一种人羊膜间充质干细胞定向分化为定型内胚层的诱导培养基及诱导方法技术

本方案公开了再生医学技术领域的一种人羊膜间充质干细胞定向分化为定型内胚层的诱导培养基及诱导方法，包括以下步骤：S1：将第3代人羊膜间充质干细胞铺于24孔板上培养，其生长密度达80％；S2：取胎牛血清、activin A和B27加入到RPMI 1640培养基中，轻柔吹打均匀，得到诱导培养基，所述诱导培养基中胎牛血清、activin A和B27的终浓度分别为0.5％、100ng/ml、1×；S3：步骤S1所述的人羊膜间充质干细胞生长密度达到80％时，将24孔板中的培养基上清吸出，用PBS缓冲液洗涤3次，然后将PBS缓冲液吸尽，沿24孔板加入步骤S2得到的培养基，于5％CO<subgt;2</subgt;的37℃培养箱中培养6天，第3天换液一次。本方案可提高分化效率，使分化更彻底。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及再生医学，特别涉及一种人羊膜间充质干细胞定向分化为定型内胚层的诱导培养基及诱导方法。

技术介绍

1、人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells，hamscs)为间充质干细胞的一类分支，属于成体干细胞的一种。通常来说，获得hamscs的方法是通过将产妇分娩后遗弃的胎盘钝性剥离出羊膜组织，然后使用一定浓度的胰蛋白酶和胶原酶来消化羊膜组织，最终通过钢网过滤分离得到。hamscs可表达胚胎干细胞表面标志物(oct-3/4、ssea-3、ssea-4、rex-1)，其中，oct-4被认为是多能干细胞自我更新和多向分化潜能的基因。hamscs因其具有多向分化潜能，故常用定向诱导并检测作为其鉴定方法，一般对hamscs进行成骨、成脂和成软骨诱导。hamscs被认为是介于胚胎干细胞和成体干细胞中间阶段的细胞，增殖能力强但无致瘤性。hamscs相较于骨髓间充质干细胞而言，能分泌更丰富的多种细胞因子和具有更强的增殖能力。在体外适当的条件下，hamscs具有向3个胚层的不同组织细胞类型分化的潜能，例如：神经细胞(本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种人羊膜间充质干细胞定向分化为定型内胚层的诱导培养基，其特征在于：包括RPMI 1640培养基和添加剂。

2.根据权利要求1所述的一种人羊膜间充质干细胞定向分化为定型内胚层的诱导培养基，其特征在于：所述添加剂由0.5％胎牛血清、100ng/ml activin A和1×B27组成。

3.根据权利要求2所述的一种人羊膜间充质干细胞定向分化为定型内胚层的诱导方法，其特征在于：包括以下步骤：

【技术特征摘要】

1.一种人羊膜间充质干细胞定向分化为定型内胚层的诱导培养基，其特征在于：包括rpmi 1640培养基和添加剂。

2.根据权利要求1所述的一种人羊膜间充质干细胞定向分化为定型内胚层的诱导培养基，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：王欢，刘正芸，易世豪，王天顺，
申请(专利权)人：遵义医科大学，
类型：发明
国别省市：