【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫学检测，更具体地，本专利技术涉及一种快速检测t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合、试剂盒及其应用。
技术介绍
1、t细胞大颗粒淋巴细胞白血病(t-lgll)是一种克隆性t淋巴细胞增生性疾病，是指外周血中t大颗粒淋巴细胞持续增加，通常＞2*109/l。可累计外周血、骨髓、肝脏、脾脏，可导致血细胞减少相关，尤其是中性粒细胞减少，这可能很严重，会导致复发感染，甚至发生死亡。在一些老年人中，尤其是粒细胞减少的患者中，进行t细胞大颗粒淋巴细胞白血病(t-lgll)筛查，可以较早识别克隆性t大颗粒淋巴细胞，便于临床更好的监控和诊疗。
2、目前用于检测t细胞大颗粒淋巴细胞白血病(t-lgll)的技术包括流式检测与基因检测联合使用。在t淋巴瘤2022版nccn指南中建议应使用流式细胞术检测以下抗体用于筛查t-lgll：cd3、cd4、cd5、cd7、cd8、cd56、cd57、tcrαβ、tcrγδ，并指出典型的t-lgll的免疫表型为cd3+、cd8+、cd16+、cd57+、cd56+/-、cd5 dim和/或cd7 dim。使用以上抗体组合识别出具有典型的t-lgll的免疫表型的异常t淋巴细胞后再进行t细胞克隆性检测(tcr-vβ亚群检测以及tcr基因重排检测)进一步确认。使用此方法进行疾病筛查时发现有两个问题，一是出报告时间长：流式细胞术检测结果出报告后才加做tcr-vβ亚群检测以及tcr基因重排检测来确定是否具有克隆性，一般需要7天左右；二是流式使用此抗体组合进行筛查时特异性不太好，有部分病毒感染或是有自身免疫
3、因此，临床上需要一种简便快捷、准确度高、灵敏度高且特异性好的检测技术来进行t-lgll的初筛。
技术实现思路
1、基于此，本专利技术的目的在于提供一种快速检测t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合、试剂盒及其应用，使用本专利技术的抗体组合检测t细胞大颗粒淋巴细胞，准确度高、灵敏度高、特异性强，且简单方便。
2、实现上述专利技术目的的技术方案包括如下。
3、本专利技术的第一方面，提供了一种检测t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，包括第一组抗体和第二组抗体，其中，所述第一组抗体包括：cd8、cd4、cd16、cd56、cd5、cd3、cd2、cd7和cd45抗体；所述第二组抗体包括：trbc1、cd5、tcrγδ、cd45ro、cd3、cd45ra、cd57和cd45抗体。
4、本专利技术的第二方面，提供了一种检测t细胞大颗粒淋巴细胞的试剂盒，所述试剂盒包括上述检测t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合。
5、本专利技术的第三方面，提供了上述检测t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合或试剂盒在辅助检测t细胞大颗粒淋巴细胞中的应用。
6、本专利技术的第四方面，提供了一种检测t细胞大颗粒淋巴细胞的系统，包括：检测模块，所述检测模块对待测细胞进行流式细胞术检测；数据获取模块，获取流式细胞术检测结果的数据；数据分析模块，对所述获取的数据进行分析，根据预定的分析逻辑及判断标准判定获取的t淋巴细胞是否为肿瘤性t细胞大颗粒淋巴细胞。
7、本专利技术的专利技术人经过大量的实验后，筛选出了两组以cd3+cd5dim区为主要目的细胞群，涵盖cd45ra、cd45ro、trbc1等多种识别t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，采用该抗体组合可快速简便、高准确率、高灵敏度、高特异性地检出t细胞大颗粒淋巴细胞，弥补了现有检测技术的局限性。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种检测T细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，其特征在于，包括第一组抗体和第二组抗体，所述第一组抗体包括CD8、CD4、CD16、CD56、CD5、CD3、CD2、CD7和CD45抗体；所述第二组抗体包括：TRBC1、CD5、TCRγδ、CD45RO、CD3、CD45RA、CD57和CD45抗体。
2.根据权利要求1所述的检测T细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，其特征在于，所述抗体组合的抗体为单克隆抗体。
3.根据权利要求2所述的检测T细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，其特征在于，所述单克隆抗体为荧光素标记的抗体，所述荧光素选自：FITC、PE、ECD、PE-CyTM5.5、PE-Cy7、APC、APC-750、PB、KO。
4.根据权利要求3所述的检测T细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，其特征在于，所述CD8和TRBC1抗体标记荧光素FITC；所述CD4和CD5抗体标记荧光素PE；所述CD16抗体标记荧光素ECD；所述CD56和TCRγδ抗体标记荧光素PE-CyTM5.5；所述CD5和CD45RO抗体标记荧光素PE-Cy7；所述CD3抗体标记荧光素APC；
5.一种检测T细胞大颗粒淋巴细胞的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1～4任一项所述的检测T细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合。
6.权利要求1～4任一项所述的检测T细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合或权利要求5所述的试剂盒在辅助检测T细胞大颗粒淋巴细胞中的应用。
7.一种检测T细胞大颗粒淋巴细胞的系统，其特征在于，包括：
8.根据权利要求7所述的检测T细胞大颗粒淋巴细胞的系统，其特征在于，所述判断标准包括：
9.根据权利要求8所述的检测T细胞大颗粒淋巴细胞的系统，其特征在于，所述待测细胞的抗体表达模式和正常对照人群抗体的表达模式通过以下步骤建立：将流式细胞术检测结果的数据，通过设门将有核细胞分群，圈出目的细胞群，再分析所述目标细胞群中各荧光抗体对的表达情况。
10.根据权利要求9所述的检测T细胞大颗粒淋巴细胞的系统，其特征在于，所述荧光抗体对包括：CD45-SSC，CD3-CD56，CD3-CD2，CD3-CD5，CD3-CD7，CD3-CD4，CD3-CD8，CD4-CD8，CD3-CD16，CD3-CD45，CD3-TCRγδ，CD3-TRBC1，CD3-CD45RA，CD3-CD45RO，CD3-CD57。
...【技术特征摘要】
1.一种检测t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，其特征在于，包括第一组抗体和第二组抗体，所述第一组抗体包括cd8、cd4、cd16、cd56、cd5、cd3、cd2、cd7和cd45抗体；所述第二组抗体包括：trbc1、cd5、tcrγδ、cd45ro、cd3、cd45ra、cd57和cd45抗体。
2.根据权利要求1所述的检测t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，其特征在于，所述抗体组合的抗体为单克隆抗体。
3.根据权利要求2所述的检测t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，其特征在于，所述单克隆抗体为荧光素标记的抗体，所述荧光素选自：fitc、pe、ecd、pe-cytm5.5、pe-cy7、apc、apc-750、pb、ko。
4.根据权利要求3所述的检测t细胞大颗粒淋巴细胞的抗体组合，其特征在于，所述cd8和trbc1抗体标记荧光素fitc；所述cd4和cd5抗体标记荧光素pe；所述cd16抗体标记荧光素ecd；所述cd56和tcrγδ抗体标记荧光素pe-cytm5.5；所述cd5和cd45ro抗体标记荧光素pe-cy7；所述cd3抗体标记荧光素apc；所述cd2和cd45ra抗体标记荧光素apc-750；所述cd7和cd57抗体标记荧光素pb；所述cd45抗体标记荧...
【专利技术属性】
技术研发人员：韦杰，潘建华，张静文，徐志宏，王青，王佳佳，范昌军，
申请(专利权)人：济南金域医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。