【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，特别涉及一种提升链霉亲和素磁珠精密性的方法。
技术介绍
1、磁微粒是指磁性纳米粒子与无机或有机分子结合形成的可均匀分散于一定基液中具有高度稳定性的胶态复合材料。根据磁微粒表面连接的官能团，可将磁珠分为羧基磁珠、氨基磁珠、toysl磁珠、链霉亲和素(streptavidin，sa)磁珠等。
2、链霉亲和素磁珠因与生物素标记配体，如生物素标记核酸、抗体或细胞表面蛋白等有高效地结合力，被广泛应用于生物研发及应用领域。传统方法制备的链霉亲和素磁珠多是在羧基磁珠基础上包被链霉亲和素。目前按照传统方法制备的商品化链霉亲和素磁珠存在磁含量低、磁珠粒径1μm左右，在适配全自动化学发光测定仪时，存在精密性差的问题。这是由于磁珠在反应过程中涉及到单次或多次磁吸、洗涤。当遇到磁吸、洗涤效果差的仪器，会出现发光值变异系数cv增大的问题，直接影响到产品的精密性性能。因此，本专利技术的目的在于提供一种可以提升链霉亲和素磁珠精密性的方法。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供的一种提升链霉亲和素磁珠精密性的方法，保证了在全自动化学发光仪上使用时磁珠和上清分离的时间变短，从而降低磁珠洗涤过程中磁珠的丢失率，提升磁珠在仪器上的磁铁回收率，最终有效提升了精密性。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了磁微粒，包括取sa磁珠和羧基磁珠偶联获得。
4、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述磁微粒所述偶联的方
5、(a)、以bsa作为连接体偶联所述sa磁珠和羧基磁珠；和/或
6、(b)、直接偶联所述sa磁珠和羧基磁珠。
7、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述磁微粒，所述以bsa作为连接体偶联所述sa磁珠和羧基磁珠的方式包括如下步骤：
8、步骤(1)：混合sa磁珠和羧基磁珠，获得磁珠混合物；
9、步骤(2)：洗涤并活化步骤(1)所述的磁珠混合物，获得活化后的磁珠混合物；
10、步骤(3)：取步骤(2)所述的活化后的磁珠混合物与bsa混合后，封闭，获得所述磁微粒。
11、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述磁微粒：
12、步骤(1)中所述sa磁珠和所述羧基磁珠的质量比为1:(0.5～2)；和/或
13、步骤(2)中所述洗涤所用的洗涤液包括磷酸盐缓冲液；和/或
14、步骤(2)中所述活化所用的活化剂包括含nhs和edc的缓冲液，所述缓冲液包括mes缓冲液或naac·3h2o缓冲液；和/或
15、步骤(3)中所述bsa包括含10～25μg/ml bsa的缓冲液，所述缓冲液包括mes缓冲液或naac·3h2o缓冲液；和/或
16、步骤(3)中所述封闭所用的封保液包括含蛋白、防腐剂和多羟基化合物的tris缓冲液，所述蛋白包括牛血清白蛋白、牛血清、酪蛋白中的一种或多种，所述tris缓冲液包括三(羟甲基)氨基甲烷tris缓冲液或三(羟甲基)氨基甲烷tris-nacl缓冲液。
17、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述磁微粒，所述直接偶联所述sa磁珠和羧基磁珠的方式包括如下步骤：
18、步骤(1)：洗涤并活化羧基磁珠，获得活化后的羧基磁珠；
19、步骤(2)：取步骤(1)所述活化后的羧基磁珠与sa磁珠混合后，封闭，获得所述磁微粒。
20、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述磁微粒：
21、步骤(1)中所述洗涤所用的洗涤液包括磷酸盐缓冲液；和/或
22、步骤(1)中所述活化所用的活化剂包括含nhs和edc的缓冲液，所述缓冲液包括mes缓冲液或naac·3h2o缓冲液；和/或
23、步骤(2)中所述活化后的羧基磁珠和所述sa磁珠的质量比为1:(0.5～2)；和/或
24、步骤(2)中所述封闭所用的封保液包括含蛋白、防腐剂和多羟基化合物的tris缓冲液，所述蛋白包括牛血清白蛋白、牛血清、酪蛋白中的一种或多种，所述tris缓冲液包括三(羟甲基)氨基甲烷tris缓冲液或三(羟甲基)氨基甲烷tris-nacl缓冲液。
25、本专利技术还提供了提升sa磁珠精密性的方法，包括取sa磁珠与羧基磁珠偶联，达到提升sa磁珠精密性的目的。
26、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述方法包括如下步骤：
27、步骤(1)：混合sa磁珠和羧基磁珠，获得磁珠混合物；
28、步骤(2)：洗涤并活化步骤(1)所述的磁珠混合物，获得活化后的磁珠混合物；
29、步骤(3)：取步骤(2)所述的活化后的磁珠混合物与bsa混合后，封闭，获得所述磁微粒；
30、其中，
31、步骤(1)中所述sa磁珠和所述羧基磁珠的质量比为1:(0.5～2)；和/或
32、步骤(2)中所述洗涤所用的洗涤液包括磷酸盐缓冲液；和/或
33、步骤(2)中所述活化所用的活化剂包括含nhs和edc的缓冲液，所述缓冲液包括mes缓冲液或naac·3h2o缓冲液；和/或
34、步骤(3)中所述bsa包括含10～25μg/ml bsa的缓冲液，所述缓冲液包括mes缓冲液或naac·3h2o缓冲液；和/或
35、步骤(3)中所述封闭所用的封保液包括含蛋白、防腐剂和多羟基化合物的tris缓冲液，所述蛋白包括牛血清白蛋白、牛血清、酪蛋白中的一种或多种，所述tris缓冲液包括三(羟甲基)氨基甲烷tris缓冲液或三(羟甲基)氨基甲烷tris-nacl缓冲液。
36、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述方法包括如下步骤：
37、步骤(1)：洗涤并活化羧基磁珠，获得活化后的羧基磁珠；
38、步骤(2)：取步骤(1)所述活化后的羧基磁珠与sa磁珠混合后，封闭，获得所述磁微粒；
39、其中，
40、步骤(1)中所述洗涤所用的洗涤液包括磷酸盐缓冲液；和/或
41、步骤(1)中所述活化所用的活化剂包括含nhs和edc的缓冲液，所述缓冲液包括mes缓冲液或naac·3h2o缓冲液；和/或
42、步骤(2)中所述活化后的羧基磁珠和所述sa磁珠的质量比为1:(0.5～2)；和/或
43、步骤(2)中所述封闭所用的封保液包括含蛋白、防腐剂和多羟基化合物的tris缓冲液，所述蛋白包括牛血清白蛋白、牛血清、酪蛋白中的一种或多种，所述tris缓冲液包括三(羟甲基)氨基甲烷tris缓冲液或三(羟甲基)氨基甲烷tris-nacl缓冲液。
44、本专利技术还提供了检测方法，其基于上述磁微粒检测。
45、本专利技术具有如下效果：
46、本专利技术方法制备的链霉亲和素磁珠相比传统方法制备的链霉亲和素磁珠精密性变好，分析内cv％变小。本专利技术通过sa磁珠和羧基磁珠同时包被bsa或者用羧基磁珠连接sa，制备得到的磁微粒混悬液相比传统方法本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.磁微粒，其特征在于，取SA磁珠和羧基磁珠偶联获得。
2.如权利要求1所述的磁微粒，其特征在于，所述偶联的方式包括：
3.如权利要求1所述的磁微粒，其特征在于，所述以BSA作为连接体偶联所述SA磁珠和羧基磁珠的方式包括如下步骤：
4.如权利要求3所述的磁微粒，其特征在于，包括：
5.如权利要求1所述的磁微粒，其特征在于，所述直接偶联所述SA磁珠和羧基磁珠的方式包括如下步骤：
6.如权利要求5所述的磁微粒，其特征在于，包括：
7.提升SA磁珠精密性的方法，其特征在于，包括取SA磁珠与羧基磁珠偶联，达到提升SA磁珠精密性的目的。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：
9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：
10.检测方法，其特征在于，基于如权利要求1至6任一项所述的磁微粒检测。
【技术特征摘要】
1.磁微粒，其特征在于，取sa磁珠和羧基磁珠偶联获得。
2.如权利要求1所述的磁微粒，其特征在于，所述偶联的方式包括：
3.如权利要求1所述的磁微粒，其特征在于，所述以bsa作为连接体偶联所述sa磁珠和羧基磁珠的方式包括如下步骤：
4.如权利要求3所述的磁微粒，其特征在于，包括：
5.如权利要求1所述的磁微粒，其特征在于，所述直接偶联所述sa磁珠和羧基磁珠的方式包...
【专利技术属性】
技术研发人员：尚晓楠，张琦晗，李忠信，尤瑞国，常晓英，付光宇，吴学炜，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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