【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种羊肚菌在生物合成纳米银中的应用及利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，属于生物合成。
技术介绍
1、单质银的理化性质较为稳定，导热、导电性能很好，质软，富延展性，有许多重要用途。然而在自然界中相较于单质形式，绝大部分银是以化合态的形式存在于银矿石中。纳米银是粒径为纳米级别的金属银单质，其粒径小于100nm，一般在25-50nm内，有较大的比表面积、较强的渗透性，可以很容易地与细胞膜和细胞壁相互作用，随后穿透细胞。据统计，新型冠状病毒感染后出现大量合并感染以肺炎克雷伯杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌和真菌为主的病原微生物病例，俄罗斯出现细菌性炭疽病传播等。现有一般对抗病原微生物方法是服用抗生素，虽有明确治疗效果，但大多都具有耐药性，鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类和β-内酰胺类复合物耐药率高于全国细菌耐药平均水平。并且，抗生素的研发速度远远赶不上病原微生物的变异速度。纳米银具有一定的抑制与杀灭细菌、真菌、霉菌、孢子等病原微生物的作用，抗菌谱较宽，且不易产生耐药性，其原理为：银离子接触微生物后，造成某些成分破坏或产生功能障碍。当微量的银离子到达微生物细胞膜时，带负电荷的细胞膜与带正电的银离子依靠库仑引力而牢固吸附，银离子穿透细胞壁进入胞内与sh基反应，使蛋白质凝固，破坏细胞正常生命活动所需酶的活性，使其丧失分裂增殖能力、电子传输系统、呼吸系统和物质传输系统而死亡，特别是抑制呼吸酶在细胞内产生活性氧(ros)(ho，o，oh)来增加氧化应激。过量的ros水平会损害蛋白质和dna，产生诱导细胞凋亡与细胞坏死途径的刺激。因此，纳米银制具有成抗
2、纳米银的合成主要分为物理、化学和生物合成法。物理合成法制备纳米银颗粒是指通过机械粉碎与激光蚀刻法(为主)、蒸发冷凝法等方法将银单质原料粉碎得到纳米粒子，但由于缺少稳定剂，物理合成法易造成纳米银的团聚，近些年利用此方法合成纳米银的研究较少。化学合成法一般都是以硝酸银为原料，加入还原剂和稳定剂，发生氧化还原反应合成纳米银，一般化学合成法都是以柠檬酸钠、硼氢化钠等还原性物质作为还原剂，李原婷，赵静，刘保鹏等(cn116589743a，2023-08-15)研发一种聚多巴胺/纳米银/石墨烯复合气凝胶的制备方法：将agno-3、柠檬酸三钠、去离子水混合得到银胶溶液，将银胶溶液离心后弃上清，得到银纳米颗粒。设备工艺简单、生产率高、能工业化生产，但较于生物法而言，基于弱酸环境中银纳米颗粒凝胶的制备，对于环境有些许污染。乙醇水溶液洗脱，洗涤至少3次，每次洗涤时间为1～3h，洗涤时间较长。冷冻的温度为-40℃～-20℃，冷冻时间5-10h。要求较高，反应时间较长，步骤较为繁琐。使用大量化学试剂使得纳米银制备成本较高，另一方面制得纳米银中残留有大量的化学试剂，可能会对人体健康产生影响，因此化学方法制备纳米银严重制约纳米银在医药领域的应用，并且存在易污染环境的弊端。近年来，利用生物合成法合成纳米银备受关注，生物方法通常依赖于细菌、真菌以及植物提取物中的胞外多糖、纤维素、酶、酚类化合物等有机成分为原料合成纳米银，涉及无害溶剂和天然还原剂。相比于物理法和化学法合成，生物合成以其具有条件温和、微生物具有分布广、易培养、繁殖快等优点，作为天然的生物材料用于纳米银的胞内或胞外可控合成研究具有极大的潜力，既可作为还原剂又可作为稳定剂。魏思敏，王英辉，唐志书(cn116237531a，2023-06-09)研发了一种采用红花非药用部位制备纳米银材料的方法：将红花非药用部位经粉碎得到粉末后与水混合得到水提液，在紫外灯作用下与10mmol/l硝酸银水溶液辐射反应4h～4.5h，并分离得到沉淀物，洗涤、冻干后得到纳米银材料。在96孔板中每个孔中种植10000个细胞，过夜培养后细胞贴壁。此实验周期较长，步骤较为繁琐，红花培养所需占地面积更大，且对比本专利技术仅需1mmol/l硝酸银溶液的成本略高，红花杆的ss-ag nps与红花苞的sb-ag nps对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的mic值分别为12.5μg/m l和25.0μg/m l与50μg/m l和25μg/m l，本专利技术抑菌效果与之相比更好；截至目前，已有研究表明自然界中多种微生物都可以合成纳米银，如细菌、酵母和真菌等，都具有在细胞内或者细胞外合成纳米银的能力。黄胜威。(cn115838769a，2023-03-24)。通过利用芽孢杆菌bacillus.sp hz3进行高温培养(12-14h)-低温诱导培养(6-8h)-高温培养(4-6h)相结合的方法合成纳米银。反应条件温和，成本低廉，操作简便，硝酸银转化率较高可达87％，但其存在耗时较长、机器运行成本较高等弊端。相较细菌，真菌同时具有能产生大量肽类与多糖的能力，从而利于提高纳米银的合成速率和稳定性，并且具有较强的金属耐受力，更适宜推广。乔自鹏，代光明，王奇志(cn112159765a，2021-01-01)研究了一种胜红蓟内生真菌letendraeasp.wz07生物合成纳米银的方法，每100m l孵育反应体系加入1～3g真菌letendraea sp.wz07的湿菌丝体，在27～29℃、160～200rpm条件下，孵育22～26h获得菌液；将所述菌液与0.8～1.2mmo1/l agno3溶液按照体积比1:8～10的比例混合，室温避光反应合成粒径为8～56nm，形状为球形、五边形、三角形或六边形的纳米银。但是此方法合成纳米银均一性较差，形状差别亦较大。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种羊肚菌在生物合成纳米银中的应用，以及提供一种利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，该方法符合绿色发展原则，低成本、高效快速、无毒污染、绿色环保。
2、为达到上述目的，本专利技术的技术方案是：
3、羊肚菌在生物合成纳米银中的应用。具体地，羊肚菌为羊肚菌(morchellaesculenta(l.)pers.)沪羊007(六妹羊肚菌沪羊007)，为由上海农科院分离所得。该菌株接种在pda培养基中，接种后置于温度为23-27℃、全黑暗、相对湿度为55-70％的恒温培养箱中培养；6d后在光学显微镜下观察菌株的菌丝形态，菌丝粗壮，菌落前端均匀，初期菌丝白色，中后期开始变浅黄，后期颜色加深只棕色。菌落边缘薄，菌呈同心圆生长，菌丝有短茸毛和颗粒状两种类型(如图1所示)。在光学显微镜下观察，菌丝透明有隔，隔附近有分支(如图2所示)。无分生孢本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.羊肚菌在生物合成纳米银中的应用。
2.利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(1)中，所述活化培养基为PDA马铃薯固体培养基。
4.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(1)中，所述活化培养的温度为23-27℃。
5.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(1)中，活化培养2～4天。
6.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(2)中，所述PDA液体培养基为马铃薯液体培养基。
7.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(2)中，所述发酵培养温度为23-27℃。
8.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(2)中，所述发酵培养在震荡培养箱中进行，转速为150～180rpm。
9.根据权利要求1所述的利用羊肚菌
10.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(3)中，所述硝酸银溶液与无细胞滤液的体积比1：1～9，pH为碱性，温度为90℃的条件下反应。
...【技术特征摘要】
1.羊肚菌在生物合成纳米银中的应用。
2.利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(1)中，所述活化培养基为pda马铃薯固体培养基。
4.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(1)中，所述活化培养的温度为23-27℃。
5.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(1)中，活化培养2～4天。
6.根据权利要求1所述的利用羊肚菌生物合成纳米银的方法，其特征在于：在所述步骤(2)中，所述pda液体培养基为...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭凌媛，周淑琴，王欣，向志强，
申请(专利权)人：常熟理工学院，
类型：发明
国别省市：
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