【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物，特别涉及gprc5d抗体及其应用。
技术介绍
1、g蛋白偶联受体(g protein-coupled receptors，gpcrs)家族是人体最庞大的膜蛋白家族，目前已发现有800多个成员，广泛参与体内生理活动的调控，影响机体视/嗅/味觉、行为及情绪反应、免疫系统调节等。gpcr具有保守的结构特征，由7个跨膜结构域分割为胞外n端，胞内c端，3个胞外环和3个胞内环。其配体结合域由n端和跨膜区段共同组成，g蛋白结合域由c端和胞内环组成。通过信号级联反应，gpcrs将胞外的生物信号转导至胞内下游最终靶标，最终实现对众多生理活动的调控(程建昕，唐赟.g蛋白偶联受体的结构与功能研究进展.生命科学.2015；27(4):445-452)。加之其在细胞表面有可成药靶点(胞外n端及胞外环)，使得gpcrs成为药物研发的重要靶点之一(alexanders.hauser,mistym.attwood,mathias rask-andersen,helgi b.&david e.gloriam.trends ingpcr drug discovery:new agents,targets and indications.naturereviews drugdiscovery，2017)。截至2021年，已经有近500种靶向gpcr的药物获得fda批准，占所有获批药物的33％。
2、多发性骨髓瘤(multiple myeloma，mm)是血液系统的第二大常见恶性肿瘤，为浆细胞肿瘤，表现为骨髓中浆细胞异常增殖，常伴随
3、mm的一种潜在靶标抗原是孤儿g蛋白偶联受体，c类5组d组成员(gprc5d)。gprc5d是人类g蛋白偶联受体的新亚型，与raig1、2、3(视黄酸诱导的基因1、2、3)共同组成了gprcs的c5亚家族。早期的工作发现gprc5d在两种组织表达：毛囊以及来自mm患者的骨髓。系统研究发现在肾脏，胰腺，小肠，脾脏和睾丸中发现了高和中等水平的gprc5d mrna表达，而在肺，结肠，前列腺，胸腺和白细胞中发现了低水平的表达(smith el,harrington k,etal.gprc5d is a target for the immunotherapy of multiple myeloma withrationally designed car t cells.sci transl med.2019,11(485))。同时在产生坚硬角蛋白的分化细胞也发现有gprc5d mrna的表达。mm患者骨髓中发现gprc5d高表达。mrna表达与骨髓浆细胞计数，b2-微球蛋白血浆水平，iss，细胞遗传学[缺失13q14和t(4；14)]和os的相关性将gprc5d确立为一种新的预后标志物。上皮细胞瘤过表达，组织低表达，t辅助细胞和ct表位的存在以及细胞膜的表达，显示gprc5d相比bcma具有更好的特异性。同时研究表明，gprc5d与mm明星靶标bcma互为独立表达，在即使发生了bcma逃逸的模型中，也能很好的清除肿瘤并延长存活期。综上所述，gprc5d是潜在的新型癌抗原，将成为mm治疗的下一个热门靶点。
4、以gprc5d为开发靶标的相关研究和企业布局较少。最为领先的是由强生开发的靶向gprc5d×cd3的双特异性t细胞衔接抗体(bite)talquetamab(jnj-64407564)，目前正处于ii期临床，其次是处于临床i期的由优瑞科和mskcc联合研发的gprc5d car-t。talquetamab的ii临床数据实现了69％的orr。根据其披露的临床前数据，talquetamab的gprc5d靶向端亲和力较弱，为该靶点抗体分子的开发提供了空间(kodandaram p,suzanneedavettal,mark mendonca,et al.at-cell-redirecting bispecific g-protein-coupled receptor class 5member d x cd3 antibody to treat multiplemyeloma.blood.2020apr 9；135(15):1232-1242)。
5、与其他gpcrs家族成员一致，gprc5d具有七个跨膜区段，并在细胞膜中表达。定位在染色体12p13.3上的gprc5d基因包含三个外显子，跨度约为9.6kb。gprc5d蛋白总长345个氨基酸，胞外n端占27个氨基酸，三个胞外环分别占9、22和15个氨基酸。胞外区过短导致gprc5d的免疫原性低，为使用过表达细胞进行免疫和筛选带来难度。
技术实现思路
1、鉴于以上所述现有技术的缺点，本申请的目的在于提供gprc5d抗体及其应用，用于解决现有技术中的问题。本专利技术采用gprc5d高表达细胞及gprc5d蛋白进行联合免疫，并在初筛阶段就对抗体与gprc5d在细胞水平的结合进行考察并作为筛选依据，筛选出特异性本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种GPRC5D抗体，所述GPRC5D抗体包括重链可变区与轻链可变区，所述重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示的VH-CDR1、氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示的VH-CDR2和氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示的VH-CDR3；和/或，所述轻链可变区的CDR包括氨基酸序列为SEQ ID NO：6或SEQ ID NO：11所示的VL-CDR1、氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示的VL-CDR2和氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示的VL-CDR3。
2.如权利要求1所述的GPRC5D抗体，其特征在于，所述重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列选自如下任一种：
3.如权利要求2所述的GPRC5D抗体，其特征在于，所述重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列选自如下任一种：
4.如权利要求3所述的GPRC5D抗体，其特征在于，所述GPRC5D抗体还包括重链恒定区和轻链恒定区，优先地，所述重链恒定区为人源IgG1重链恒定区，所述轻链恒定区为人源Kappa轻链恒定区，优选地，所述重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID N
5.如权利要求1所述的GPRC5D抗体，其特征在于，所述GPRC5D抗体为人源化抗体、鼠源化抗体或嵌合抗体；和/或，所述抗体为IgG抗体。
6.一种核苷酸分子，编码如权利要求1～5任一项所述的GPRC5D抗体。
7.一种表达载体，含有如权利要求6所述的核苷酸分子。
8.一种宿主细胞，含有如权利要求7所述的表达载体或基因组中整合有如权利要求6所述的核苷酸分子。
9.一种制备权利要求1-5任一项所述GPRC5D抗体的方法，其包括，在允许所述抗体表达的条件下，培养权利要求8所述的宿主细胞，和从培养的宿主细胞培养物中回收所述抗体。
10.一种药物组合物，含有权利要求1-5任一项所述的GPRC5D抗体，以及药学上可接受的载体和/或赋形剂。
11.一种试剂盒，含有权利要求1-5任一项所述的GPRC5D抗体。
12.如权利要求1～5任一项所述的GPRC5D抗体、或如权利要求6所述的核苷酸分子、或如权利要求7所述的表达载体、或如权利要求8所述的宿主细胞、或如权利要求10所述的药物组合物，在制备具备至少以下一种功效的产品中的用途：
13.如权利要求12所述的用途，其特征在于，包括以下情况的至少一种：
...【技术特征摘要】
1.一种gprc5d抗体，所述gprc5d抗体包括重链可变区与轻链可变区，所述重链可变区的cdr包括氨基酸序列如seq id no：3所示的vh-cdr1、氨基酸序列如seq id no：4所示的vh-cdr2和氨基酸序列如seq id no：5所示的vh-cdr3；和/或，所述轻链可变区的cdr包括氨基酸序列为seq id no：6或seq id no：11所示的vl-cdr1、氨基酸序列如seq id no：7所示的vl-cdr2和氨基酸序列如seq id no：8所示的vl-cdr3。
2.如权利要求1所述的gprc5d抗体，其特征在于，所述重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列选自如下任一种：
3.如权利要求2所述的gprc5d抗体，其特征在于，所述重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列选自如下任一种：
4.如权利要求3所述的gprc5d抗体，其特征在于，所述gprc5d抗体还包括重链恒定区和轻链恒定区，优先地，所述重链恒定区为人源igg1重链恒定区，所述轻链恒定区为人源kappa轻链恒定区，优选地，所述重链恒定区的氨基酸序列如seq id no：12所示，所述轻链恒定区的氨基酸序列如seq id no：13所示。
5.如...
【专利技术属性】
技术研发人员：金理娜，张红艳，景庆庆，陈亚莉，万婷婷，郭晓月，许杰，
申请(专利权)人：上海吉凯生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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