【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于病原微生物检测，具体涉及lamp-crispr/cas12a可视化鉴别rhdv 1型和2型的试剂盒及方法。
技术介绍
1、兔出血症是一种急性、烈性、高度接触性传染病，由兔出血症病毒（rhdv）引起，该疾病死亡率极高，严重危害养兔业的发展。相较于经典rhdv称为兔出血症病毒1型（rhdv1），毒株兔出血症病毒2型（rhdv2）宿主范围更广，传播途径多，在自然环境下抵抗力强，对养殖业造成巨大经济损失，高效、准确且能鉴别二者的诊断工具对防控兔出血症疫情尤为重要。
2、目前已有pcr、荧光定量pcr、血凝实验、elisa等检测方法。免疫学检测方法如血凝实验、elisa实验检测的准确性较差，且存在窗口期难检出等不足，病原学检测方法如rt-pcr、荧光定量pcr需要专业的仪器，一般是实验室检测，无法做到现场的快速检测，无法满足基层养殖场的检测需求。目前基于lamp和crispr-cas12a快速可视化鉴别兔出血症病毒的研究未见相关报道，且该方法应用到区分兔出血症病毒1型和兔出血症病毒2型的快速鉴别也未见相关报道。
<...【技术保护点】
1.基于LAMP-CRISPR/Cas12a可视化鉴别RHDV 1型和2型的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括LAMP扩增体系和CRISPR/Cas12a检测体系；
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述LAMP扩增体系中还包括环引物LF和/或LB；针对RHDV1的LAMP扩增体系中环引物LB的核苷酸序列如SEQ ID No.17所示；针对RHDV2的LAMP扩增体系中环引物LF和LB的核苷酸序列如SEQ ID No.28-29所示。
3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述LAMP扩增体系中还包括LAMP/RT-LAMP2X预混液...
【技术特征摘要】
1.基于lamp-crispr/cas12a可视化鉴别rhdv 1型和2型的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括lamp扩增体系和crispr/cas12a检测体系；
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述lamp扩增体系中还包括环引物lf和/或lb；针对rhdv1的lamp扩增体系中环引物lb的核苷酸序列如seq id no.17所示；针对rhdv2的lamp扩增体系中环引物lf和lb的核苷酸序列如seq id no.28-29所示。
3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述lamp扩增体系中还包括lamp/rt-lamp2x预混液、待检核酸和无酶水。
4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述crispr/cas12a检测体系还包括lamp扩增产物、rna酶抑制剂、nebuffer 2.1、cas12a蛋白、ssdna报告分子和无酶水。
5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括侧流层析试纸条。
6.如权利要求1~5任意一项所述的试剂盒在制备鉴别rhdv1和rhdv2产品中的应用。
7.基于lamp-crispr/cas12...
【专利技术属性】
技术研发人员：宋艳华，王芳，伍孟婷，陈萌萌，仇汝龙，范志宇，胡波，魏后军，葛雷，李一鸣，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：
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