一种二羟酸脱水酶突变体及其重组微生物与应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物工程技术领域，具体公开了一种二羟酸脱水酶突变体及其重组微生物与应用。本发明专利技术的二羟酸脱水酶突变体，以野生型二羟酸脱水酶的氨基酸序列为参考序列，所述二羟酸脱水酶突变体含有第237位丙氨酸被赖氨酸、精氨酸、组氨酸或脯氨酸取代的突变。具有本发明专利技术突变体的发酵菌，其生产L‑缬氨酸的能力得到了明显提升，产量高、副产物少。本发明专利技术为发酵生产L‑缬氨酸提供了一种新的高效率生产方式。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物工程，具体地说，涉及一种二羟酸脱水酶突变体及其重组微生物与应用。

技术介绍

1、支链氨基酸(branch chain amino acid，bcaa)包括缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。其中，l-缬氨酸(l-valine)，化学名称为l-α-氨基异戊酸，分子式为c5h11no2，相对分子质量为117.15。l-缬氨酸呈白色结晶或结晶性粉末，无臭，味苦，在水中25℃的溶解度为88.5g/l，50℃的溶解度为96.2g/l，不溶于冷乙醇、乙醚、丙酮，等电点为5.96，熔点为315℃。

2、l-缬氨酸是人体八种必需氨基酸之一，因其特殊的结构和功能，在人类生命代谢中具有特别重要的地位。l-缬氨酸可以广泛应用于医药工业、食品工业和饲料工业等。其中，在医药工业中，l-缬氨酸可作为氨基酸输液、综合氨基酸制剂的主要成分，可治疗肝功能衰竭、中枢神经系统功能紊乱。在食品工业中，l-缬氨酸可用作食品添加剂、营养增补液及风味剂等。l-缬氨酸也可用作氨基酸功能饮料与运动员饮料，具有形成肌肉、强化肝功能、减轻肌肉疲劳等作用。在饲料工业中，l-缬氨酸对动物的乳本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种二羟酸脱水酶突变体，其特征在于，以野生型二羟酸脱水酶的氨基酸序列为参考序列，所述二羟酸脱水酶突变体含有第237位丙氨酸被赖氨酸、精氨酸、组氨酸或脯氨酸取代的突变。

2.根据权利要求1所述的二羟酸脱水酶突变体，其特征在于，所述二羟酸脱水酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示。

3.一种DNA分子，其特征在于，以野生型ilvD基因为参考序列，所述DNA分子含有第709-711位碱基由GCC突变为AAG、CGC、CAC或CCC的突变。

4.根据权利要求3所述的DNA分子，其特征在于，所述DNA分子的核苷酸序列如SEQ IDNO.10所示。...

【技术特征摘要】

1.一种二羟酸脱水酶突变体，其特征在于，以野生型二羟酸脱水酶的氨基酸序列为参考序列，所述二羟酸脱水酶突变体含有第237位丙氨酸被赖氨酸、精氨酸、组氨酸或脯氨酸取代的突变。

2.根据权利要求1所述的二羟酸脱水酶突变体，其特征在于，所述二羟酸脱水酶突变体的氨基酸序列如seq id no.12所示。

3.一种dna分子，其特征在于，以野生型ilvd基因为参考序列，所述dna分子含有第709-711位碱基由gcc突变为aag、cgc、cac或ccc的突变。

4.根据权利要求3所述的dna分子，其特征在于，所述dna分子的核苷酸序列如seq idno.10所示。

5.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物表达权利要求1或2所述的二羟酸脱水酶突变体。

6.根据权利要求5所述的重组微生物，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴涛，薛婷莉，栾明月，姚佳琪，张孟娟，
申请(专利权)人：廊坊梅花生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：