通过修饰细胞内乳糖的输入来增强HMO的形成制造技术

技术编号:40473862 阅读:62 留言:0更新日期:2024-02-26 19:10
本发明专利技术涉及一种在包含增强的寡糖转运能力的遗传工程细胞中产生一种或多种人乳寡糖(HMO),特别是LNT和/或LNnT的方法。遗传修饰细胞包含一系列能够产生一种或多种HMO的遗传修饰,以及一系列增强乳糖和所产生HMO的转运的遗传修饰。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及在包含增强的寡糖转运能力的遗传工程细胞中产生一种或多种人乳寡糖(hmo)、特别是lnt和/或lnnt的方法。遗传修饰细胞包含一系列能够产生一种或多种hmo的遗传修饰,以及一系列增强乳糖和所产生hmo的转运的遗传修饰。


技术介绍

1、由于发现了人乳寡糖(hmo)在人类发育中的重要功能,因此在过去十年中,人乳寡糖(hmo)引起了极大兴趣。除了它们的益生元特性之外,hmo具有额外的积极作用,扩大了其应用领域。hmo的健康益处使其被批准用于食品(例如婴儿配方奶粉和食品)以及消费者保健产品。

2、迄今为止,至少115种hmo的结构已被确定,而且人乳汁中可能存在更多的hmo。

3、由于hmo的可用性有限,非常需要有效的商业化,即大规模生产。目前尚未提供通过化学合成实现食品和医疗应用所需的大规模生产和高质量生产。此外,hmo的化学合成途径涉及多种有毒化学品,这会给最终产物带来污染风险。

4、为了克服与hmo化学合成相关的缺点,已经开发了几种酶促方法和发酵方法。已经针对多种hmo开发了基于发酵的工艺,例如2’-岩藻糖基乳糖本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于产生一种或多种HMO的方法,其包括:

2.根据权利要求1所述的用于产生一种或多种HMO的方法,其中所述遗传工程细胞表达蔗糖利用系统。

3.根据权利要求2所述的用于产生一种或多种HMO的方法,其中所述蔗糖利用系统是能够将蔗糖水解成葡萄糖和果糖的多肽,其选自SEQ ID NO:86[SacC_Agal,糖苷水解酶家族32蛋白,WP_103853210.19]、SEQ ID NO:87[Bff,β-呋喃果糖苷酶蛋白,BAD18121.1]、或SEQID NO:11和SEQ ID NO:12中任一个的功能同源物,所述功能同源物的氨基酸序列与SEQ IDNO:1...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种用于产生一种或多种hmo的方法,其包括:

2.根据权利要求1所述的用于产生一种或多种hmo的方法,其中所述遗传工程细胞表达蔗糖利用系统。

3.根据权利要求2所述的用于产生一种或多种hmo的方法,其中所述蔗糖利用系统是能够将蔗糖水解成葡萄糖和果糖的多肽,其选自seq id no:86[sacc_agal,糖苷水解酶家族32蛋白,wp_103853210.19]、seq id no:87[bff,β-呋喃果糖苷酶蛋白,bad18121.1]、或seqid no:11和seq id no:12中任一个的功能同源物,所述功能同源物的氨基酸序列与seq idno:11或seq id no:12中任一个具有至少80%同一性。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳糖通透酶的氨基酸序列选自seq id no:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16[lacy变体]以及作为功能同源物并与seq id no:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16[lacy变体]中任一个具有至少70%同一性的氨基酸序列。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳糖通透酶的氨基酸序列与seq id no:1相同,或与seq id no:1具有至少70%同一性。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述mfs转运蛋白是nec、vag和/或yberc。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述β-1,3-gal-转移酶或β-1,4-gal-转移酶分别选自cvb3galt和galtk或galt以及cvb3galt、galtk或galt中任一个的功能同源物,所述功能同源物的氨基酸序列与seq id no:17[cvb3galt]、seq id no:18[galtk]和seq id no:19[galt]中任一个具有至少70%同一性。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述β-1,3-glcnac-转移酶选自lgta、pmnagt、hd0466以及lgta、pmnagt或hd0466中任一个的功能同源物,所述功能同源物的氨基酸序列与seq id no:20[lgta]、seq id no:21[pmnagt]或seq id no:22[hd0466]中任一个具有至少70%同一性。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述遗传工程细胞表达一种或多种参与活化糖核苷...

【专利技术属性】
技术研发人员:M·帕帕扎基斯
申请(专利权)人:帝斯曼知识产权资产管理有限公司
类型:发明
国别省市:

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