【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测领域，尤其涉及腺苷酸环化酶作为标志物在制备诊断和/或鉴别腹泻的病原体的产品中的应用。
技术介绍
1、腹泻是多种病原、多种因素引起的以大便次数增多和大便性状改变为特点的一组疾病，是儿童患病和死亡的主要原因，也是营养不良的重要原因。腹泻通常是胃肠道感染的一种症状，可由多种细菌、病毒和寄生虫引起，感染造成的腹泻是发展中国家普遍存在的问题，发病率一直位居肠道传染病的首位，主要通过污染的食物或饮用水传播，或由于卫生条件恶劣在人与人之间传播。
2、引起感染性腹泻的病原体包括细菌、病毒、寄生虫和真菌等。根据病理生理学将感染性腹泻分为分泌性腹泻、渗出性腹泻和渗透性腹泻。其中细菌型腹泻根据细菌毒素以及细菌对肠道黏膜的侵袭程度，将发病机制进一步分为肠毒素性、侵袭性和黏附性3种。各种细菌产生的肠毒素类作为分泌性腹泻的一种，其分泌的细菌毒素会与肠道上皮细胞刷状缘上的受体结合，激活肠上皮细胞内的腺苷酸环化酸酶系统，使细胞内第二信使camp、cgmp及钙离子增加，聚积在小肠粘膜上皮细胞内，致使隐窝细胞对水、氯和碳酸氢盐分泌增强，同时又抑制绒毛上皮细胞对钠及氯的吸收，甚至可通过神经反射增加小肠细胞释放五羟色胺而增加肠液分泌，引起腹泻。
3、针对细菌感染性腹泻，目前临床主要采用显微镜检配合病原微生物检测及药敏试验，对病原微生物进行培养分离与鉴定，或是基于核酸分子生物学鉴定技术，如16s rrna序列分析技术鉴定病原微生物类型。显微镜检使用生理盐水进行湿片镜下检测，通过观察样本中的中性粒细胞、红细胞及其数量、酵母样真
4、目前临床可引起腹泻的病原体众多，但患者的临床表现却有许多相似之处，不利于细菌性腹泻、病毒性腹泻及非感染性腹泻的早期诊断及鉴别。现有的细菌检测技术中，病原微生物培养及鉴定存在操作步骤繁琐，检测费时又滞后的缺点，不利于早期诊断。16srrna序列分析技术需要用到昂贵的试剂和仪器，对实验人员的专业性和操作性要求极高，不适用于基层医院对临床腹泻致病细菌的快速鉴定。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了腺苷酸环化酶作为标志物在制备诊断和/或鉴别腹泻的病原体的产品中的应用。本专利技术无需逐个检测致病细菌的类型，通过本专利技术的标志物可以高效、经济、便捷地检测腹泻样本中有无致病细菌；同时检测结果与目前临床使用的显微镜检和细菌培养鉴定方法相比，符合率极高。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了腺苷酸环化酶作为标志物在制备诊断和/或鉴别腹泻的病原体的产品中的应用。
4、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述病原体包括：细菌。
5、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述产品的检测样品包括：粪便和/或小肠黏膜。
6、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述产品的检测样品包括：粪便。
7、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述诊断和/或鉴别的方法包括：同位素标记法、色谱法、免疫法和/或化学显色法中的一种或多种。
8、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述诊断和/或鉴别的方法包括：免疫法。
9、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述免疫法包括：胶体金免疫层吸法和/或酶联免疫吸附测定法。
10、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述诊断和/或鉴别包括如下步骤：取待测样品与缓冲液混合后，离心，取上清，检测，获得检测结果。
11、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述检测包括检测所述腺苷酸环化酶的活性。
12、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述待测样品与抗原和/或抗体特异性结合后，显色，所述腺苷酸环化酶为阳性，所述待测样品的病原体为细菌；
13、所述待测样品与抗原和/或抗体特异性结合后，不显色，所述腺苷酸环化酶为阴性，所述待测样品的病原体不为细菌。
14、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述待测样品的环磷酸腺苷的生成量≤20pmol/mg/min时，所述腺苷酸环化酶为阴性，所述待测样品的病原体不为细菌；
15、所述待测样品的环磷酸腺苷的生成量＞20pmol/mg/min时，所述腺苷酸环化酶为阳性，所述待测样品的病原体为细菌。
16、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述待测样品与所述缓冲液的质量体积比为：1:9；所述缓冲液包括：0.01m ph为7.4的磷酸盐缓冲液。
17、在本专利技术的一些实施方案中，上述应用中，所述离心的转速为5000×g，时间为10min。
18、本专利技术提供了腺苷酸环化酶作为标志物在制备诊断和/或鉴别腹泻的病原体的产品中的应用。
19、本专利技术的有益效果包括：
20、(1)、使用本专利技术提供的标志物，可高效、经济、便捷地检测腹泻样本中有无致病细菌。
21、(2)、本专利技术提供的标志物可以检测腹泻样本中是否存在致病细菌，不限于单种细菌的检测，检测结果与目前临床使用的显微镜检和细菌培养鉴定方法相比，符合率极高。
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1.腺苷酸环化酶作为标志物在制备诊断和/或鉴别腹泻的病原体的产品中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述病原体包括：细菌。
3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述产品的检测样品包括：粪便和/或小肠黏膜。
4.如权利要求1至3任一项所述的应用，其特征在于，所述诊断和/或鉴别的方法包括：同位素标记法、色谱法、免疫法和/或化学显色法中的一种或多种。
5.如权利要求1至4任一项所述的应用，其特征在于，所述诊断和/或鉴别包括如下步骤：取待测样品与缓冲液混合后，离心，取上清，检测，获得检测结果。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述待测样品与抗原和/或抗体特异性结合后，显色，所述腺苷酸环化酶为阳性，所述待测样品的病原体为细菌；
7.如权利要求5或6所述的应用，其特征在于，所述待测样品的环磷酸腺苷的生成量≤20pmol/mg/min时，所述腺苷酸环化酶为阴性，所述待测样品的病原体不为细菌；
8.如权利要求5至7任一项所述的应用，其特征在于，所述待测样品与所述缓冲液的质量体积比为
9.如权利要求5至8任一项所述的应用，其特征在于，所述离心的转速为5000×g，时间为10min。
...【技术特征摘要】
1.腺苷酸环化酶作为标志物在制备诊断和/或鉴别腹泻的病原体的产品中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述病原体包括：细菌。
3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述产品的检测样品包括：粪便和/或小肠黏膜。
4.如权利要求1至3任一项所述的应用，其特征在于，所述诊断和/或鉴别的方法包括：同位素标记法、色谱法、免疫法和/或化学显色法中的一种或多种。
5.如权利要求1至4任一项所述的应用，其特征在于，所述诊断和/或鉴别包括如下步骤：取待测样品与缓冲液混合后，离心，取上清，检测，获得检测结果。
6.如权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：王则宇，宋少颖，李晓霞，刘志磊，杨红云，杨森，胡玉，杨静静，付光宇，吴学炜，杨增利，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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