【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物基因工程，尤其涉及大麦钙调素结合转录因子hvcamta4及其在调控大麦耐盐性中的应用。
技术介绍
1、盐胁迫是限制全球作物生产和粮食安全的主要非生物胁迫之一。目前，全球盐碱地面积超过9亿公顷，约有7％的土地、20％的耕地和近50％的灌溉田已处于不同程度的盐渍化。同时，由于全球气候变暖、工业污染加剧及耕作措施不合理等因素，土壤盐碱化呈加剧趋势。我国盐碱土总面积达3,467×104hm2，目前用于种植不足1/5，盐碱地作为我国重要的后备耕地资源，改善和利用盐碱地已成为弥补耕地面积减少、保障国家粮食安全的重要途径，而培育耐盐作物无疑是提高盐碱地利用率最有效的方法。发掘耐盐植物种质资源及基因，阐明植物耐盐机理，是培育作物耐盐品种的重要基础。
2、土壤中过量盐分积累，会引起土壤理化性质改变，从而影响植物的生长发育。盐胁迫对植物的危害在于高渗透压和高浓度盐离子，及由这两者叠加引起的氧化胁迫。高浓度盐溶液不仅带来渗透胁迫，而且其携带高浓度的盐离子(na+和cl-)对植物也具有毒害作用。其中，钠离子的毒害作用更为明显，原因之一在于钠(na+)和钾(k+)是化学性质十分相似的可溶性一价阳离子。因此，降低植物细胞或地上部组织的na+浓度，是增强抗盐性的一种重要途径。
3、维持离子平衡是植物适应盐胁迫的一种主要耐性机制，其涉及到离子的吸收、外排、转运以及区隔化过程。通常，植物通过操控na+/k+转运体以及质子泵的活力，进行离子转运和再分配，从而实现盐胁迫下离子平衡的重建(zhu，2003)。大多数植物中k+、
4、另一方面，ca2+及其结合蛋白参与盐胁迫响应及耐性形成，目前已成为植物耐盐分子调控机理研究的一大热点(zhu等，2015；demidchik等，2014)。如离子调控sos途径：经钙调磷酸酶sos3(calcineurin-like protein，cbl4)捕获细胞质中的ca2+，进而与sos2(calcineurin interacting protein kinase，cipk24)结合形成蛋白复合体，经蛋白磷酸化作用激活细胞膜上的na+转运蛋白sos1/nhx7(shi等，2000；zhu，2002；chinnusamy等，2005)，而植物根表皮和木质部细胞膜上被激活的sos1则将na+从地上部回流至根，最终排出根际(shi等，2002；zhu，2016)。盐胁迫下激增的ca2+也能够被其他ca2+结合蛋白捕获，其中钙调蛋白(calmodulin，cam)是真核细胞中结构保守和功能专一的ca2+信号主要转化器之一，能将ca2+专一、高效地传递给下游基因或通路，进而参与植物逆境胁迫下的分子响应(galon等，2010；zhu等，2015)。
5、植物钙调素结合转录因子camta(calmodulin-binding transcriptionactivators)是一种广泛存在于植物体中且可与cam结合的转录因子家族(yang和poovaiah，2000)，由于该家族基因能被环境信号、激素和信号分子快速诱导表达，因此atcamta又被命名为atsr(arabidopsis thaliana signal-responsive genes)(yang和poovaiah，2002)。水稻中camta被称为oscbt(oryza sativa cam-binding transcriptionfactor)(choi等，2005)。camta/sr家族成员之间具有相似的结构，从n端到c端依次为1个cg-1结构域、1个免疫球蛋白类转录因子(transcription factor immunoglobulin，tig)结构域、锚定蛋白(ankyrin，ank)重复序列、与钙调素结合的cambd(ca2+-dependent cambinding domain)以及数量不一的iq基序(choi等，2005；poovaiah等，2013)。现已明确，很多物种的camta/sr对低温(lee和seo，2015；kim等，2017)、干旱(noman等，2019)和盐胁迫(xie等，2018；büyük等2019；shkolnik等，2019)等多种逆境都有响应(vlot等，2009；an和mou，2011)，该家族在植物生长发育(nie等，2012；yuan等，2018)以及逆境响应中发挥着重要作用。
6、大麦(hordeum vulgare l.)是全球第四大谷类作物，也是耐盐性最强的禾本科作物，同时具有适应性广和野生资源丰富等特点，已成为研究禾谷类作物耐盐机制的理想模式植物(munns和tester，2008)。但是，当前尚无大麦camta的相关报道。因此，从大麦中发掘优异的耐盐相关基因，如camta家族成员，可以丰富植物耐盐理论，为大麦及禾谷类作物耐盐育种提供理论与技术支撑。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供了一种大麦钙调素结合转录因子hvcamta4及其在调控大麦耐盐性中的应用，该hvcamta4基因参与大麦的盐胁迫响应，为大麦耐盐性种质资源的制备提供依据。
2、具体技术方案如下：
3、本专利技术提供了大麦钙调素结合转录因子hvcamta4，所述大麦钙调素结合转录因子hvcamta4的核苷酸序列如seq id no:1所示；本专利技术首先克隆得到一个大麦的钙调素结合转录因子基因，命名为hvcamta4，其转录本cdna全长核苷酸序列为seq id no:2所示。其转录本cdna全长核苷酸序列为seq id no:2所示。
4、seq id no:1：
5、atgagccagagtgagtggagctctctcatcgtttattccgtttgattctttggcagggcttgtgagttgacctgggtgggactcgacttcttgacccgggagtcgagtgcttgttaaggttgatgcagtagcaagggggccttattgtgtgggggcatttcaccttggaattcctctttcttggggccttctaatatttattgcagccatgatcaaatttggtctgcagccgatccttttcagtagccggggccatgttttatctttctttttttttaattcttacaaggtcgatggtggtaactgcaataaaaatataaacaaggtcaatggtcgtaactgctactgctg本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.大麦钙调素结合转录因子HvCAMTA4，其特征在于，所述大麦钙调素结合转录因子HvCAMTA4的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示，其转录本cDNA全长核苷酸序列为SEQ IDNo:2所示。
2.大麦钙调素结合蛋白，其特征在于，由大麦钙调素结合转录因子HvCAMTA4编码的CAMTA4蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No:3所示。
3.HvCAMTA4基因启动子，其特征在于，所述HvCAMTA4基因启动子的核苷酸序列如SEQID No:4所示。
4.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌中包含有HvCAMTA4基因编辑的CRISPR/Cas9载体；所述HvCAMTA4基因的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示，其转录本cDNA全长核苷酸序列为SEQ ID No:2所示。
5.如权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌的宿主细胞为大肠杆菌或农杆菌。
6.如权利要求1所述的大麦钙调素结合转录因子HvCAMTA4在调控大麦耐盐性中的应用。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述调
8.如权利要求4～5任一项所述的基因工程菌在调控大麦耐盐性中的应用。
...【技术特征摘要】
1.大麦钙调素结合转录因子hvcamta4，其特征在于，所述大麦钙调素结合转录因子hvcamta4的核苷酸序列如seq id no:1所示，其转录本cdna全长核苷酸序列为seq idno:2所示。
2.大麦钙调素结合蛋白，其特征在于，由大麦钙调素结合转录因子hvcamta4编码的camta4蛋白，其氨基酸序列如seq id no:3所示。
3.hvcamta4基因启动子，其特征在于，所述hvcamta4基因启动子的核苷酸序列如seqid no:4所示。
4.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌中包含有hvcamta4基因...
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