【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程，具体涉及到番茄lecrk26基因在调控植物灰霉病抗性中的应用。
技术介绍
1、灰霉病是由灰葡萄孢(botrytis cinerea)侵染引起的真菌病害之一，侵染范围十分广泛，包括茄科、葫芦科、蔷薇科等植物的根、茎、叶和果实均可发病，危害作物产量和品质。目前，灰霉病的防治主要以化学方法为主，如使用多菌灵等物质。但长期化学药物的使用易使病菌产生抗药性，同时也会对植物生长造成一定影响，影响防治效果。同时，大量化学药物的使用还会加大对环境和人体的危害。近年来，随着基因工程的迅速发展和技术的日臻完善，转基因技术在培育抗性植物品种方面展示了巨大的潜力，采用转基因的方法提高植物对灰霉病的抗性是有效控制灰霉病危害的措施。凝集素类受体样蛋白激酶在植物病害防御中的报道较多，但在番茄中的报道很少。本研究通过基因工程的方法，从番茄中克隆了一个灰霉病抗性基因lecrlk26，在番茄中过表达lecrlk26基因增强了番茄果实对灰霉病的抗性。表明番茄lecrlk26基因有提高植物对灰霉病抗性的能力，具有较大的应用价值。
技术实现思路
1、针对现有技术中的上述不足，本专利技术提供了番茄lecrk26基因在调控植物灰霉病抗性中的应用，高效并可稳定遗传地提高了番茄果实对灰霉病的抗性，番茄凝集素受体样蛋白激酶lecrlk26基因过表达番茄果实对灰霉病抗性更高，发病率和病斑大小显著降低，有效缓解了灰霉病对植物的危害问题。
2、为实现上述目的，本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：
3、番茄lecrlk26基因作为正调控基因在如下(1)-(4)至少一项中的应用：
4、(1)提高番茄果实对灰霉病的抗性；
5、(2)降低番茄果实灰霉病的发病率；
6、(3)降低番茄果实灰霉病的病斑大小；
7、(4)培育高抗灰霉病番茄品种。
8、上述番茄lecrlk26基因的核苷酸序列包括如seq id no.1所示，以及除seq idno.1以外的编码如seq id no.2所示氨基酸序列的核酸分子。
9、上述番茄lecrlk26基因所调控的番茄凝集素受体样蛋白激酶lecrlk26作为正调控因子在如下(1)-(4)至少一项中的应用：
10、(1)提高番茄果实对灰霉病的抗性；
11、(2)降低番茄果实灰霉病的发病率；
12、(3)降低番茄果实灰霉病的病斑大小；
13、(4)培育高抗灰霉病番茄品种。
14、上述番茄凝集素受体样蛋白激酶lecrlk26的氨基酸序列如seq id no.2所示，以及列经取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸，且表达相同功能蛋白质的氨基酸序列。
15、含有番茄lecrlk26基因的重组表达载体、转基因细胞系或者工程菌在如下(1)-(4)项中的应用：
16、(1)提高番茄果实对灰霉病的抗性；
17、(2)降低番茄果实灰霉病的发病率；
18、(3)降低番茄果实灰霉病的病斑大小；
19、(4)培育高抗灰霉病番茄品种。
20、上述含有番茄lecrlk26基因的重组表达载体的核苷酸序列如seq id no.3所示。
21、一种利用番茄lecrlk26基因提高番茄果实对灰霉病抗性的方法，使番茄lecrlk26基因过量表达。
22、进一步，使番茄lecrlk26基因过表达的具体步骤包括：外源转入番茄lecrlk26基因；或者上调番茄基因组中原有的lecrlk26基因的表达。
23、一种利用番茄lecrlk26基因培育高灰霉病抗性的番茄品种的方法，包括以下步骤：将番茄lecrlk26基因转入番茄野生型植株中，获得lecrlk26基因过量表达且稳定遗传的番茄，即番茄转基因植株。
24、上述番茄转基因植株与番茄野生型植株相比具有如下(1)-(3)至少一项特点：
25、(1)转基因番茄对灰霉病的抗性显著高于野生型番茄；
26、(2)转基因番茄灰霉病的发病率显著低于野生型番茄；
27、(3)转基因番茄灰霉病的病斑大小显著小于野生型番茄。
28、进一步，上述将番茄lecrlk26基因转入野生型番茄中的方法为聚乙二醇法、农杆菌浸染法或基因枪法。
29、综上所述，本专利技术具有以下有益效果：
30、1、本专利技术通过在番茄中过表达凝集素类受体蛋白激酶lecrlk26基因，并构建含lecrlk26基因的植物重组表达载体，将该载体转入番茄后所得转基因番茄阳性植株中lecrlk26基因较非转基因植株有显著更高的表达。转基因番茄的果实对灰霉病抗性显著强于野生型植株，发病率和病斑大小显著低于野生型。
31、2、与传统育种方法相比，本专利技术采用基因工程技术，高效并可稳定遗传地提高了番茄果实对灰霉病的抗性，为番茄抗性育种做出了积极的探索，具有较好的市场前景和经济价值。
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1.番茄LecRLK26基因作为正调控基因在如下(1)-(4)至少一项中的应用：
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述番茄LecRLK26基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示，以及除SEQ ID NO.1以外的编码如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的核酸分子。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述番茄LecRLK26基因所调控的番茄凝集素受体样蛋白激酶LecRLK26作为正调控因子在如下(1)-(4)至少一项中的应用：
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述番茄凝集素受体样蛋白激酶LecRLK26的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，以及列经取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸，且表达相同功能蛋白质的氨基酸序列。
5.含有权利要求1所述的番茄LecRLK26基因的重组表达载体、转基因细胞系或者工程菌在如下(1)-(4)项中的应用：
6.如权利要求5所述的含有番茄LecRLK26基因的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
7.一
8.如权利要求7所述的利用番茄LecRLK26基因提高番茄果实对灰霉病抗性的方法，其特征在于，所述使番茄LecRLK26基因过表达的具体步骤包括：外源转入番茄LecRLK26基因；或者上调番茄基因组中原有的LecRLK26基因的表达。
9.一种利用权利要求1所述的番茄LecRLK26基因培育高灰霉病抗性番茄品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：将番茄LecRLK26基因转入番茄野生型植株中，获得LecRLK26基因过量表达且稳定遗传的番茄。
10.如权利要求9所述的利用番茄LecRLK26基因培育高灰霉病抗性的番茄品种的方法，其特征在于，所述将番茄LecRLK26基因转入野生型番茄中的方法为聚乙二醇法、农杆菌浸染法或基因枪法。
...【技术特征摘要】
1.番茄lecrlk26基因作为正调控基因在如下(1)-(4)至少一项中的应用：
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述番茄lecrlk26基因的核苷酸序列如seqid no.1所示，以及除seq id no.1以外的编码如seq id no.2所示氨基酸序列的核酸分子。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述番茄lecrlk26基因所调控的番茄凝集素受体样蛋白激酶lecrlk26作为正调控因子在如下(1)-(4)至少一项中的应用：
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述番茄凝集素受体样蛋白激酶lecrlk26的氨基酸序列如seq id no.2所示，以及列经取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸，且表达相同功能蛋白质的氨基酸序列。
5.含有权利要求1所述的番茄lecrlk26基因的重组表达载体、转基因细胞系或者工程菌在如下(1)-(4)项中的应用：
6.如权利要求5所述的含有番茄lecrlk26基因的重组表达...
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