【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于环境微生物领域，具体涉及一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法。
技术介绍
1、油漆是一种可液化的胶泥组合物，用于家庭和工业用途，具体可分为水性油漆和油性油漆。水性油漆是有机和无机颜料、纤维素和非纤维素增稠剂、染料、填充剂等的复杂混合物。用于建筑和家庭用途的油性油漆已迅速转变为水性油漆。由于使用了大量化学品，油漆制造过程中产生的废水含有相当浓度的有机物、悬浮固体、有色材料和有害污染物，这些物质在自然界中具有高度危险性。
2、我国的水性油漆行业重点生产地域为华东、华中、华南三大地区，科学研究表明，暴露在水性油漆的烟雾中，儿童患哮喘、过敏和湿疹的可能性很高。而水性油漆中常见的乙醇有麻醉效果，接触过量会导致中枢神经系统兴奋，继而使之麻痹，长期受较大剂量作用时，会使肝脏、心血管系统、消化器官等发生严重疾病，因此，处理这种由有毒有机化合物的复杂组合组成的废水是非常重要的。
3、水性油漆生产过程中产生的废水往往具有较高的有机负荷，而乙醇废水通常因其浓度太低，无法进行可行的、具有效益的回收。在这样的条件下，如何选择具有最大收益和环境可接受性的低成本技术，成为了处理乙醇废水的重中之重。行业采用的常见处理技术包括沉淀、混凝和絮凝等物理化学处理，但据研究，通过物理化学工艺处理含乙醇废水导致了大量化学品的消耗和有毒污泥的产生，需要进一步处理。高级氧化工艺的主要缺点是作为一种独立的技术成本过高。然而，因为废水中乙醇含量较低的特征，使得生物处理工艺具有巨大的潜力，可作为一种经济、环保和高效的涂料工业废水处
4、因此，为了解决上述问题，本文提出一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于设计能够针对水性油漆废水中常见的乙醇废水，对微生物进行筛选，选出对乙醇废水降解效率最高的微生物，并进行富集与驯化一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法。
2、为了达到上述技术效果，本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
3、s1、将收集好的水性油漆废水置入干净的容器中，经离心处理，待沉淀后进行过滤，去除杂质，将滤液注入液体培养基中，进行微生物的鉴定与筛选；
4、s2、将筛选出的细菌混合物置于用于富集细菌培养物的最低盐培养基中进行初步富集；
5、s3、将先前富集的生物质连续转移到以目标有机溶剂乙醇作为碳源的最低盐培养基中进行二次富集，二次富集完成后，进行微生物的驯化。
6、进一步的，s1中，所述微生物的鉴定与筛选，通过在琼脂平板上重复划线从混合培养物中分离细菌菌株；分离物根据其形态进行分离；仔细分离每个菌落，并在新鲜琼脂板上划线，重复三次；此后，将培养物在琼脂斜面上划线，并在3℃～5℃下进行培养。
7、进一步的，所述混合培养物中分离细菌菌株具体为铜绿假单胞菌、甲基对硫磷降解菌、芽孢杆菌、林丹降解菌和柱状金杆菌。
8、进一步的，s1中，所述筛选具体采用液相细胞密度测量，光密度通过在分光光度计中在500nm～700nm处的浊度测量来确定。
9、进一步的，s1中，所述鉴定具体包括以下步骤：
10、s1.1、通过将琼脂平板上接种的微生物进行培养并生长过夜，然后通过离心，并用生理盐水洗涤三次，得到初步溶液；
11、s1.2、将初步溶液再次悬浮在盐水中，均化，得到储备溶液；
12、s1.3、从储备溶液中制备不同体积的稀释液；通过0.45μm滤纸过滤已知体积的这些溶液，并估计干燥细胞的重量；得到过滤液；
13、s1.4、使用uv-vis分光光度计在600nm处测量相应过滤液的吸光度，并制备出干细胞重量和吸光度之间的校准曲线；
14、s1.5、根据实验结果，选择铜绿假单胞菌、芽孢杆菌和柱状金杆菌进行富集研究。
15、进一步的，s2中，所述初步富集通过将混合微生物群落在28～32℃有氧条件下培养并生长过夜；当培养基光密度在0.1～0.2之间时收获；收集到的细胞悬浮液以8000rpm离心8～12分钟，用新鲜培养基洗涤三次，再次悬浮在新鲜培养基中；所述最低盐培养基在使用前在121℃～150℃下高压灭菌15～20分钟。
16、进一步的，所述最低盐培养基的组成按质量份计，包括以下组分：
17、
18、所述最低盐培养基的的ph值为7～7.3。
19、进一步的，s3中，所述二次富集具体为：将初步富集的生物质连续转移到以不同浓度乙醇废水作为碳源的新鲜最低盐培养基中，并进一步富集两个月。
20、进一步的，s3中，所述驯化具体包括以下步骤：
21、s3.1、将各的目标溶剂加载到覆盖有聚四氟乙烯隔膜的锥形烧瓶中；
22、s3.2、使用磁力搅拌器确保温和混合，以在微生物和基质之间建立接触；
23、s3.3、当生物质用相同浓度的乙醇溶液驯化，便将浓度逐渐增加。
24、本专利技术的有益效果是：
25、本专利技术选取好氧细菌微生物群(铜绿假单胞菌、甲基对硫磷降解菌、芽孢杆菌、林丹降解菌和柱状金杆菌)对乙醇废水进行降解，使之转变为对环境无污染的二氧化碳和水，使用的原料来源广泛，价格低廉，工艺简单操作方便。
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1.一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：S1中，所述微生物的鉴定与筛选，通过在琼脂平板上重复划线从混合培养物中分离细菌菌株；分离物根据其形态进行分离；仔细分离每个菌落，并在新鲜琼脂板上划线，重复三次；此后，将培养物在琼脂斜面上划线，并在3℃～5℃下进行培养。
3.根据权利要求2所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：所述混合培养物中分离细菌菌株具体为铜绿假单胞菌、甲基对硫磷降解菌、芽孢杆菌、林丹降解菌和柱状金杆菌。
4.根据权利要求1所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：S1中，所述筛选具体采用液相细胞密度测量，光密度通过在分光光度计中在500nm～700nm处的浊度测量来确定。
5.根据权利要求1所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：S1中，所述鉴定具体包括以下步骤：
6.根据权利要求1所述的一种
7.根据权利要求1所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：所述最低盐培养基的组成按质量份计，包括以下组分：
8.根据权利要求1所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：S3中，所述二次富集具体为：将初步富集的生物质连续转移到以不同浓度乙醇废水作为碳源的新鲜最低盐培养基中，并进一步富集两个月。
9.根据权利要求1所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：S3中，所述驯化具体包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：s1中，所述微生物的鉴定与筛选，通过在琼脂平板上重复划线从混合培养物中分离细菌菌株；分离物根据其形态进行分离；仔细分离每个菌落，并在新鲜琼脂板上划线，重复三次；此后，将培养物在琼脂斜面上划线，并在3℃～5℃下进行培养。
3.根据权利要求2所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：所述混合培养物中分离细菌菌株具体为铜绿假单胞菌、甲基对硫磷降解菌、芽孢杆菌、林丹降解菌和柱状金杆菌。
4.根据权利要求1所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：s1中，所述筛选具体采用液相细胞密度测量，光密度通过在分光光度计中在500nm～700nm处的浊度测量来确定。
5.根据权利要求1所述的一种处理水性油漆喷涂废气专性微生物的筛选与培养方法，其特征在于：s1中，所...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄建洪，李佳玥，田森林，宁平，史建武，李晨，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：
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