【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及茶树氮缺乏检测方法领域，具体讲的是cscepd1.1和cscepd1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用。
技术介绍
1、氮是茶树生长发育以及茶叶品质形成过程中的重要营养元素，不仅参与了多糖、蛋白质、核酸等重要生命物质的构成，还影响游离氨基酸、咖啡碱、多酚类物质和嘌呤类的生物碱等物质在茶树体内的代谢。然而，茶树的生长受到每年多次采收、时间、气候和土壤类型等外界因素的影响，同时茶树自身的生长也存在节律性，这导致土壤中的氮元素分布不均，无法满足茶树的需求。为了满足茶树对氮元素的需求，茶树进化出了相应的机制，通过调节氮吸收转运与分配以满足其生长发育的需求。当植物根系感受到低氮胁迫时，会产生响应低氮胁迫的可移动小肽激素(c-terminally encoded peptide,cep)，并通过木质部装载，以根源性上行信号的形式传递到地上部，被富含亮氨酸的重复受体激酶cep受体(cepr 1)感知，并诱导cep downstream 1(cepd1)和cepd2在叶片的维管组织中上调表达。cep downstream-like2(cepdl2)是cepd1的同源基因，其表达水平受植株叶片氮水平影响。因此，植物叶片中cepd的转录水平表达量高低可以作为植株是否受低氮胁迫的重要检测指标。在本专利技术中，从茶树基因组中克隆了基因cscepd1.1和cscepd1.2，将其转录水平作为茶树中氮缺乏的指示信号，可实时反映茶树叶片的氮营养情况，操作简单方便，在农业实际生产中具有重要的应用前景。
技术实现思路<
1、本专利技术要解决的技术问题是cscepd1.1和cscepd1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用。本专利技术采用以下技术方案：
2、cscepd1.1和cscepd1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用，cscepd1.1基因，其核苷酸序列为下列a)或b)或c)：
3、a.具有如seq id no.1所示的核苷酸序列；
4、b.编码序列包括seq id no.1；
5、c.与a)或b)限定的核苷酸序列具有70％以上相似性，且感应到氮胁迫后在茶树幼嫩叶中上调表达的同源性的核苷酸序列；
6、茶树cscepd1.2基因，其核苷酸序列为下列a)或b)或c)：
7、a.具有如seq id no.2所示的核苷酸序列；
8、b.编码序列包括seq id no.2；
9、c.与a)或b)限定的核苷酸序列具有70％以上相似性，且感应到氮胁迫后在茶树幼嫩叶中上调表达的同源性的核苷酸序列。
10、进一步的，具体应用方法包括以下步骤：
11、步骤1、检测氮供应充足情况下茶树cscepd1.1或cscepd1.2基因表达量并进行记录；
12、步骤2、在茶树正常生长过程中检测cscepd1.1或cscepd1.2基因表达量，与步骤1中氮供应充足情况下对应基因的表达量进行比对，若基因表达量按单因素方差方法判断为显著上调，则判断茶树处于氮缺乏状态。
13、进一步的，所供应的氮形态为铵态氮(nh4+-n)和硝态氮(no3--n)混合态氮。
14、进一步的，茶树cscepd1.1基因的检测引物对序列如seq id no.5和seq id no.6所示。
15、进一步的，茶树cscepd1.2基因的检测引物对序列如seq id no.7和seq id no.8所示。
16、本专利技术采用以上技术方案后，与现有技术相比，具有以下优点：
17、本专利技术提供了茶树叶片中响应低氮的基因，可以实时检测茶树叶片的氮营养状态，方法简单快捷，在农业生产中具有重要潜在应用价值。本专利技术是以茶树幼嫩叶片中cscepd1.1和cscepd1.2基因转录水平作为茶树氮营养丰缺的指示信号，通过直接检测茶树叶片中cscepd1.1和cscepd1.2基因的转录水平表达，可实时检测茶树的氮营养丰缺情况。相较于目前存在的方法，其操作便捷快速，可大幅降低诊断成本。本专利技术直接检测茶树叶片中受氮信号调控的cscepd1.1和cscepd1.2基因的转录水平，避免了茶树品种、季节和茶园栽培措施等其他因素的干扰，确保了结果的精确性，同时具有推广应用的普适性。
18、下面结合附图和实例对本专利技术进行详细说明。
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1.CsCEPD1.1和CsCEPD1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用，其特征在于，CsCEPD1.1基因，其核苷酸序列为下列A)或B)或C)：
2.根据权利要求1所述CsCEPD1.1和CsCEPD1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用，其特征在于，具体应用方法包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述CsCEPD1.1和CsCEPD1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用，其特征在于，所供应的氮形态为铵态氮和硝态氮混合态氮。
4.根据权利要求2所述CsCEPD1.1和CsCEPD1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用，其特征在于，茶树CsCEPD1.1基因的检测引物对序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
5.根据权利要求2所述CsCEPD1.1和CsCEPD1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用，其特征在于，茶树CsCEPD1.2基因的检测引物对序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示。
【技术特征摘要】
1.cscepd1.1和cscepd1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用，其特征在于，cscepd1.1基因，其核苷酸序列为下列a)或b)或c)：
2.根据权利要求1所述cscepd1.1和cscepd1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用，其特征在于，具体应用方法包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述cscepd1.1和cscepd1.2基因在茶树氮养分丰缺检测中的应用，其特征在于，所供应的氮形态为铵态氮和硝态氮...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵华，刘珈彤，赵菡阳，史鹏云，张朦晓，赖锦妮，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：
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