System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种内切木聚糖酶AacXyn10A及其应用制造技术_技高网

一种内切木聚糖酶AacXyn10A及其应用制造技术

技术编号:40299480 阅读:6 留言:0更新日期:2024-02-07 20:47
本发明专利技术公开了一种内切木聚糖酶AacXyn10A及其应用,所述内切木聚糖酶AacXyn10A的编码序列来源于棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus),所述内切木聚糖酶AacXyn10A的编码序列Genbank登录号为XP_020051463.1。本发明专利技术的内切木聚糖酶AacXyn10A在在pH 4.5‑8.0和30℃‑70℃的范围内维持较高的酶活性,在生物质转化等领域具有一定的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程,特别是涉及一种内切木聚糖酶aacxyn10a及其应用。


技术介绍

1、木质纤维素生物质是世界上最为丰富的可利用农业残渣,包括稻壳、甘蔗渣、玉米芯、烟草秸秆和小麦秸秆等等。将其生产成木聚糖等附加产品有助于可持续的经济发展。木聚糖本身不仅是许多工业生产中的重要原料,大多应用于能源、造纸和纺织领域中。gh10家族蛋白为专一性的β-1,4-内切木聚糖酶,催化降解木聚糖主链,生成木寡糖产物,是木聚糖降解的主要酶类。

2、该种酶在包括食品、造纸、饲料以及生物质转化等行业中应用广泛,但各行业中的使用环境对内切木聚糖酶性质的要求有所差异,但是现有的内切木聚糖对温度和ph较为敏感,亟需构建一种可适用于多场景不同环境的内切木聚糖酶。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是针对现有内切木聚糖酶对温度和ph较为敏感,而提供一种内切木聚糖酶aacxyn10a。

2、本专利技术的另一目的,提供一种所述内切木聚糖酶aacxyn10a的制备方法。

3、本专利技术的另一目的,提供一种所述内切木聚糖酶aacxyn10a的应用。

4、为实现本专利技术的目的所采用的技术方案是:

5、一种内切木聚糖酶aacxyn10a,所述内切木聚糖酶aacxyn10a的编码序列来源于棘孢曲霉(aspergillus aculeatus),所述内切木聚糖酶aacxyn10a的氨基酸序列如seq.idno 1所示。

6、在上述技术方案中,所述内切木聚糖酶aacxyn10a在ph 4.5-8.0具有85%以上的相对酶活性。

7、在上述技术方案中,所述内切木聚糖酶aacxyn10a在30℃-70℃具有60%以上的相对酶活性。

8、在上述技术方案中,所述内切木聚糖酶aacxyn10a通过以下方法制备:

9、步骤1,构建表达所述内切木聚糖酶aacxyn10a的重组载体;

10、步骤2,将步骤1构建得到的重组载体转入宿主细胞,得到重组菌株;

11、步骤3,将步骤2得到的所述重组菌株通过摇瓶培养进行内切木聚糖酶aacxyn10a的诱导表达,得到培养液,收集培养液上清,得到内切木聚糖酶aacxyn10a。

12、在上述技术方案中,所述步骤3中的培养液上清依次经过盐析、透析和浓缩得到所述内切木聚糖酶aacxyn10a。

13、在上述技术方案中,所述内切木聚糖酶aacxyn10a的编码序列genbank登录号为xp_020051463.1。

14、本专利技术的另一方面,提供一种所述的内切木聚糖酶aacxyn10a的制备方法,包括以下步骤:

15、步骤s1,构建表达所述内切木聚糖酶aacxyn10a的重组载体;

16、步骤s2,将步骤1构建得到的重组载体转入宿主细胞,得到重组菌株,优选的,所述宿主细胞为毕赤酵母;

17、步骤s3,将步骤2得到的所述重组菌株通过摇瓶培养进行内切木聚糖酶aacxyn10a的诱导表达,得到培养液,收集培养液上清,得到内切木聚糖酶aacxyn10a,优选的,培养液上清依次经过盐析、透析和浓缩得到所述内切木聚糖酶aacxyn10a。

18、本专利技术的另一方面,提供一种用于生产所述的内切木聚糖酶aacxyn10a的重组毕赤酵母,所述重组毕赤酵母保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮政编码:100101),保藏号:cgmccno.26940,保藏日期:2023年3月28日。

19、本专利技术的另一方面,提供一种酶制剂,包括所述的内切木聚糖酶aacxyn10a。

20、在上述技术方案中,所述酶制剂用于木聚糖降解处理。

21、与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:

22、1.本专利技术的内切木聚糖酶aacxyn10a在在ph 4.5-8.0和30℃-70℃的范围内维持较高的酶活性,在生物质转化等领域具有一定的应用前景。

23、2.本专利技术将棘孢曲霉aspergillus aculeatus atcc 16872来源的内切木聚糖酶基因转入毕赤酵母gs115中,建立了通过在宿主菌中分泌表达制备该酶的方法。构建了可以高效分泌表达内切木聚糖酶aacxyn10a的甲醇诱导型毕赤酵母重组菌株,使该酶的生产具有操作简单、周期短的优点。

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【技术保护点】

1.一种内切木聚糖酶AacXyn10A,其特征在于,所述内切木聚糖酶AacXyn10A的编码序列来源于棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus),所述内切木聚糖酶AacXyn10A的氨基酸序列如Seq.ID No 1所示。

2.如权利要求1所述的内切木聚糖酶AacXyn10A,其特征在于,所述内切木聚糖酶AacXyn10A在pH 4.5-8.0具有89%以上的相对酶活性。

3.如权利要求1所述的内切木聚糖酶AacXyn10A,其特征在于,所述内切木聚糖酶AacXyn10A在30℃-70℃具有60%以上的相对酶活性。

4.如权利要求1所述的内切木聚糖酶AacXyn10A,其特征在于,所述内切木聚糖酶AacXyn10A通过以下方法制备:

5.如权利要求4所述的内切木聚糖酶AacXyn10A,其特征在于,所述步骤3中的培养液上清依次经过盐析、透析和浓缩得到所述内切木聚糖酶AacXyn10A。

6.如权利要求1所述的内切木聚糖酶AacXyn10A,其特征在于,所述内切木聚糖酶AacXyn10A的编码序列Genbank登录号为XP_020051463.1。

7.一种如权利要求1-6任意一项所述的内切木聚糖酶AacXyn10A的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

8.一种用于生产权利要求1-6任意一项所述的内切木聚糖酶AacXyn10A的重组毕赤酵母,所述重组毕赤酵母保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.26940,保藏日期:2023年3月28日。

9.一种酶制剂,其特征在于,包括权利要求1-6任意一项所述的内切木聚糖酶AacXyn10A。

10.如权利要求9所述的酶制剂,其特征在于,所述酶制剂用于木聚糖降解处理。

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【技术特征摘要】

1.一种内切木聚糖酶aacxyn10a,其特征在于,所述内切木聚糖酶aacxyn10a的编码序列来源于棘孢曲霉(aspergillus aculeatus),所述内切木聚糖酶aacxyn10a的氨基酸序列如seq.id no 1所示。

2.如权利要求1所述的内切木聚糖酶aacxyn10a,其特征在于,所述内切木聚糖酶aacxyn10a在ph 4.5-8.0具有89%以上的相对酶活性。

3.如权利要求1所述的内切木聚糖酶aacxyn10a,其特征在于,所述内切木聚糖酶aacxyn10a在30℃-70℃具有60%以上的相对酶活性。

4.如权利要求1所述的内切木聚糖酶aacxyn10a,其特征在于,所述内切木聚糖酶aacxyn10a通过以下方法制备:

5.如权利要求4所述的内切木聚糖酶aacxyn10a,其特征在于,所述步骤3中的培养...

【专利技术属性】
技术研发人员:李承张天元孙粉杏姜睿康薛怡芸李振
申请(专利权)人:苏州聚维元创生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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