【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于鱼类病毒疫苗制备，具体涉及乌鳢水泡病毒传代致弱毒株shvv-p160-5fu及其应用。
技术介绍
1、乌鳢水泡病毒(snakehead vesiculovirus，shvv)是一株鱼类弹状病毒，其基因组编码5种结构蛋白：核蛋白(nucleoprotein，n)、磷蛋白(phosphoprotein，p)、基质蛋白(matrix protein，m)、糖蛋白(glycoprotein，g)和rna依赖的rna聚合酶蛋白(rna-dependent rna polymerase，l)。乌鳢水泡病毒感染乌鳢导致肝脏肿大、脾脏发黑等症状，对乌鳢造成较高的死亡率，目前针对该病毒病缺乏有效的防治措施。随着绿色健康养殖理念的推行，接种疫苗成为防治病毒性疾病的有效途径，因此研制shvv疫苗迫在眉睫。
2、减毒活疫苗因免疫周期长且能在体内增殖，成为渔用疫苗制备的重要研究方向。目前用于制备减毒活疫苗的方式主要是通过连续传代致弱和基因工程减毒，其中连续传代致弱是最经典的方法。连续传代致弱主要有体内连续传代、体外连续传代以及交叉连续传代3种方式。体外传代主要是在细胞上进行传代，相对于其他两种传代方式，细胞传代具有操作简单、高效率和低成本的优势。减毒活疫苗的表型取决于基因突变，现已报道的用于减毒活疫苗的弱毒株大多是经过细胞传代致弱获得，经过细胞上的连续传代，毒株会逐渐适应细胞并在适应过程中发生突变。例如，申请号为201910759551.9的专利技术专利就是将伪狂犬病毒在原代鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibr
技术实现思路
1、本专利技术一方面保护乌鳢水泡病毒传代致弱毒株shvv-p160-5fu，该毒株是将shvv在cco细胞上连续传代160代，在第101-160代的传代过程中，细胞培养基中添加诱变剂5-氟尿嘧啶(5fu)，shvv-p160-5fu株对乌鳢的致病性显著低于shvv-p1株，是具有较高安全性的疫苗候选株。乌鳢水泡病毒传代致弱毒株shvv-p160-5fu于2023年4月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no:v202330，分类命名snakehead vesiculovirusp160-5fu。
2、本专利技术另一方面保护乌鳢水泡病毒传代致弱毒株shvv-p160-5fu作为减毒活疫苗的应用，采用该毒株制备的疫苗接种乌鳢(105tcid50剂量)28天后能降低shvv在乌鳢组织中的增殖能力，可提供50％的免疫保护率。
3、与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：
4、1.乌鳢水泡病毒目前还没有疫苗方面的研究或产品，本专利技术首次开始该病毒的疫苗研究，将乌鳢水泡病毒在cco细胞上连续传代致弱，并在第101-160代的传代过程中添加诱变剂5fu，得到的shvv-p160-5fu株对乌鳢的致病性与shvv-p1相比显著减弱。
5、2.利用shvv-p160-5fu株制备的疫苗免疫乌鳢，能降低shvv在乌鳢组织中的增殖能力，可提供50％的免疫保护率，可应用于乌鳢养殖场对乌鳢水泡病毒病的预防，降低乌鳢水泡病毒病的发病率，提高乌鳢的存活率。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.乌鳢水泡病毒（Snakehead vesiculovirus, SHVV）传代致弱毒株SHVV-P160-5FU，其特征在于，其保藏编号为CCTCC NO:V202330。
2.一种乌鳢水泡病毒减毒活疫苗，其特征在于，其活性成分为权利要求1所述的乌鳢水泡病毒传代致弱毒株。
3.根据权利要求2所述的乌鳢水泡病毒减毒活疫苗，其特征在于，所述的疫苗中乌鳢水泡病毒传代致弱毒株SHVV-P160-5FU的剂量为105 TCID50/0.1ml。
4.权利要求1所述乌鳢水泡病毒传代致弱毒株SHVV-P160-5FU在制备乌鳢水泡病毒减毒活疫苗中的应用。
【技术特征摘要】
1.乌鳢水泡病毒（snakehead vesiculovirus, shvv）传代致弱毒株shvv-p160-5fu，其特征在于，其保藏编号为cctcc no:v202330。
2.一种乌鳢水泡病毒减毒活疫苗，其特征在于，其活性成分为权利要求1所述的乌鳢水泡病毒传代致弱毒株。
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