【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物化学，尤其涉及一种植物中γ-氨基丁酸的提取方法。
技术介绍
1、γ-氨基丁酸(gaba)是一种广泛存在于植物、动物及微生物的四碳非蛋白质氨基酸。gaba作为一种哺乳动物神经系统的神经递质，在维持心理健康方面发挥着重要作。临床研究表明，gaba具有降压、降脂、降血糖、抗癌、利尿、镇定等功能。gaba同时可以改善应激反应,减少高脂饮食肥胖的概率。由于gaba的功能多样性，而gaba产品如发芽糙米等种类较为单一，难以满足消费者需求。
2、gaba在植物中具有多种功效，可调节植物机体ph，促进代谢生长发育，提供三羧酸循环旁路的代谢产物，当植物体收到外界如热刺激、冷冻、盐胁迫、缺氧、浸泡和酸化等或植物激素作用时，植物体内gad酶激活而引起酶活力的增强，导致gaba富集。不同的植物中，gaba含量各不相同，为2-700nmol/g，通过植物提取gaba的工艺则需进一步优化。
技术实现思路
1、(一)专利技术目的
2、鉴于上述问题，针对植物中γ-氨基丁酸的提取工艺进行优化，本公开提供了以下技术方案。
3、(二)技术方案
4、一种植物中γ-氨基丁酸的提取方法，包括：
5、s1、将鲜红枣和/或鲜食用菌清洗晒干至水分低于60％；
6、s2、置于-10℃-20℃下冷处理8-16小时；
7、s3、在真空干燥箱中厌氧处理1-5小时；
8、s4、在空气环境下摊放0.5-2小时；
9、s5、
10、s6、烘干至水分低于5％；
11、s7、进行粉碎得植物粉，将植物粉置于水中进行超声，得植物提取液；
12、s8、采用阳离子交换树脂对所述植物提取液进行吸附，采用nh3·h2o溶液进行洗脱，得γ-氨基丁酸溶液。
13、作为一种可实施方式，所述超声的温度为50℃，超声的功率为220w，超声的时间为30min。
14、作为一种可实施方式，在所述采用阳离子交换树脂对所述植物提取液进行吸附前，包括对阳离子交换树脂进行预处理，包括：将阳离子交换树脂加入95％乙醇浸泡24h，用水洗至无絮状物且无乙醇味，然后用4％ naoh浸泡5h，用水洗至中性，再用5％ hcl浸泡8h，用水洗至中性，备用。
15、作为一种可实施方式，所述采用阳离子交换树脂对所述植物提取液进行吸附中，所述植物提取液的上样流速为3±0.5ml/min。
16、作为一种可实施方式，所述nh3·h2o溶液的ph为9，洗脱流速为2ml/min。
17、作为一种可实施方式，还包括采用异硫氰酸苯酯柱前衍生hplc法对所述γ-氨基丁酸溶液进行检测；其中异硫氰酸苯酯柱前衍生hplc法的色谱柱为welchxb-c18，流动相a为含0.5％三乙胺的0.1mol/l乙酸钠水溶液，流动相b为甲醇；流速为0.7ml/min，柱温30℃，检测波长为252nm，洗脱程序为梯度洗脱。
18、作为一种可实施方式，所述洗脱程序为：
19、0-14min，40％-60％流动相a；15-16min，60-100％流动相a；17-19min，100％流动相a；20-21min，100-40％流动相a；22-30min，40％流动相a。
20、作为一种可实施方式，所述异硫氰酸苯酯柱衍生hplc法中衍生反应包括：移取所述植物提取液至试管中，加入三乙胺-乙腈溶液和异硫氰酸苯酯-乙腈溶液，避光静止30min后加入正己烷混匀后静置再除去上层正己烷，再加入正己烷混匀后静置再除去上层正己烷，取下层溶液过滤得检测液，所述植物提取液、三乙胺-乙腈溶液、异硫氰酸苯酯-乙腈溶液和正己烷的加入体积比为1:1：0.5:4。
21、作为一种可实施方式，还包括在所述进行粉碎得植物粉，将植物粉置于水中进行超声后，过滤得植物渣，对所述植物渣进行蛋白质提取；所述对所述植物渣进行蛋白质提取包括：将所述植物渣干燥后粉碎、过筛，以植物渣：0.13mol/l naoh为1:24ml/g混合，在-18℃下冷冻处理1-3h后融化，重复冷冻和融化过程1-3次后进行超声浸提，离心后上清液为蛋白质提取液。
22、作为一种可实施方式，所述超声浸提温度为60℃-70℃，功率为220w，时间为40-60min。
23、(三)有益效果
24、本公开实施例与现有技术相比存在的有益效果是：本专利技术方法通过采用多种植物进行γ-氨基丁酸提取，且保证提取效率；冷冻处理也使得鲜红枣和/或鲜食用菌中gaba浓度有显著提高；并提供γ-氨基丁酸的检测方法，检测快速且无干扰。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，所述超声的温度为50℃，超声的功率为220W，超声的时间为30min。
3.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，在所述采用阳离子交换树脂对所述植物提取液进行吸附前，包括对阳离子交换树脂进行预处理，包括：将阳离子交换树脂加入95％乙醇浸泡24h，用水洗至无絮状物且无乙醇味，然后用4％NaOH浸泡5h，用水洗至中性，再用5％HCl浸泡8h，用水洗至中性，备用。
4.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，所述采用阳离子交换树脂对所述植物提取液进行吸附中，所述植物提取液的上样流速为3±0.5ml/min。
5.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，所述NH3·H2O溶液的pH为9，洗脱流速为2ml/min。
6.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，还包括采用异硫氰酸苯酯柱前衍生HPLC法对所述γ-氨基丁酸溶液
7.根据权利要求6所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，所述洗脱程序为：
8.根据权利要求6所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，所述异硫氰酸苯酯柱衍生HPLC法中衍生反应包括：移取所述植物提取液至试管中，加入三乙胺-乙腈溶液和异硫氰酸苯酯-乙腈溶液，避光静止30min后加入正己烷混匀后静置再除去上层正己烷，再加入正己烷混匀后静置再除去上层正己烷，取下层溶液过滤得检测液，所述植物提取液、三乙胺-乙腈溶液、异硫氰酸苯酯-乙腈溶液和正己烷的加入体积比为1:1：0.5:4。
9.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，还包括在所述进行粉碎得植物粉，将植物粉置于水中进行超声后，过滤得植物渣，对所述植物渣进行蛋白质提取；所述对所述植物渣进行蛋白质提取包括：将所述植物渣干燥后粉碎、过筛，以植物渣：0.13mol/L NaOH为1:24mL/g混合，在-18℃下冷冻处理1-3h后融化，重复冷冻和融化过程1-3次后进行超声浸提，离心后上清液为蛋白质提取液。
10.根据权利要求9所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，所述超声浸提温度为60℃-70℃，功率为220W，时间为40-60min。
...【技术特征摘要】
1.一种植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，所述超声的温度为50℃，超声的功率为220w，超声的时间为30min。
3.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，在所述采用阳离子交换树脂对所述植物提取液进行吸附前，包括对阳离子交换树脂进行预处理，包括：将阳离子交换树脂加入95％乙醇浸泡24h，用水洗至无絮状物且无乙醇味，然后用4％naoh浸泡5h，用水洗至中性，再用5％hcl浸泡8h，用水洗至中性，备用。
4.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，所述采用阳离子交换树脂对所述植物提取液进行吸附中，所述植物提取液的上样流速为3±0.5ml/min。
5.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，所述nh3·h2o溶液的ph为9，洗脱流速为2ml/min。
6.根据权利要求1所述的植物中γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于，还包括采用异硫氰酸苯酯柱前衍生hplc法对所述γ-氨基丁酸溶液进行检测；其中异硫氰酸苯酯柱前衍生hplc法的色谱柱为welch xb-c18，流动相a为含0.5％三乙胺的0.1mol/l乙酸钠水溶液，流动相b为甲醇；流速为0....
【专利技术属性】
技术研发人员：冯亚楠，贾成林，赵鹏，于文达，郭金，孟鹏，王玉彬，何江汇，
申请(专利权)人：信联电子材料科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。