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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物分子生物学领域,具体涉及来源于水稻的维管束特异性表达的启动子posvsp1及其应用。
技术介绍
1、在植物生长发育的不同阶段和植物与环境的互作过程中,其结构和形态会发生极大变化。这些变化是由一系列基因在特定组织、特定时间表达所控制,这一精准的调控“开关”就是植物组织特异性启动子,在这类启动子的驱动下,基因的表达往往只限定某些特定的器官和/或组织部位,并表现出发育调节等特性。组织特异性启动子可以使得目的基因的表达产物在一定器官或组织部位积累,采用组织特异性表达启动子来驱动目的基因表达,仅仅增加区域表达量,可有效地避免由组成型表达启动子所带来的一些诸如代谢负担之类的负面效应。但是目前调控机理清楚且可用于作物遗传改良的组织特异性表达的启动子仍然较少。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是提供一种具有维管束特异性启动子功能的dna分子。所要解决的技术问题不限于所描述的技术主题,本领域技术人员通过以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技术主题。
2、为解决上述技术问题,本专利技术提供了以下技术方案:
3、本专利技术提供了dna分子或生物材料的下述任一应用:
4、1)在启动目的基因表达中的应用;
5、2)在植物遗传改良中的应用;
6、所述dna分子为如下a1)或a2)或a3):
7、a1)核苷酸序列是seq id no.1的dna分子,其名称为posvsp1启动子,来源于水稻(oryza sa
8、a2)与seq id no.1限定的核苷酸序列具有99%以上、95%以上、90%以上、85%以上或者80%以上同一性,且具有启动子功能的dna片段,
9、a3)在严格条件下与seq id no.1限定的核苷酸序列杂交,且具有启动子功能的dna片段;
10、所述生物材料为下述b1)至b4)中的任一种:
11、b1)含有所述dna分子的表达盒,
12、b2)含有所述dna分子的重组载体,
13、b3)含有所述dna分子的重组微生物、或含有b1)所述表达盒的重组微生物、或含有b2)所述重组载体的重组微生物,
14、b4)含有所述dna分子的转基因植物细胞系、或含有b1)所述表达盒的转基因植物细胞系。
15、其中,seq id no.1共由1962个核苷酸组成。
16、本文中,所述80%以上的同一性可为至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的同一性。
17、进一步地,所述启动目的基因表达为在植物中启动目的基因表达。
18、进一步地,所述表达为在植物的维管束中特异性表达。
19、进一步地,所述植物为下述任一种:g1)单子叶植物;g2)禾本科植物;g3)稻属植物;g4)稻种植物;g5)水稻。具体可为水稻品种日本晴。
20、本文所述载体是本领域技术人员公知的,包括但不限于:质粒、噬菌体(如λ噬菌体或m13丝状噬菌体等)、黏粒(即柯斯质粒)、ti质粒或病毒载体。上文中所述重组载体可为重组表达载体,也可为重组克隆载体。
21、在本专利技术的一个实施例中,所述重组载体具体为将seq id no.1所示的dna分子插入pcambia1391z载体的bamhi和ncoi酶切识别位点之间,且保持pcambia1391z载体的其他序列不变得到的载体。
22、上文中所述表达盒由具有启动子功能的所述dna分子,由所述dna分子启动表达的目的基因及转录终止序列组成;所述dna分子以功能性方式与所述目的基因连接,且所述目的基因与所述转录终止序列连接。
23、在本专利技术的一个实施例中,所述目的基因具体为gus基因(来源于所述pcambia1391z载体);所述转录终止序列具体为nos转录终止子(来源于所述pcambia1391z载体)。
24、上述应用中的posvsp1启动子或重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也属于本专利技术的保护范围。
25、本专利技术还提供了一种培育转基因植物的方法,是在植物中用前述dna分子启动目的基因的表达,得到表达所述目的基因的转基因植物。
26、具体而言,所述表达所述目的基因为在维管束中特异性表达所述目的基因。
27、本专利技术与现有技术相比,具有如下优点:
28、(1)本专利技术的水稻维管束特异性表达启动子为posvsp1来源于水稻粳稻品种日本晴,该启动子片段大小为1962bp,所述posvsp1启动子具有以下特点:a)位于osvsp1基因的5’端及其上游;b)碱基长度为1962bp;c)具有引发转录的必要位点及转录起始点;d)在水稻维管束中特异性表达。本专利技术提供启动子能够有效控制目的基因特异表达于维管束,在其他器官组织中不表达,可避免外源基因在植物其他组织中持续表达所带来的不利影响,诸如转基因漂移和花粉逃逸所带来的生物安全问题。
29、(2)本专利技术的含有维管束特异表达启动子posvsp1的重组表达载体,转入了维管束特异性表达的启动子,在重组表达载体的维管束特异表达启动子posvsp1调控下,使下游基因定位于维管束表达,为植物基因工程领域研究基因在维管束特异表达提供了工具,具有广泛的应用前景。
30、通过实验证明:本专利技术提供启动子posvsp1可有效启动目的基因在水稻维管束中的特异性表达,在其他器官和组织中不表达,可避免目的基因在植物其他组织中持续表达所带来的不利影响,还可以用于植物维管束生长发育相关基因的功能分析和鉴定。不仅可为转基因水稻育种服务,也为长远的启动子改造和设计储备资源。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.DNA分子或生物材料的下述任一应用:
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述启动目的基因表达为在植物中启动目的基因表达。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述表达为在植物的维管束中特异性表达。
4.根据权利要求1-3中任一所述的应用,其特征在于,所述植物为下述任一种:
5.权利要求1中所述的DNA分子或生物材料。
6.根据权利要求5所述的生物材料,其特征在于:所述重组载体为在植物表达载体的多克隆位点或重组位点插入权利要求1所述DNA分子得到的重组质粒。
7.根据权利要求6所述的生物材料,其特征在于:所述表达盒由权利要求1所述DNA分子启动表达的目的基因,以及转录终止子组成;所述DNA分子以功能性方式与所述目的基因连接,且所述目的基因与所述转录终止子连接。
8.一种培育转基因植物的方法,是在出发植物中用权利要求1所述DNA分子启动目的基因的表达,得到表达所述目的基因的转基因植物。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:所述表达所述目的基因为在维管束中特异性表达所
...【技术特征摘要】
1.dna分子或生物材料的下述任一应用:
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述启动目的基因表达为在植物中启动目的基因表达。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述表达为在植物的维管束中特异性表达。
4.根据权利要求1-3中任一所述的应用,其特征在于,所述植物为下述任一种:
5.权利要求1中所述的dna分子或生物材料。
6.根据权利要求5所述的生物材料,其特征在于:所述重组载体为在植物表达载体的多克隆位点或重组位点插入权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员:崔学安,张治国,吴苏亭,陈国鑫,王志伟,杜量衡,吴金霞,孙学辉,路铁刚,
申请(专利权)人:中国农业科学院生物技术研究所,
类型:发明
国别省市:
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