一种固定化葡萄糖异构酶及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种葡萄糖异构酶固定化方法，通过纤维素纯化和固定化葡萄糖异构酶。该固定化方法与传统酶固定化方法相比，可省略酶的纯化步骤，实现酶的纯化和固定化同时进行。该固定化葡萄糖异构酶具有超高温热稳定性，解决了现有耐高温酶在高温的热稳定性较差的技术难题。使用该固定化葡萄糖异构酶生产高果糖浆，固定化葡萄糖异构酶所生产的高果糖浆的转化率可达62.5％，能够满足直接生产HFCS‑55的要求。该固定化多酶在高温下连续使用60批次后底物转化率仍可达到59.4％，仍可维持95％以上的初始酶活性。该固定化葡萄糖异构酶具备在高温条件下直接生产HFCS‑55的工业化应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种葡萄糖异构酶的固定化方法，以及固定化葡萄糖异构酶在高温下异构化葡萄糖生产高果糖浆的应用。

技术介绍

0、技术背景

1、高果糖浆是一种由葡萄糖和果糖所组成的混合物，它是由葡萄糖异构酶异构作用，将一部分葡萄糖异构成果糖的。高果糖浆的甜度与蔗糖相当，风味纯正，营养丰富，具有协同增效、冷甜爽口、低热量、不致龋齿等特点。高果糖浆具有比葡萄糖、蔗糖更明显优越的保健与营养功效，目前被广泛地应用于饮料、食品、糖果、烘焙制品、水果罐头等食品加工中。

2、高果糖浆可分为三种类型：hfcs-42、hfcs-55、hfcs-90。其中，hfcs-55的甜度优于蔗糖，是市场上的主流产品。但是，根据目前国内的生产技术条件和成本要求，绝大部分生产企业只能先生产hfcs-42，再经色谱分离、浓缩得到hfcs-90。hfcs-90再与hfcs-42进行勾兑得到hfcs-55(moeller et al,journal of the american college of nutrition,28:619-626,2009)。p>

3、商业上本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种固定化葡萄糖异构酶，其特征在于采用纤维素固定化葡萄糖异构酶，优选地，采用纤维素固定化葡萄糖异构酶与CBM3融合蛋白。

2.如权利要求1所述的固定化葡萄糖异构酶，其特征在于，所述葡萄糖异构酶来源于Thermotoga maritima、Thermus thermophiles、Thermoanaerobacter ethanolicus、Thermus oshimai，和/或所述纤维素由微晶纤维素制备得到。

3.如权利要求1-2任一项所述固定化葡萄糖异构酶的制备方法，其特征在于采用纤维素固定化葡萄异构酶，优选地，采用纤维素固定化葡萄糖异构酶与CBM3融合蛋白...

【技术特征摘要】

1.一种固定化葡萄糖异构酶，其特征在于采用纤维素固定化葡萄糖异构酶，优选地，采用纤维素固定化葡萄糖异构酶与cbm3融合蛋白。

2.如权利要求1所述的固定化葡萄糖异构酶，其特征在于，所述葡萄糖异构酶来源于thermotoga maritima、thermus thermophiles、thermoanaerobacter ethanolicus、thermus oshimai，和/或所述纤维素由微晶纤维素制备得到。

3.如权利要求1-2任一项所述固定化葡萄糖异构酶的制备方法，其特征在于采用纤维素固定化葡萄异构酶，优选地，采用纤维素固定化葡萄糖异构酶与cbm3融合蛋白。

4.如权利要求3所述固定化葡萄糖异构酶的制备方法，其特征在于将含有葡萄糖异构酶-cbm3的菌体破碎后得到含有葡萄糖异构酶-cbm3的粗酶液，然后将纤维素与粗酶液混合，离心收集沉淀，得到固定化葡萄糖异构酶；优选地，所述混合在室温下进行，所述离心时间为10-30min，所述沉淀用缓冲液(ph 7.0)重悬并洗涤沉淀2次。

【专利技术属性】
技术研发人员：马延和，张以恒，韩平平，李运杰，石婷，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：