System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记及应用制造技术_技高网

与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记及应用制造技术

技术编号:40528466 阅读:7 留言:0更新日期:2024-03-01 13:48
本发明专利技术涉及一种与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记及应用,所述的与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记的编号为TMc43049和TMc42528,其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示。所述的应用为所述的与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记在检测烟草基因组DNA中是否存在VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513中的应用。与现有技术方法相比,本发明专利技术所述的共显性SSR标记具有精准、高效、稳定、便捷、低成本和不限检测时机的特点,因此该分子标记可以作为烟草高香气品质育种中VI型蔗糖酯基因qBMVSE513分子标记辅助选择的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记及应用。


技术介绍

1、烟草蔗糖酯是其叶片表面化学主要成分之一,也是烟草中重要的潜在致香前体物质,其中,栽培烟草中含量较高的为蔗糖四酯(severson r f,arrendale r f,chortyk ot,quantitation of the major cuticular components from green leaf of differenttobacco types.journal of agricultural and food chemistry,1984,(32):566-570.),其降解可产生小分子挥发性脂肪酸并可极大地提高烟叶的香气品质(severson r f,arrendale r f,chortyk o t,isolation and characterization of the sucroseesters of the cuticular waxes of green tobacco leaf.journal of agriculturaland food chemistry,1985,(33):870-875.leffingwell j c,chemical constituents oftobacco leaf and differences among tobacco types.social science electronicpublishing,2001,1:38-44.)。研究表明,栽培烟草中的蔗糖四酯依据分子量的大小不同,可分为6个类型,即,i型烟草蔗糖酯~vi型烟草蔗糖酯,其中,iii型~vi型烟草蔗糖酯中因含有3-甲基戊酰而被称为bmvse(vontimitta v,danehower d a,steede t,moon h s,lewis r s,analysis of a nicotiana tabacum l.genomic region controlling twoleaf surface chemistry traits.journal of agricultural and food chemistry,2010,58:294-300.)。bmvse经硅烷化气相色谱质谱(gc-ms)进一步解析后,依据葡萄糖环部分特征碎片离子大小又可分为bmvse471(iii型烟草蔗糖酯)、bmvse485(iv型烟草蔗糖酯)、bmvse499(v型烟草蔗糖酯)和bmvse513(vi型烟草蔗糖酯),此4种类型烟草蔗糖酯是培育含高蔗糖酯而具有高香气品质烤烟新品种的核心关注点。其中,4种类型bmvse中的前3种已有专利技术专利报道,即,iii型烟草蔗糖酯bmvse471(zl 2021 1 1346741.1)、iv型烟草蔗糖酯bmvse485(zl 2021 1 1363676.3)和v型烟草蔗糖酯bmvse499(申请号202111394234.5)3种类型烟草糖脂基因已被分别遗传与定位分析并获得可用于指导烟草高香气品质育种的两侧紧密连锁标记。

2、针对栽培烟草叶片中bmvse含量的遗传研究表明,雪茄烟beinhart1000-1中的bmvse基因被定位于ssr标记pt30354和pt52061、pt61362之间约5.2cm区域内,且与ssr标记pt30209和pt20315呈共分离(vontimitta v,danehower d a,steede t,moon h s,lewis rs,analysis of a nicotiana tabacum l.genomic region controlling two leafsurface chemistry traits.journal of agricultural and food chemistry,2010,58:294-300.)。利用上述5个ssr标记对不同遗传背景的烟草材料及192份重组自交系群体进行bmvse筛选验证,结果表明仅2个标记(pt20135和pt30354)有效,但标记的基因型与bmvse表型的一致率仅约92.165%(陈彪,陈铭,李洋洋,屈亚芳,程立锐,杨爱国,胡日生,刘旦,罗成刚,向世鹏,冯全福,常爱霞,烟草蔗糖酯ssr分子标记筛选及辅助育种应用.中国烟草科学,2019,40(3):8-15.)。bmvse基因型与其表型的一致率远未达到分子标记辅助选择(mas)的100%精准度要求,主要原因是:文献的作者错误的将原本分别属于bmvse471(iii型)、bmvse485(iv型)、bmvse499(v型)和bmvse513(vi型)4个不同独立基因视作一个基因(命名为bmvse)进行遗传定位研究,故此,获得的定位结果是不准确的。本项目组的研究表明,iii~vi型bmvse属于典型的数量性状,且受beinhart1000-1基因组内不同染色体或同一染色体上不同位置的qtls控制,这些基因/qtls被暂时命名为qbmvse471、qbmvse513、qbmvse499和qbmvse513。进一步研究表明,文献针对iii~vi型烟草蔗糖酯作为一个基因(bmvse)进行定位的结果是不准确的,该定位结果仅是4种类型bmvse中的一种,故此,在后续的实验验证中出现了5个紧密连锁标记仅有2个可用且无法精准实现标记基因型与bmvse表型一致的情况。此外,目前虽已有针对bmvse中包含的4种类型基因/qtl进行区分并遗传定位的研究,但也仅局限于其中的前3种类型bmvse基因/qtl,即,分别对bmvse471(ⅲ型)、bmvse485(iv型)和bmvse499(v型)3种类型烟草蔗糖酯进行了qtl分析并将此3种类型bmvse基因/qtl两侧紧密连锁标记进行了专利。上述错误(不足)及对bmvse513(vi型)遗传与定位分析的缺乏,严重地制约了利用与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁标记开展高香气烟草新品种的选育进程。

3、鉴于此,本专利技术首次针对bmvse中包含的vi型烟草糖脂bmvse513进行遗传定位研究,利用数量性状连锁分析(qtl)法和硅烷化气相色谱质谱(gc-ms)法,在烟草全基因组范围内筛选获得与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记,以弥补现有技术和已报道文献的不足、加速分子标记辅助选择(mas)在烟草高香气品种选育中的精准、高效利用。


技术实现思路

1、本专利技术正是为了解决上述问题缺陷,提供一种与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记及应用。

2、本专利技术采用如下技术方案实现。

3、一种与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记,本专利技术所述的与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记的编号为tmc43049和tmc42528,其pcr扩增产物核苷酸序列分别为seq id no.1和seq id no.2、seq id no本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记,其特征在于,所述的与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记的编号为TMc43049和TMc42528,其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示。

2.根据权利要求1所述的与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记,其特征在于,所述共显性标记TMc43049和TMc42528位于目的基因qBMVSE513两侧。

3.根据权利要求1所述的与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记,其特征在于,所述的分子标记所对应的2个位点的引物序列分别为:

4.权利要求1或2或3所述的与VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513紧密连锁的共显性SSR标记的应用在于检测烟草基因组DNA中是否存在VI型烟草蔗糖酯基因qBMVSE513。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,该应用的方法为,以TMc43049和TMc42528序列的引物分别扩增待检测烟草基因组DNA,检测PCR扩增产物。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,PCR扩增产物中同时含有如SEQ ID No.1和SEQ ID No.3所示序列则表明该待测烟草植株含有高香气品质的VI型烟草蔗糖酯的纯合等位基因,基因型为BMVSE513 BMVSE513。

7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,PCR扩增产物中同时含有如SEQ ID No.2和SEQ ID No.4所示序列则为待测烟草植株不含VI型烟草蔗糖酯的纯合等位基因,基因型为bmvse513bmvse513。

8.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,PCR扩增产物中同时含有如SEQ ID No.1和SEQ ID No.4所示序列,或同时含有SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示序列则为待测烟草植株含有高香气品质的VI型烟草蔗糖酯的杂合等位基因,基因型为BMVSE513bmvse513。

...

【技术特征摘要】

1.一种与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记,其特征在于,所述的与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记的编号为tmc43049和tmc42528,其pcr扩增产物核苷酸序列分别为seq id no.1和seq id no.2、seq id no.3和seq id no.4所示。

2.根据权利要求1所述的与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记,其特征在于,所述共显性标记tmc43049和tmc42528位于目的基因qbmvse513两侧。

3.根据权利要求1所述的与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记,其特征在于,所述的分子标记所对应的2个位点的引物序列分别为:

4.权利要求1或2或3所述的与vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513紧密连锁的共显性ssr标记的应用在于检测烟草基因组dna中是否存在vi型烟草蔗糖酯基因qbmvse513。

5.根据权利要求4...

【专利技术属性】
技术研发人员:肖炳光童治军方敦煌李勇黄昌军刘勇曾建敏隋学艺
申请(专利权)人:云南省烟草农业科学研究院
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1