CRBN基因人源化动物模型及构建系统、构建方法及应用技术方案

技术编号：40188903 阅读：33 留言：0更新日期：2024-01-26 23:52

本发明专利技术涉及动物基因工程技术领域，具体涉及一种CRBN基因人源化动物模型及构建系统、构建方法及应用，采用C57BL/6J品系小鼠，将C57BL/6J简称B6；具体采用B6.Fas<supgt;lpr/lpr</supgt;品系、B6.Ncf1<supgt;m1j/m1j</supgt;品系、B6.Crbn<supgt;tm1.1Ble</supgt;品系、B6.Stat1<supgt;fl/fl</supgt;品系、B6.Cd68<supgt;Cre/Cre</supgt;品系、B6.Lyz2<supgt;Akaluc</supgt;品系小鼠，建立繁殖笼，进行杂交繁育，最终获得四种小鼠的动物模型；本发明专利技术结合Ncf1基因多态性和Lyz2基因靶向自发荧光标记的巨噬细胞示踪方法，通过膜蛋白Cd68编码基因的启动子位置转录Cre标记小鼠与Stat1‑Floxp小鼠交配后建立条件性基因敲除CKO小鼠，建立一种多对照，应用范围广的小鼠模型，有助于免疫疾病研究和免疫疾病治疗药物研发。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及动物基因工程，具体涉及crbn基因人源化动物模型及构建系统、构建方法及应用。

技术介绍

1、免疫调节药物沙利度胺和相关化合物目前唯一已知的分子靶点是cereblon(crbn)。然而，沙利度胺和相关化合物在小鼠模型中缺乏活性，导致小鼠crbn无法响应。近年研究表明，小鼠crbn基因中第391位的异亮氨酸突变为氨酸使得小鼠crbn表现出在人类细胞中鉴定的沙利度胺诱导药物靶标的降解。建立crbn基因人源化动物模型，是免疫研究的迫切需求。ncf1基因的单核苷酸多态性在小鼠慢性炎症性自身免疫性疾病中具有重要作用，其活性氧缺失可引发自身免疫反应增强乃至患者病情加重。该效应在许多不同的小鼠疾病中起作用，如狼疮，系统性硬化症和银屑病。在ncf1基因调控的下游信号通路，包括巨噬细胞和stat1基因。

2、基因人源化动物模型是利用基因技术将人类基因插入动物基因组，使其携带人源基因的动物模型。小鼠与功能性基因极少表现出完全相同，导致人体和小鼠结果存在差异。因此，为了利用上述基因实现上述免疫疾病的研究和相关药物研发，亟需构建具有相关...

【技术保护点】

1.一种CRBN基因人源化动物模型的构建方法，其特征在于，具体步骤如下：

2.根据权利要求1所述的CRBN基因人源化动物模型构建方法，其特征在于，对所述子代基因进行鉴定时，其中，Ncf1、Crbn基因使用焦磷酸测序鉴定，其他基因使用PCR测序鉴定。

3.基于如权利要求1或2所述的CRBN基因人源化动物模型构建方法所获得的动物模型，其特征在于，包括：通过对所述步骤So中获得的所述繁殖笼18的子代进行基因鉴定，即可得到模型：B6.Faslpr/lpr.Ncf1m1J/m1J.Lyz2Akaluc.Stat1CKO.Crbntm1.1Ble。