一种天然甲壳素载体固定化脂肪酶及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种天然甲壳素载体固定化脂肪酶及其制备方法和应用。天然甲壳素载体固定化脂肪酶的制备方法如下：S1.物质的量比1:1‑1:3的CCOA在80℃条件下制备酸性NADES；S2.利用所制备的酸性NADES从虾壳粉中一步提取到未发生脱乙酰化反应的天然甲壳素；S3.将嗜热芽孢杆菌脂肪酶BTL2通过戊二醛交联共价连接固定在天然甲壳素上，获得天然甲壳素载体固定化脂肪酶。本发明专利技术合成酸性NADES的工艺简单、成本较低易操作，一步提取甲壳素温度较低，无需额外添加酸、碱，环境友好且实用性强，所合成的天然甲壳素对嗜热脂肪酶BTL2表现出极大的亲和力，可提高酶的固载量，稳定性得到改善，强化酶的催化特性，并且其本身所具有的Ca<supgt;2+</supgt;离子对酶活提升也具有极大的作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于固定化酶制备，具体涉及一种天然甲壳素载体固定化脂肪酶及其制备方法和应用。

技术介绍

1、酶作为生物催化剂，在医药、食品和化工等领域有着广阔的研究和应用前景，但是酶在催化过程中具有不稳定性，容易失活、不能回收、反应后混入产物等问题限制了酶的应用。酶的固定化是用固载材料将酶分子限制在一定区域内的一项技术，固定化酶技术提高了酶的稳定性，实现了酶的重复使用，降低生产成本。酶固定化方法根据载体、操作方法以及固定化机理不同，主要可分为吸附法、包埋法、交联法和结合法等。交联法是利用双功能或多功能基团试剂在酶分子之间交联架桥固定化酶的方法，虽然固定化酶很牢固但是由于交联条件苛刻，酶分子易失活。现在越来越多的固定化方法并不局限于单一方法的使用，而是根据需要来复合使用两种及两种以上的固定法以达到制备固定化材料的目的。载体材料成本低廉，固定化过程简单，酶回收率高，重复利用方便，还能保持较长时间的催化性能，是创制优良固定化酶的首要条件。甲壳素对蛋白质亲和力显著，甲壳素载体不仅一定程度上可抵消底物对酶的抑制作用，还能增强微界面上的底物可及性，有效改善酶的催化性能，既方本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种天然甲壳素载体固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，步骤如下：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的交联共价连接具体过程为每0.5g所述的天然甲壳素与20mL质量分数为1％的戊二醛混合后在30℃条件下交联1h，然后在20mLpH8.0的Tris-HCl缓冲溶液体系下冰浴并添加0.5mL浓度为1mg/mL的脂肪酶水溶液搅拌1h。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的脂肪酶为猪胰腺脂肪酶PPL、黑曲霉脂肪酶ANL、假丝酵母脂肪酶CAL、嗜热芽孢杆菌脂肪酶BTL2。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的嗜热芽孢杆菌脂...

【技术特征摘要】

1.一种天然甲壳素载体固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，步骤如下：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的交联共价连接具体过程为每0.5g所述的天然甲壳素与20ml质量分数为1％的戊二醛混合后在30℃条件下交联1h，然后在20mlph8.0的tris-hcl缓冲溶液体系下冰浴并添加0.5ml浓度为1mg/ml的脂肪酶水溶液搅拌1h。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的脂肪酶为猪胰腺脂肪酶ppl、黑曲霉脂肪酶anl、假丝酵母脂肪酶cal、嗜热芽孢杆菌脂肪酶btl2。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：张俊，李昆太，雷家炽，刘海，刘书成，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：