【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，更具体的说是涉及一种稀有放线菌妮维雅拟无枝酸菌及其在防治烟草青枯病中的应用。
技术介绍
1、烟草青枯病(tobacco bacterial wilt)是由茄科劳尔氏菌(简称青枯菌， ralstoniasolanacearum)引起的一类土传植物病害，在我国主要烟区均普遍发生，由于青枯病的发生需要较高的温度和较多的降水，因此主要发生在南方各烟区，近年来随着异常气候的频繁出现和青枯菌的适应性变异，该病有向北方烟区扩展的趋势，如河南、山东、陕西及辽宁等省都有该病造成为害的报道。该病害在田间一般发病率在10％～30％，严重的达到50％以上，甚至绝收，因此该病害已经成为严重威胁烟草产量和质量的毁灭性病害。在自然界中，茄科劳尔氏菌宿主广泛，烟草、番茄、马铃薯等茄科经济作物都能被其侵染，一些变种还能侵染香蕉、桑树等其他非茄科作物，侵染方式主要是通过植物根部伤口、次生根或天然孔口侵入宿主体内；侵染过程中，茄科劳尔氏菌会定殖在烟草的木质部，并大量增殖，茄科劳尔氏菌产生的胞外多糖会堵塞寄主的维管束，导致营养供给运输受阻，烟株无法正常获取营养物质和水分保证地上部分的正常生长，宿主会表现出叶片萎蔫扩散至整株枯死的现象，同时伴随根部和茎部维管束逐渐变黑至腐烂变空的症状。
2、目前，针对烟草青枯病的防治措施主要包括化学药剂防治、抗性品种选育、作物轮作、土壤改良和生物防治等，在生产中，栽培抗病品种是最为简洁有效的繁殖方法，但是烟草的抗青枯病品种培育周期过长，且因为青枯菌生理小
3、生物防治是指利用有益微生物来抑制病原菌，降低病原菌的生命活力和繁殖能力，以此达到减轻作物病害的方法。生物防治植物病害的常见机制有：改善土壤理化性质促进植物生长，增强寄主植物的抗病能力；利用生防微生物对病原菌的拮抗作用或者寄生、捕食作用，及其与病原菌的营养物质、生态位的竞争效应抑制和消灭病原菌；诱导寄主植物产生对病原菌的系统抗性。
4、拟无枝酸菌( amycolatopsis)为诺卡菌型放线菌的一个独特属，是稀有放线菌，目前已发表的拟无枝酸菌有82种，它们中多数是从土壤和海洋沉积物中分离得到的。作为放线菌中的稀有属，关于拟无枝酸菌的应用，多集中于高产抗生素和降解化学物质等方面曾，经一度被认为是抗细菌、抗真菌或抗病毒药物的最有效来源，例如，王会会等人的专利（cn202211341535.6），确认了一种利用东方拟无枝酸菌产生万古霉素的方法；赵海兵等的专利(cn201710609367.7)，确认了利用地中海拟无枝酸菌发酵生产利福霉素的培养基和培养方法，到目前为止，拟无枝酸菌仍然有很大的药品研发潜力。
5、利用拟无枝酸菌产抗生素的研究已经有很多了，但直接利用拟无枝酸菌来进行生物防治，特别是防治细菌性病害的研究还非常少见，因此，探究利用拟无枝酸菌防治烟草青枯病，省略了大量培养拟无枝酸菌后提取代谢物的步骤，简化了生产流程，降低了生产成本，同时，施入土壤中的拟无枝酸菌还能长期的改变土壤微环境，将会拓宽拟无枝酸菌在农业生产方面的应用前景，具有重要的意义。
6、通过上述分析，现有技术的缺陷和尚未解决的问题为：现有的烟草青枯病防治方法中，抗病品种不能长时间稳定的取得良好的防病效果；大规模长时间轮作并无实施的条件；施用生石灰和化学农药会引起土壤板结、药物残留超标和病原菌产生抗药性等问题，不符合农业健康可持续发展要求。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种妮维雅拟无枝酸菌 amycolatopsisniveaypl-1及其在烟草青枯病防治中的应用。该菌株分离自烟草青枯病田中健康烟草的根际土，作为一株分离自健康烟草根际土的稀有放线菌，该菌株能很好的定殖在烟草根际，并且不会对烟草的生长产生负面影响，有着良好的应用前景。
2、本专利技术采用如下技术方案实现。
3、一种稀有放线菌，本专利技术所述菌株为稀有放线菌-妮维雅拟无枝酸菌 amycolatopsisniveaypl-1， 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2023年10月18日，保藏号为 cgmcc no.28656。
4、本专利技术上述稀有放线菌的应用，所述应用为，将稀有放线菌-妮维雅拟无枝酸菌 amycolatopsisniveaypl-1制备成生防菌剂，防治烟草青枯病。
5、本专利技术所述生防菌剂是由妮维雅拟无枝酸菌 amycolatopsisniveaypl-1发酵制成的水剂。
6、本专利技术所述水剂的制备方法包括以下步骤：
7、步骤1）种子液的制备：
8、在na液体培养基中接种妮维雅拟无枝酸菌 amycolatopsisniveaypl-1，温度28℃，180r/ min，培养2d后，得种子液；
9、步骤2）发酵培养：
10、将种子液接种于发酵培养基中，发酵培养基为na液体培养基；发酵条件为：在容量为1000ml的锥形瓶中装入500ml培养基；发酵培养基初始ph值7.0，28℃，180r/min，发酵时间3d，得妮维雅拟无枝酸菌 amycolatopsisniveaypl-1的发酵液，作为生防菌剂。
11、本专利技术所述步骤1）和步骤2）中的na液体培养基，其配方为：以重份数计包括：葡萄糖10份、蛋白胨5份，牛肉浸膏3份、酵母浸膏1份、蒸馏水1000份。
12、本专利技术所述步骤2）中，以体积比计，种子液：发酵培养基＝5:95。
13、本专利技术所述生物菌剂中妮维雅拟无枝酸菌 amycolatopsisniveaypl-1的发酵液的浓度为1×108cfu/ml。
本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种稀有放线菌，其特征在于，所述菌株为稀有放线菌-妮维雅拟无枝酸菌Amycolatopsis nivea YPL-1， 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2023年10月18日，保藏号为 CGMCC NO.28656。
2.权利要求1所述稀有放线菌的应用，其特征在于，所述应用为，将稀有放线菌-妮维雅拟无枝酸菌Amycolatopsis nivea YPL-1制备成生防菌剂，防治烟草青枯病。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述生防菌剂是由妮维雅拟无枝酸菌Amycolatopsis nivea YPL-1发酵制成的水剂。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述水剂的制备方法包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述步骤1）和步骤2）中的NA液体培养基，其配方为：以重份数计包括：
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述步骤2）中，以体积比计，种子液：发酵培养基＝5:95。
7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述生物菌剂中妮维雅拟无
8.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述防治烟草青枯病的使用方法为灌根。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述灌根方法具体为，每株灌根生防菌剂50ml，连续使用2~3次，每次间隔7~10d。
...【技术特征摘要】
1.一种稀有放线菌，其特征在于，所述菌株为稀有放线菌-妮维雅拟无枝酸菌amycolatopsis nivea ypl-1， 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2023年10月18日，保藏号为 cgmcc no.28656。
2.权利要求1所述稀有放线菌的应用，其特征在于，所述应用为，将稀有放线菌-妮维雅拟无枝酸菌amycolatopsis nivea ypl-1制备成生防菌剂，防治烟草青枯病。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述生防菌剂是由妮维雅拟无枝酸菌amycolatopsis nivea ypl-1发酵制成的水剂。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述水剂的制备方法...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨应伟，姬广海，王博文，王金星，秦庆宪，张毅，邱成尧，李炫，黄必永，施国涛，杨学红，陈春福，叶富云，何坤洋，王菊香，
申请(专利权)人：云南省烟草公司普洱市公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。