一株具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法与应用技术

本发明专利技术公开了一株具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法与应用。该枯草芽孢杆菌工程菌株是通过将优化的mcyABCD基因和mcjABCD基因分别插入宿主枯草芽孢杆菌的Amye和SigF位点，获得的可同时生产微菌素Y和微菌素J25的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株；其中，优化的mcyABCD基因序列如SEQ ID NO.1所示，优化的mcjABCD基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术中的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株在正常生长(无诱导，无抗性)的情况下，对沙门氏菌等菌株具有抑菌作用，且在生长过程中不产生芽孢，具有生长可控性和菌株安全性，其应用前景好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物药剂和基因工程领域，特别涉及一株具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法与应用。

技术介绍

1、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)属于革兰氏阳性需氧细菌，在农业、医疗、食品生物技术以及重组蛋白生产方面得以广泛应用。它可以直接作为饲料添加剂进入动物体内，通过调节肠道菌群，进而提高动物生长性能，增强免疫力，被公认为是一种非致病性的食品级益生菌。相比大肠杆菌，枯草芽孢杆菌具有更好的发酵能力，在生产具有药理活性的重组蛋白方面存在多种优势，其生产的蛋白质可以分泌到培养基中，很容易以活性形式从培养基中纯化出来，且在工业发酵过程中不易被噬菌体感染。

2、mccy和mccj25均是由肠杆菌中发现的细菌素类抗菌小肽，mccy的生物合成需要四个基因参与，即mcyabcd，其中mcya编码mccy的线性氨基酸前体，mcyb、mcyc和mcyd编码翻译后修饰蛋白，转运蛋白以及分泌和自身免疫相关蛋白，其主要针对鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和婴儿沙门氏菌等血清型以及部分志贺氏菌和大肠杆菌。mccj25的生物合成也需要四个基因本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一株具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株，其特征在于：通过将优化的mcyABCD基因和mcjABCD基因分别插入宿主枯草芽孢杆菌的Amye和SigF位点，获得的可同时生产微菌素Y和微菌素J25的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株；其中，优化的mcyABCD基因序列如SEQ ID NO.1所示，优化的mcjABCD基因序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株，其特征在于：所述的宿主枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌WB800N菌株。

3.权利要求1或2所述的具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株的构建方法，其特征...

【技术特征摘要】

1.一株具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株，其特征在于：通过将优化的mcyabcd基因和mcjabcd基因分别插入宿主枯草芽孢杆菌的amye和sigf位点，获得的可同时生产微菌素y和微菌素j25的枯草芽孢杆菌wya25s工程菌株；其中，优化的mcyabcd基因序列如seq id no.1所示，优化的mcjabcd基因序列如seq id no.2所示。

2.根据权利要求1所述的具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株，其特征在于：所述的宿主枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌wb800n菌株。

3.权利要求1或2所述的具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的具有...

【专利技术属性】
技术研发人员：张广文，冯赛祥，廖明，江金飞，代绘琳，谢倩梅，许斯祺，林敏，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：