iPS诱导定向分化成心肌细胞的方法及应用技术

技术编号:40076510 阅读:25 留言:0更新日期:2024-01-17 01:25
本发明专利技术涉及iPS诱导定向分化成心肌细胞的方法及应用。本发明专利技术基于SKP2抑制剂能够促进人iPS细胞分化成熟为心肌细胞的原理,利用重组SKP2蛋白蛋白免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术将免疫成功的小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞相融合,筛选出能够稳定分泌抗SKP2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,获得的抗SKP2单克隆抗体具有高效价、高特异性、高亲和性的特点,同时通过使用SKP2单克隆抗体处理ips细胞后能够有效地促进分化为心肌细胞。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物领域,具体的涉及ips诱导定向分化成心肌细胞的方法及应用。


技术介绍

1、ips细胞不仅在细胞形态、生长特性、干细胞标志物表达等方面与es细胞非常相近,而且在dna甲基化方式、基因表达谱、染色质状态、形成嵌合体动物等方面也与es细胞几乎完全相同,其自我更新能力较强,且具有高度的分化能力。目前,ips细胞可在体外被诱导生成所有210种构成人体的细胞,具有无限的疾病治疗前景。理论上,ips细胞培养出的组织或器官移植回原患者身体内时,可避开自身免疫系统的攻击难题,同时以往es细胞所产生的道德伦理问题也可以取得根本解决。因此,ips细胞成为了再生医学中备受瞩目的重要细胞来源。干细胞技术颠覆了医学治疗的思路,未来的治病的药物,将不再是各种的化学合成物,而是秉持着「细胞的问题细胞解决,把像是小分子蛋白、抗体、干细胞等具有活性的物质送到体内,进而治疗疾病。诱导性多能干细胞(ips干细胞),它的作用能分化与构成身体各种细胞,它能在极少量的皮肤碎片或血液中制造出来。日本干细胞科学家山中伸弥正是因为成功将成年细胞逆转为ips细胞,于2012年得到了诺贝尔生医奖的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于诱导ips细胞向心肌细胞分化的特异性针对SKP2的单克隆抗体,其特征在于轻链可变区序列如SEQ ID NO:1所示,重链可变区序列如SEQ ID NO:2所示。

2.如权利要求1所述的SKP2的单克隆抗体在制备用于促进ips细胞分化为心肌细胞的培养基中的用途;其中所述的ips细胞是从人皮肤成纤维细胞重编程后制备获得的;所述的重编程是采用Epi5TM Episomal iPSC 重编程试剂盒实现;其中所述的培养基基础为CardioEasy®人心肌细胞分化试剂盒制备的。

3.一种ips细胞诱导定向分化成心肌细胞iHCM的方法,其特征在于:将皮肤成纤维细胞调...

【技术特征摘要】

1.一种用于诱导ips细胞向心肌细胞分化的特异性针对skp2的单克隆抗体,其特征在于轻链可变区序列如seq id no:1所示,重链可变区序列如seq id no:2所示。

2.如权利要求1所述的skp2的单克隆抗体在制备用于促进ips细胞分化为心肌细胞的培养基中的用途;其中所述的ips细胞是从人皮肤成纤维细胞重编程后制备获得的;所述的重编程是采用epi5tm episomal ipsc 重编程试剂盒实现;其中所述的培养基基础为cardioeasy®人心肌细胞分化试剂盒制备的。

3.一种ips细胞诱导定向分化成心肌细胞ihcm的方法,其特征在于:将皮肤成纤维细胞调整细胞数为1×106个,100μl电转缓冲液中加入 3μl epi5tm episomal ipsc 重编程试剂盒中的重编程因子,采用常规电转染细胞按2ml/孔接种于基质胶包被的6孔板中,置于培养箱中培养;并使用reprotesrtm重编程培养基隔天换液,转染后第8...

【专利技术属性】
技术研发人员:请求不公布姓名请求不公布姓名
申请(专利权)人:再少年北京生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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