【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，特别是涉及一种呼吸道病毒抗原联合检测试纸卡、试剂盒。
技术介绍
1、流行性感冒(简称流感)是流感病毒引起的急性呼吸道感染，是一种传染性强、传播速度快的疾病易感人群多为老年人(>65岁)和婴幼儿(<6岁)；临床特点为急起高热，全身酸痛、乏力，或伴轻度呼吸道症状。该病潜伏期短，传染性强，传播迅速。流感病毒分甲、乙、丙三型，甲型流感威胁最大。由于流感病毒致病力强，易发生变异，若人群对变异株缺乏免疫力，易引起流行，严重影响了人们的社会生活和生产建设。
2、目前较多的试剂盒基于新型冠状病毒、甲型和乙型流感病毒抗原或抗体检测，但人体产生特异性抗体需要7-14天，抗体检测相对于抗原检测具有时间滞后性，不能及时发现、及时治疗；抗原检测只能检测新型冠状病毒、甲型和乙型流感病毒抗原，而无非检测呼吸道合胞病毒。
3、基于病毒核酸检测的试剂盒，操作相对繁琐、耗时较长，需要具有在专业的分子实验室进行检测以防止气溶胶等污染；基于病毒抗原检测的试剂盒，没有对流感病毒、新型冠状病毒和呼吸道合胞病毒检测进行整合，需要至少两次加样检测，试剂盒灵敏度相对较差，存在不少漏诊和假阳问题。
技术实现思路
1、鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种呼吸道病毒抗原联合检测试纸卡、试剂盒，以期解决现有技术中存在新型冠状病毒的检测耗时长、检测项目单一、多次采集样本；以及质控线在强阳样本中导致强度变弱的问题。本申请的检测试纸卡采用抗体检测样品中抗原的方式
2、为实现上述目的，本专利技术具体采用如下技术方案。
3、本专利技术的第一方面保护一种呼吸道病毒抗原联合检测试纸卡，所述联合检测试纸卡包括底板，所述底板上设置有第一试纸条和第二试纸条，所述第一试纸条包含第一结合垫和第一层析膜，所述第二试纸条包含第二结合垫和第二层析膜，所述第一层析膜上设置有检测线a、检测线b和质控线c1，所述第二层析膜上设置有检测线t1、检测线t2和质控线c2；
4、所述检测线a、检测线b、检测线t1和检测线t2分别包被有抗甲型流感病毒抗体、抗乙型流感病毒抗体、抗新型冠状病毒抗体和抗呼吸道合胞病毒抗体，
5、所述质控线c1和所述质控线c2均包被有羊抗鸡igy抗体，
6、所述第一结合垫上包被有由标记物标记的抗甲型流感病毒抗体、标记物标记的抗乙型流感病毒抗体和标记物标记的羊抗鸡igy抗体形成的第一混合物；
7、所述第二结合垫上包被有由标记物标记的抗新型冠状病毒抗体、标记物标记的抗呼吸道合胞病毒抗体和标记物标记的羊抗鸡igy抗体形成的第二混合物。
8、所述抗甲型流感病毒抗体、抗乙型流感病毒抗体、抗新型冠状病毒抗体和抗呼吸道合胞病毒抗体均为鼠源抗体。
9、本专利技术的抗原联合检测试纸卡可以快速、准确检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、新型冠状病毒、呼吸道合胞病毒，一次性取样可同时检测多种病原；同时采用了独立质控线c1和质控线c2，无论样本浓度高低，均对质控线c1和质控线c2无影响，避免无效测试的风险。
10、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述检测线a的抗甲型流感病毒抗体的工作浓度为1.0～1.5mg/ml。
11、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述检测线b的抗乙型流感病毒抗体的工作浓度为1.0～1.5mg/ml。
12、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述检测线t1的抗新型冠状病毒抗体的工作浓度为1.0～1.5mg/ml。
13、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述检测线t2的呼吸道合胞病毒抗体的工作浓度为1.0～1.5mg/ml。
14、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述质控线c1和所述质控线c2的羊抗鸡igy抗体的工作浓度均为0.5～1.0mg/ml。
15、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述标记物标记的抗甲型流感病毒抗体的工作浓度15～20wt％、标记物标记的抗乙型流感病毒抗体的工作浓度15～20wt％和标记物标记的羊抗鸡igy抗体的工作浓度15～20wt％。
16、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述标记物标记的抗新型冠状病毒抗体工作浓度10～15wt％、标记物标记的抗呼吸道合胞病毒抗体工作浓度20～30wt％和标记物标记的羊抗鸡igy抗体工作浓度15～20wt％。
17、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述第一层析膜和第二层析膜制备时使用的第一稀释液为：含有1～10wt％海藻糖的pbs缓冲液。
18、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述第一结合垫和第二结合垫制备时使用的第二稀释液为：含有1～10wt％海藻糖和含有1～10wt％蔗糖的pbs缓冲液。
19、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述底板的材质为pvc。
20、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述第一结合垫和第二结合垫的材质为聚酯纤维膜。
21、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述第一层析膜和第二层析膜的材质为硝酸纤维素膜。
22、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述第一试纸条还包括第一吸水垫、第一样品垫，所述第一样品垫、第一结合垫、第一层析膜和第一吸水垫依次首尾连接并固定于所述底板上。
23、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述第二试纸条均还包括第二吸水垫、第二样品垫，所述第二样品垫、第二结合垫、第二层析膜和第二吸水垫依次首尾连接并固定于所述底板上。
24、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述标记物选自胶体金颗粒或乳胶微球。
25、优选的，所述胶体金颗粒的粒径为70～80nm。
26、优选的，所述乳胶微球的粒径为70～80nm。
27、优选的，胶体金颗粒标记抗体的制备方法为：采用碱调节胶体金水溶液至碱性，接着与抗体混合，然后加入酪蛋白酸钠溶液封闭，得到胶体金颗粒标记的各抗体。
28、优选的，乳胶微球标记抗体的制备方法为：采用edc和nhs方法对乳胶进行活化处理，接着与抗体混合，然后加入酪蛋白酸钠溶液封闭，得到乳胶微球标记的各抗体。本专利技术的第一试纸条和第二试纸条采用大粒径的金颗粒或乳胶微球，提高抗原检测的灵敏度，有效降低漏检；标记物标记过程中，采用酪蛋白钠进行封闭，提高了特异性。
29、更有选的，所述酪蛋白溶液的浓度为8～12wt％。
30、更有选的，所述碱为碳酸钾。
31、本专利技术的联合检测试纸卡中，所述样品垫制备时使用的样品垫处理液为：含有0.5～1.5wt％edta、0.1～1.0wt％pvp、0.1～1wt％曲拉通100的tris-hcl缓冲液。
32、本专利技术的第二方面保护如上文所述的联合检测试纸卡的制备方法，包括如下步骤：
33、1)第一层析膜和第二层析膜的制备
【技术保护点】
1.一种呼吸道病毒抗原联合检测试纸卡，所述联合检测试纸卡包括底板，所述底板上设置有第一试纸条和第二试纸条，所述第一试纸条包含第一结合垫和第一层析膜，所述第二试纸条包含第二结合垫和第二层析膜，特征在于，所述第一层析膜上设置有检测线A、检测线B和质控线C1，所述第二层析膜上设置有检测线T1、检测线T2和质控线C2；
2.如权利要求1所述的联合检测试纸卡，其特征在于，所述检测线A的抗甲型流感病毒抗体的工作浓度为1.0～1.5mg/mL；
3.如权利要求2所述的联合检测试纸卡，其特征在于，所述底板的材质为PVC；
4.如权利要求3所述的联合检测试纸卡，其特征在于，胶体金颗粒标记抗体的制备方法为：采用碱调节胶体金水溶液至碱性，接着与抗体混合，然后加入酪蛋白酸钠溶液封闭，得到胶体金颗粒标记的各抗体；
5.如权利要求1-4任一项所述的联合检测试纸卡的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，1)中，所述划线时的喷量为1.0～1.2μL/cm；
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述胶体金水溶液的制备方法为：氯金酸和还原剂在溶剂进行反应，得到胶体金水溶液；
9.一种呼吸道病毒抗原联合检测试剂盒，其特征在于，所述联合检测试剂盒包含如权利要求1-4任一项所述的试纸卡；
10.如权利要求9所述的联合检测试剂盒，其特征在于，所述样本提取液包含pH值为8.0～10.5的Tris-HCL缓冲液、质量分数为0.5～1％S9、2.5～3.5％NaCl、体积分数为0.05～0.10％的吐温20和体积分数为0.01～0.02％的防腐剂；
...【技术特征摘要】
1.一种呼吸道病毒抗原联合检测试纸卡，所述联合检测试纸卡包括底板，所述底板上设置有第一试纸条和第二试纸条，所述第一试纸条包含第一结合垫和第一层析膜，所述第二试纸条包含第二结合垫和第二层析膜，特征在于，所述第一层析膜上设置有检测线a、检测线b和质控线c1，所述第二层析膜上设置有检测线t1、检测线t2和质控线c2；
2.如权利要求1所述的联合检测试纸卡，其特征在于，所述检测线a的抗甲型流感病毒抗体的工作浓度为1.0～1.5mg/ml；
3.如权利要求2所述的联合检测试纸卡，其特征在于，所述底板的材质为pvc；
4.如权利要求3所述的联合检测试纸卡，其特征在于，胶体金颗粒标记抗体的制备方法为：采用碱调节胶体金水溶液至碱性，接着与抗体混合，然后加入酪蛋白酸钠溶液封闭，得到胶体金颗粒标记的各抗体；
5.如权利要求1-4任一项所述的联合检测试纸卡的制备方法，其特征在于，包括如下步骤...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹建勋，李杨霞，杨丽阳，吴诗雯，
申请(专利权)人：江苏默乐生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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