【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于发酵培养基，具体涉及到一种毕赤酵母半基础培养基的制备方法及其应用。
技术介绍
1、k.phaffi.gs115是一种甲基营养型微生物，现有的基础培养基mdh可以用来筛选野生型毕赤酵母，然而博来霉素抗生素(zeocin)在mdh培养基会失效。因此，专利技术一种基于zeocin抗生素筛选的mdh培养基是有必要的，对于毕赤酵母的基础研究有着重要的科研意义。
技术实现思路
1、本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。
2、鉴于上述和/或现有技术中存在的问题，提出了本专利技术。
3、因此，本专利技术的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种毕赤酵母半基础培养基的制备方法。
4、为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其包括如下步骤，
5、准备ynb、甘氨酸、葡萄糖、组氨酸、琼脂、抗生素；
6、将上述原料充分溶解后混合，根据是否具有琼脂分别制得smdhgz固体培养基即毕赤酵母半基础培养基，将原料充分溶解后混合制得培养基；
7、所述smdhgz固体培养基中，按照体积计，10*ynb：100*甘氨酸：10*葡萄糖：100*h：无菌水＝0.5～1:0.1:2:0.1:16.8
8、作为本专利技术所述毕赤酵母半基础培养基的制备方法的一种优选方案，其中：所述10*ynb，其制备方法为称取1.7gynb溶于100ml无菌水中，充分溶解后用0.22μm的滤膜将其分别过滤至灭菌广口瓶中备用；所述100*甘氨酸，其制备方法为称取0.4g l-组氨酸溶于100ml无菌水中，充分溶解后用0.22μm的滤膜将其分别过滤至灭菌广口瓶中备用；所述10*葡萄糖，其制备方法为称取20g葡萄糖溶于100ml无菌水中置于广口瓶中，进行高温高压灭菌制得；所述100*h，其制备方法为称取0.4g l-组氨酸溶于100ml无菌水中，充分溶解后用0.22μm的滤膜将其分别过滤至灭菌广口瓶中备用。
9、作为本专利技术所述毕赤酵母半基础培养基的制备方法的一种优选方案，其中：按照体积计，100*甘氨酸：10*葡萄糖：100*h：无菌水＝0.5～1:0.1:2:0.1:16.8～17.3。
10、作为本专利技术所述毕赤酵母半基础培养基的制备方法的一种优选方案，其中：10*ynb的使用量为总体积的2.5～5％。
11、本专利技术的另一个目的是提供一种毕赤酵母半基础培养基的应用。
12、为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种毕赤酵母半基础培养基的应用，其包括：将菌株置于培养基中培养，根据是否生长判断其是否含有相应抗生素的基因。
13、作为本专利技术所述毕赤酵母半基础培养基的应用的一种优选方案，其特征在于：抗生素为zeocin抗生素。
14、作为本专利技术所述毕赤酵母半基础培养基的应用的一种优选方案，其特征在于：抗生素基因位于质粒上，所述质粒位于菌株内，为菌株保留、遗传和表达
15、本专利技术有益效果：
16、本专利技术基于zeocin抗生素在mdh培养基中无法筛选阳性单克隆菌株的问题，对mdh培养基进行改良，改良的mdh培养基重新命名为半基础培养基(semi-mdhg，简称smdhg)，目前来说还没有对这一培养基的研究和说明。
17、smdhg培养基中添加的zeocin抗生素浓度为1000：1，即在1ml smdhg培养基中添加1μlzeocin抗生素(母液浓度为100mg/ml)，培养基smdhgz可以用来筛选含有zeocin抗生素质粒的k.phaffii.gs115菌株。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：包括如下步骤，
2.根据权利要求1所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：所述10*YNB，其制备方法为称取1.7gYNB溶于100mL无菌水中，充分溶解后用0.22μm的滤膜将其分别过滤至灭菌广口瓶中备用；
3.根据权利要求1所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：按照体积计，100*甘氨酸：10*葡萄糖：100*H：无菌水＝0.5～1:0.1:2:0.1:16.8～17.3。
4.根据权利要求1所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：所述10*YNB的使用量为总体积的2.5～5％。
5.根据权利要求1或4所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：所述10*YNB的使用量为总体积的5％。
6.根据权利要求1所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：所述抗生素的使用量为总体积的0.1～0.25％。
7.根据权利要求1或6所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：所述抗生素的使用量为总体积的0.1％。>
8.一种毕赤酵母半基础培养基的应用，其特征在于：将菌株置于培养基中培养，根据是否生长判断其是否含有相应抗生素的基因。
9.根据权利要求8所述的毕赤酵母半基础培养基的应用，其特征在于：所述抗生素为Zeocin抗生素。
10.根据权利要求8所述的毕赤酵母半基础培养基的应用，其特征在于：所述抗生素基因位于质粒上，所述质粒位于菌株内，为菌株保留、遗传和表达。
...【技术特征摘要】
1.一种毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：包括如下步骤，
2.根据权利要求1所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：所述10*ynb，其制备方法为称取1.7gynb溶于100ml无菌水中，充分溶解后用0.22μm的滤膜将其分别过滤至灭菌广口瓶中备用；
3.根据权利要求1所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：按照体积计，100*甘氨酸：10*葡萄糖：100*h：无菌水＝0.5～1:0.1:2:0.1:16.8～17.3。
4.根据权利要求1所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在于：所述10*ynb的使用量为总体积的2.5～5％。
5.根据权利要求1或4所述的毕赤酵母半基础培养基的制备方法，其特征在...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。