增强免疫力的药物或免疫系统激活剂、放射性物质或显色剂。

16.一种诊断性或治疗性试剂盒，其特征在于，包含权利要求1～6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段、或权利要求7所述的分离的核酸、或权利要求8或9所述的载体、或权利要求10所述的宿主细胞或者权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩蓝青，张亮，丁睿清，焦云娟，牟星，周顺，
申请(专利权)人：赛业苏州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：